蘇俊梅

【摘要】 目的：研究與分析血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間對臨床病原菌鑒別的意義。方法：選取2016年

2月-2017年2月本院發(fā)熱患者送檢病原微生物室的血培養(yǎng)標(biāo)本為研究對象，分析其血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間對鑒別臨床病原菌的應(yīng)用。結(jié)果：7226份血培養(yǎng)標(biāo)本檢測陽性率為5.83%（421/7226），在421份血培養(yǎng)陽性瓶中，同時(shí)為陽性標(biāo)本的厭氧瓶與需氧瓶共377份（89.55%），僅報(bào)陽性的厭氧瓶為21份（4.99%），僅報(bào)陽性的需氧瓶為23份（5.46%）。421份報(bào)陽性瓶中，共檢出菌株205株，病原菌主要以大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌及陰溝腸桿菌為主；陽性報(bào)警時(shí)間平均為（24.53±2.47）h。而需氧瓶與厭氧瓶的平均陽性報(bào)警時(shí)間分別為（18.60±1.29）、（17.30±1.31）h，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），各病原菌以及污染菌的平均陽性報(bào)警時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間有助于初步鑒別臨床病原菌及污染菌，為臨床明確診斷提早使用抗生素提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 血培養(yǎng)； 陽性報(bào)警時(shí)間； 病原菌鑒別； 臨床意義

Significance of Time to Positivity of Blood Culture for Clinical Pathogenic Bacteria Identification/SU Jun-mei.//Medical Innovation of China，2017，14（30）：121-124

【Abstract】 Objective：To study and analyze the significance of time to positivity of blood culture for clinical pathogenic bacteria identification.Method：The blood culture specimens of pathogenic microorganisms from fever patients in our hospital from February 2016 to February 2017 were selected as the research objects，the time to positivity of blood culture and its application in clinical pathogenic bacteria identification were analyzed.Result：The positive rate of 7226 blood culture specimens was 5.83%（421/7226），there were 377 bottles（89.55%） of anaerobic and aerobic bottles positive samples in 421 blood culture positive bottles，only 21（4.99%） of positive anaerobic bottles were reported，only 23（5.46%） of positive aerobic bottles were reported.205 strains were detected in 421 positive bottles.The main pathogenic bacteria were escherichia coli，pseudomonas aeruginosa，klebsiella pneumoniae，staphylococcus aureus and enterobacter cloacae，the average time to positivity was（24.53±2.47）h.the average time to positivity of aerobic bottles and anaerobic bottles was（18.60±1.29） and（17.30±1.31）h respectively，the difference was not statistically significant（P>0.05）.The average time to positivity of pathogenic bacteria and contaminated bacteria were compared，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：The blood culture time to positivity is helpful for the clinical pathogenic bacteria identification.It would provided evidence of laboratory for the diagnosis and early use of antibiotics for patients.

【Key words】 Blood culture； Time to positivity； Pathogenic bacteria identification； Clinical significance

First-authors address：Yunfu Peoples Hospital，Yunfu 527300，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.30.036

目前在對血流感染進(jìn)行臨床診斷以及確診的過程中，血培養(yǎng)是最主要的手段，然而臨床工作中血培養(yǎng)標(biāo)本存在一定的污染率，對判定血流感染存在一定的困難，容易誤導(dǎo)臨床。然而菌血癥的病情復(fù)雜嚴(yán)重，早診斷有利于臨床合理使用抗生素。因此，判斷血培養(yǎng)陽性菌株是病原菌或污染菌顯得尤其重要。血培養(yǎng)菌株的陽性報(bào)警時(shí)間（Time-to-positivity，TTP）是較具臨床價(jià)值和意義的指標(biāo)，同時(shí)也是血流感染診斷的參考標(biāo)準(zhǔn)，因此也逐漸成為了病情監(jiān)測以及血流感染診斷的關(guān)鍵手段[1-3]。研究表明，根據(jù)全自動血培養(yǎng)儀的報(bào)警機(jī)制、不同病原菌的生長特點(diǎn)以及觀察其TTP值可對臨床病原菌的種類進(jìn)行鑒別[4-5]。因此本文針對血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間對臨床病原菌鑒別的意義進(jìn)行了研究與分析，現(xiàn)報(bào)道如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年2月-2017年2月本院發(fā)熱患者送檢病原微生物室的血培養(yǎng)標(biāo)本7226份為研究對象。根據(jù)血培養(yǎng)釆血方法于患者發(fā)熱或寒戰(zhàn)初期并且未使用抗生素之前抽血，對已使用了抗生素的患者則于下次抗生素使用前抽血，在無菌狀態(tài)下采集成人血液標(biāo)本5～10 mL 6752份，注入梅里埃厭氧瓶3584份與需氧瓶3168份；采集兒童血液標(biāo)本2～5 mL 474份注入專用需氧瓶中，及時(shí)送檢。

1.2 儀器與方法 掃碼簽收臨床送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本，根據(jù)掃描識別的順序，對采集的血培養(yǎng)標(biāo)本立即放入法國梅里埃全自動血培養(yǎng)儀Bact/ALERT 3D 60、Bact/ALERT 3D 120，對血培養(yǎng)進(jìn)行隨時(shí)觀察，如果出現(xiàn)陽性報(bào)警提示，則記錄報(bào)警時(shí)間，立即轉(zhuǎn)種血瓊脂平板及巧克力平板置于37 ℃ 5%的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)進(jìn)行涂片、革蘭染色，將涂片結(jié)果初步報(bào)告臨床。

1.3 陽性病原菌與懷疑污染菌的鑒定 按照操作規(guī)范對轉(zhuǎn)種后生長的菌株進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏試驗(yàn)。儀器采用法國梅里埃公司VITEK 2 COMPACT全自動微生物鑒定藥敏分析儀，質(zhì)控菌株為：銅綠假單胞菌（ATCC27853）、大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC29213）等，上述菌株均由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。如果血培養(yǎng)儀的培養(yǎng)標(biāo)本5 d后未發(fā)生陽性報(bào)警提示，則顯示為陰性，且報(bào)告培養(yǎng)5 d沒有細(xì)菌生長。懷疑污染菌檢測方式也按照上述檢測方法操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用微生物統(tǒng)計(jì)軟件WHONET5.6進(jìn)行病原菌統(tǒng)計(jì)，同一患者同種病原菌只統(tǒng)計(jì)一次。采用SPSS 20.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)陽性率以及報(bào)陽性時(shí)間 7226份血培養(yǎng)標(biāo)本檢測為陽性的為421份（5.83%），見表1。在421份血培養(yǎng)陽性瓶中，同時(shí)為陽性標(biāo)本的厭氧瓶與需氧瓶共377份（89.55%），僅報(bào)陽性的厭氧瓶為21份（4.99%），僅報(bào)陽性的需氧瓶為23份（5.46%）。需氧瓶與厭氧瓶的平均TTP分別為（18.60±1.29）、（17.30±1.31）h，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。421份報(bào)陽性瓶中，共檢出菌株205株；TTP平均為（24.53±2.47）h。

2.2 血培養(yǎng)病原菌檢測種類及TTP比較 在懷疑污染菌中，凝固酶陰性葡萄球菌的TTP為（24.69±2.18）h，其中表皮葡萄球菌的TTP為（23.59±2.25）h，病原菌金黃色葡萄球菌的TTP（12.46±1.04）h。 主要病原菌分布占比與各陽性報(bào)警時(shí)間段分布，見表2。

3 討論

目前在臨床診療感染性疾病的過程中，全自動血培養(yǎng)儀的應(yīng)用十分廣泛，而由于留置導(dǎo)管以及各種侵入性檢查的大量使用，使得血流感染的發(fā)生幾率也逐漸增大[6-8]。而在病情監(jiān)測、指導(dǎo)臨床疾病診斷以及使用抗生素的過程中，血培養(yǎng)的監(jiān)測具有十分重要的價(jià)值和意義[9-11]。研究表明，在分離血培養(yǎng)標(biāo)本中的致病菌時(shí)，其一般會在72 h內(nèi)發(fā)出陽性報(bào)警信號，因此為血流感染患者使用抗菌藥物提供了一定參考依據(jù)[12-13]。血培養(yǎng)陽性病原菌主要為革蘭陰性桿菌，其以大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌及陰溝腸桿菌為主，革蘭陽性球菌主要為金黃色葡萄球菌。本研究結(jié)果顯示，腸桿菌科細(xì)菌中大部分大腸埃希菌陽性報(bào)警時(shí)間較短，很多菌株能夠在12 h內(nèi)報(bào)警，最早TTP為6.5 h，可能是由于其能夠產(chǎn)酸產(chǎn)氣，繁殖速度較快，產(chǎn)生的大量的二氧化碳較早的觸發(fā)陽性報(bào)警。而金黃色葡萄球菌也能夠在24 h內(nèi)出現(xiàn)陽性報(bào)警，葡萄球菌與腸桿菌科TTP值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。有研究表明，在48 h內(nèi)，葡萄球菌屬中90.9%均會發(fā)生陽性報(bào)警，而超過48 h的100%的凝固酶陰性葡萄球菌即為污染菌[14]。本文研究結(jié)果顯示，在懷疑污染菌中，凝固酶陰性葡萄球菌的TTP為（24.69±2.18）h，其中表皮葡萄球菌的TTP為（23.59±2.25）h，病原菌金黃色葡萄球菌的TTP（12.46±1.04）h。各病原菌以及污染菌的平均陽性報(bào)警時(shí)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），TTP時(shí)間延長增加了污染菌懷疑的可能性，且棒狀桿菌污染菌、微球菌屬、鏈球菌等均如此。因此，凝固酶陰性的葡萄球菌、革蘭陽性桿菌、微球菌屬污染率較高，雖然大多數(shù)陽性報(bào)警時(shí)間在36 h內(nèi)，也應(yīng)該結(jié)合臨床資料以及PCT等炎癥指標(biāo)具體分析判斷是否為血流感染。

本研究通過對比分析發(fā)現(xiàn)，在421份血培養(yǎng)陽性瓶中，同時(shí)為陽性標(biāo)本的厭氧瓶與需氧瓶共377份（89.55%），僅報(bào)陽性的厭氧瓶為21份（4.99%），僅報(bào)陽性的需氧瓶為23份（5.46%），陽性報(bào)警時(shí)間平均為（24.53±2.47）h。而需氧瓶與厭氧瓶的平均陽性報(bào)警時(shí)間分別為（18.60±1.29）、

（17.30±1.31）h，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。僅報(bào)陽性的厭氧瓶的病原菌主要為大腸埃希菌、陰溝腸桿菌等兼性厭氧的腸桿菌科細(xì)菌，而在僅報(bào)陽性的需氧瓶中的病原菌中以不動桿菌屬及銅綠假單胞菌為主。本研究發(fā)現(xiàn)，臨床常見的大多數(shù)的兼性厭氧菌諸如大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌等其需氧瓶與厭氧瓶TTP值差異不大，部分厭氧瓶甚至比需氧瓶提前報(bào)警，少數(shù)血流感染患者只有單瓶血培養(yǎng)陽性，因此雙瓶送檢更加有利于提高陽性檢出率以及早出現(xiàn)陽性報(bào)警。若懷疑血流感染患者可適當(dāng)延長血培養(yǎng)時(shí)間。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)存在部分假陽性的血培養(yǎng)標(biāo)本，其主要來源于腫瘤科或血液內(nèi)科的患者，此類患者可能由于白細(xì)胞過多而產(chǎn)生假陽性。此外，部分假陽性的標(biāo)本由于釆血過多，多余的血細(xì)胞產(chǎn)生過量的二氧化碳而觸發(fā)假陽性報(bào)警。

本研究顯示，各污染菌的影響報(bào)警時(shí)間差異較大，血培養(yǎng)陽性標(biāo)本的污染菌以凝固酶陰性的葡萄球菌及革蘭陽性桿菌為主，其大部分為人體皮膚正常菌群或環(huán)境污染菌。在使用抗菌藥物的過程中，污染菌的影響較大，會對患者的臨床治療產(chǎn)生十分嚴(yán)重的影響，從而增加其額外檢查以及住院治療的時(shí)間等，標(biāo)本量、采集標(biāo)本的時(shí)間以及使用的抗菌藥物均會對TTP產(chǎn)生一定的影響，規(guī)范血培養(yǎng)的操作有利于微生物實(shí)驗(yàn)室為臨床提供更加準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果以及減少資源浪費(fèi)。因此，對血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間與病原菌之間的關(guān)系以及其在鑒別臨床病原菌和污染菌方面加強(qiáng)研究具有十分重要的臨床價(jià)值和意義[15-20]。endprint

綜上所述，血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間能夠初步鑒別臨床病原菌，采用血培養(yǎng)陽性報(bào)警時(shí)間對臨床病原菌進(jìn)行初步鑒別具有一定的推廣價(jià)值。

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（收稿日期：2017-09-12） （本文編輯：董悅）endprint