劉美香， 馬麗麗， 蔡姝萍

前循環(huán)腦梗死患者血清PLGF水平與頸動(dòng)脈粥樣斑塊超聲特征的相關(guān)性研究

劉美香， 馬麗麗， 蔡姝萍

目的 通過對(duì)頸內(nèi)動(dòng)脈系腦梗死患者進(jìn)行頸動(dòng)脈彩超檢查，結(jié)合檢測(cè)胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)水平，探尋頸動(dòng)脈易損斑塊的敏感生物學(xué)標(biāo)志物。方法 根據(jù)頸動(dòng)脈超聲檢查情況分為無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組、不穩(wěn)定斑塊組。對(duì)照組為年齡、性別與腦梗死組相匹配的同期住院的非腦血管病患者58例。所有研究對(duì)象均采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血清PLGF，并進(jìn)行頸動(dòng)脈超聲檢查和卒中危險(xiǎn)因素的測(cè)定，資料中數(shù)據(jù)均應(yīng)用 SPSS17.0軟件進(jìn)行分析。結(jié)果 (1)腦梗死組PLGF水平高于對(duì)照組，CAS斑塊總檢出率及不穩(wěn)定斑塊檢出率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(2)不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組(P<0.05)；結(jié)論 (1)急性腦梗死患者PLGF水平增高，提示PLGF參與了腦梗死的發(fā)生發(fā)展過程；(2)急性腦梗死患者不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，提示PLGF水平越高，CAS斑塊的穩(wěn)定性越差，PLGF可作為頸動(dòng)脈易損斑塊的敏感生物學(xué)標(biāo)志物來評(píng)估頸動(dòng)脈病變的嚴(yán)重程度。

急性腦梗死； 胎盤生長(zhǎng)因子； 頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于頸動(dòng)脈粥樣硬化(CAS)易損斑塊的評(píng)估手段主要有血清生物學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)、頭頸部血管彩超檢查、CTA、MRI等影像學(xué)檢查。雖然影像學(xué)檢查，尤其是MRI能夠準(zhǔn)確反映頸動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的形態(tài)和成分，但價(jià)格昂貴，操作性差；超聲學(xué)檢查頸動(dòng)脈易損斑塊的歷史較久，可操作性較好，能很好地顯示斑塊的形態(tài)，并且能對(duì)斑塊穩(wěn)定性做出較為準(zhǔn)確地判斷。胎盤生長(zhǎng)因子(placenta gronth factor，PLGF)能促進(jìn)早孕時(shí)滋養(yǎng)細(xì)胞增殖與分化，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，抗內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，并能增加血管的通透性，能增強(qiáng)低濃度的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的生物學(xué)活性，是參與多種腫瘤血管生成的重要的促血管生成因子。

本研究通過對(duì)頸內(nèi)動(dòng)脈系腦梗死患者進(jìn)行頸動(dòng)脈彩超檢查，結(jié)合檢測(cè)PLGF水平，探尋頸動(dòng)脈易損斑塊的敏感生物學(xué)標(biāo)志物，為臨床防治動(dòng)脈粥樣硬化及缺血性腦血管病提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年6月～2014年9月在開封市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院發(fā)病3 d以內(nèi)的急性前循環(huán)腦梗死患者290例，男性200例，女性90例，年齡33～88歲，平均(61.8±11.5)歲。其中有高血壓病238例、糖尿病88例、冠心病24例、卒中史46例。診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2005年人民衛(wèi)生出版社出版的第二版神經(jīng)病學(xué)(吳江主編，八年制)制定的標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)頭部CT和(或)頭部MRI證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有意識(shí)障礙或存在嚴(yán)重合并癥而不能完成檢查或神經(jīng)功能評(píng)定的患者；(2)有房顫、風(fēng)濕性心臟病或脈管炎等可能導(dǎo)致腦栓塞的患者；(3)近1 m內(nèi)有急性冠狀動(dòng)脈綜合征病史者；(4)存在嚴(yán)重心肝腎疾病、嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良或合并有免疫性疾病者；(5)2 w內(nèi)使用過影響血小板聚集、他汀類的藥物者；(6)腫瘤、妊娠患者；(7)感染發(fā)熱、月經(jīng)期婦女、免疫接種者。

根據(jù)頸動(dòng)脈超聲檢查責(zé)任血管情況分為無斑塊組(血管內(nèi)膜< 1.5 mm)、穩(wěn)定斑塊組(斑塊回聲增強(qiáng)、等回聲或混合性回聲)、不穩(wěn)定斑塊組(斑塊回聲為低回聲)。選擇同期住院的年齡、性別與腦梗死組相匹配的非腦血管病患者58例為對(duì)照組，包括周圍神經(jīng)病患者14例，脊髓疾病患者2例，神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病患者2例，運(yùn)動(dòng)障礙疾病患者1例，非中樞性頭暈患者33例，心因性軀體感覺障礙疾病2例，癡呆患者2例，動(dòng)脈瘤患者1例，體位性低血壓患者1例。男性27例，女性31例，年齡34～79歲，平均(62.2±10.4)歲。腦梗死患者和對(duì)照組在年齡、性別、高血壓病、糖尿病、冠心病、吸煙、飲酒傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 PLGF的檢測(cè) 試劑盒購(gòu)自上海亞培生物科技有限公司。取靜脈血4 ml注入含樣品保護(hù)劑(抗氧化劑)的試管中，輕輕混勻，靜置在冰盒中，待其自然沉降、凝固；而后低溫高速離心，以3500 r/min離心10 min，取上層血清，置于-20 ℃保存，每批樣本集齊后采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

(ELISA)檢測(cè)。試驗(yàn)原理：將特異性單克隆抗體包被固相載體，與待測(cè)樣品中PLGF結(jié)合，再加入酶標(biāo)記特異性抗體，然后加入底物顯色。用酶標(biāo)儀在 450 nm處測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)血清濃度與OD值進(jìn)行回歸后計(jì)算樣品濃度。

1.3 頸動(dòng)脈超聲檢查 使用美國(guó)GE公司VVID-7型頸動(dòng)脈彩色多普勒超聲儀檢查，探頭頻率8.0～12.0 MHz。受檢者取仰臥位，從頸動(dòng)脈起始處開始至頸內(nèi)動(dòng)脈入顱顯示不清為止，分別檢測(cè)雙側(cè)頸總動(dòng)脈、頸總動(dòng)脈分叉處及頸內(nèi)動(dòng)脈顱外段、頸外動(dòng)脈、椎動(dòng)脈、鎖骨下動(dòng)脈。測(cè)量并記錄頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)、管腔內(nèi)徑、粥樣硬化斑塊部位、數(shù)量、內(nèi)膜面光整程度及回聲類型等。

斑塊判斷標(biāo)準(zhǔn)：IMT<1.0 mm為正常；1.0 mm≤IMT<1.5 mm為內(nèi)膜增厚；IMT≥1.5 mm為動(dòng)脈粥樣硬化粥斑塊形成，根據(jù)斑塊對(duì)聲波吸收和反射所表現(xiàn)出的聲學(xué)特征，分為穩(wěn)定斑塊，不穩(wěn)定斑塊，混合性斑塊。

2 結(jié) 果

2.1 腦梗死組與對(duì)照組PLGF水平、不同類型頸動(dòng)脈斑塊超聲檢出率比較 腦梗死組PLGF水平較對(duì)照組明顯增高，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。腦梗死組CAS斑塊總檢出率(67.6%)高于對(duì)照組(46.5%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中腦梗死組不穩(wěn)定斑塊檢出率(43.8%)高于對(duì)照組(15.5%)，差異顯著(P<0.05)，而兩組穩(wěn)定斑塊檢出率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(見表1)。

2.2 腦梗死患者不同頸動(dòng)脈斑塊超聲學(xué)特征血PLGF水平比較 不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表1 腦梗死組與對(duì)照組PLGF水平、不同類型頸動(dòng)脈斑塊超聲檢出率比較

組別例數(shù)PLGF(ng/L)無斑塊組穩(wěn)定斑塊組不穩(wěn)定斑塊組F值P值946912783．691±21．154139．854±20．362?220．636±36．652?★13．1860

注：與無斑塊組比較*P<0.05，與穩(wěn)定斑塊組比較★P<0.05

3 討 論

PLGF最早于1991年由Maglione等[1]從人的胎盤cDNA文庫(kù)中分離純化而得，屬于血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)家族中的一個(gè)新成員。除胎盤外，心臟、甲狀腺、骨骼肌及肺等組織亦可表達(dá)PLGF mRNA[2]。PLGF在生物學(xué)活性時(shí)呈二聚體結(jié)構(gòu)，有PLGF-1/PLGF131、PLGF-2/PLG152和PLGF-3/PLGF2033個(gè)亞型，3個(gè)亞型除長(zhǎng)短不一外，分泌特性和受體親和力也不一樣。PLGF各亞型通過結(jié)合fms樣酪氨酸激酶受體-1(Fit-1/VEGFR-1)發(fā)揮其病理生理功能。PLGF-1與Fit-1有很強(qiáng)的親和力，可使Fit-1轉(zhuǎn)磷酸化，激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，在疾病狀態(tài)下Fit-1表達(dá)明顯上調(diào)。PLGF通過與其受體VEGFR-1/Flt-1特異性結(jié)合而發(fā)揮一系列病理生理學(xué)作用，由于VEGFR-1不僅存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，還存在于單核/巨噬細(xì)胞表面，因此具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、增加微血管通透性、誘導(dǎo)血管生成等多種功能；在早期動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成中發(fā)揮著重要作用[3]；近幾年其與心血管疾病相關(guān)研究較多，Ronald等[4]研究表明當(dāng)機(jī)體低氧時(shí)心臟血管中PLGF的表達(dá)較多，在病理性新生血管中PLGF的表達(dá)是上調(diào)的。慢性心力衰竭患者血清PLGF水平顯著升高，且與心力衰竭程度呈正相關(guān)[5]。急性心肌梗死(AMI)患者中PIGF的含量較正常心肌組織表達(dá)升高，在早期聯(lián)合檢測(cè)PIGF的含量變化，有利于對(duì)AMI早期心肌壞死程度的評(píng)估及危險(xiǎn)終末事件發(fā)生率的預(yù)測(cè)[6]。PIGF在低氧及缺血心肌中的表達(dá)是增高的，并且與其程度成正相關(guān)，這表明PIGF參與心肌缺血及低氧代謝。杜歡、郭茂娟等[7]認(rèn)為PLGF在缺血性疾病的作用：(1)PLGF只參與病理狀態(tài)下的新生血管生成，而對(duì)正常血管發(fā)育影響不大；(2)PLGF具有巨噬細(xì)胞趨化性；(3)PLGF與VEGF有協(xié)同作用。在對(duì)頸動(dòng)脈粥樣斑塊的研究中，Pilarczyk等[8]發(fā)現(xiàn)，有癥狀的患者 PLGF表達(dá)的水平明顯高于無癥狀的患者，并且炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和微血管的生成前者均明顯高于后者，PLGF的表達(dá)與 C反應(yīng)蛋白(CRP)及 CD40配體(CD40L)均呈正相關(guān)，提示 PLGF在 動(dòng)脈粥樣硬化患者的斑塊不穩(wěn)定及臨床表現(xiàn)中起一定作用。PIGF還可以動(dòng)員單核/巨噬細(xì)胞，參與血管壁的炎癥反應(yīng)，刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖，引起斑塊不穩(wěn)定[9]。本研究發(fā)現(xiàn)腦梗死組PLGF水平及CAS不穩(wěn)定斑塊檢出率高于對(duì)照組，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而兩組穩(wěn)定斑塊檢出率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示急性腦梗死患者PLGF水平增高，CAS不穩(wěn)定斑塊檢出率高，PLGF水平越高，CAS斑塊的穩(wěn)定性越差；其促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊增長(zhǎng)和導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定的作用機(jī)制可能為：(1)通過趨化作用使單核細(xì)胞黏附聚集；(2)使巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)到早期動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，通過巨噬細(xì)胞產(chǎn)生蛋白溶解酶，促使纖維帽破裂；(3)引起血管平滑肌細(xì)胞增殖，促進(jìn)斑塊內(nèi)新生血管形成造成斑塊內(nèi)出血；(4)通過促進(jìn)組織因子分泌而形成血栓。

因此，血清PIGF是一種簡(jiǎn)便可行的前瞻性早期診斷動(dòng)脈粥樣硬化的指標(biāo)，結(jié)合頸部血管彩超更有效、確切評(píng)估動(dòng)脈斑塊病變嚴(yán)重程度及穩(wěn)定性；對(duì)缺血性腦缺血病有較好的預(yù)警及評(píng)估價(jià)值。

[1]Maglione D，Guerriero V，Viglietto G，et al. Two alternative mRNAs coding for the angiogenic factor，placenta growth factor(PLGF)，are transcribed from a single gene of chromosome 14[J]. Oncongene，1993，8：925-931.

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Correlation between serum Placenta growth factor and the color Dopplor ultrasonography of plaque in carotid arteries of cerebral infarction patients with anterior infarction

LIUMeixiang，MALili，CAIShuping.

(TheCentralHospitalofKaifeng，Kaifeng475000，China)

Objective To investigate the correlation between the Placenta growth factor(PLGF)in blood and the color dopplor ultrasonography data of carotidarteries plaque of cerebral infarction(CI)patients with anterior infarction. Methods All the pPatients were divided into 3 groups：non-plaque group，stable plaque group，unstable plaque group. At the same time 58 patients who without ischemic cerebrovascular disease were selected as control group. All the subjects were examined the levels of serum PLGF and were examined by carotid artery color dopplor ultrasonography. Date in tThe datea are were application applied with SPSS17.0 software for analysis. Results The level of PLGF in the patients of the CI group was significantly higher than those of the control group(P<0.05). The rates of overall plaques and unstable plaques of the CI group were significantly higher than those of the control group，The levels of serum PLGF in the patients of the unstable plaques group are were significantly higher than those of the non-plaque group and stable plaques group. Conclusion High rate of plaques of carotid artery was found in CI patients，mostly were unstable plaques. The level of PLGF was correlated with the unstable plaques. PLGF can be sensitive of carotid vulnerable plaques biological marker to evaluate the severity of the carotid artery lesions.

Cerebral infarction； Lacenta growth factor； Arotid atheromatous sclerosis plaques

2016-11-10；

2017-03-04

(開封市中心醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，河南 開封 475000)

馬麗麗，E-mail：xiangxin2007@163.com

1003-2754(2017)03-0265-03

R743

A