張 帆 史長(zhǎng)河 許予明 張化彪(通訊作者)

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 鄭州 450002

脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)3型發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展

張 帆 史長(zhǎng)河 許予明 張化彪(通訊作者)

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 鄭州 450002

共濟(jì)失調(diào)；Ataxin-3；發(fā)病機(jī)制

脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)3型(Spinocerebellar ataxia type 3，SCA3)又稱為馬查德約瑟夫病(Machado-Joseph Disease，MJD)，是我國(guó)遺傳性共濟(jì)失調(diào)(Hereditary Ataxia，HA)中最常見(jiàn)的亞型，約占所有遺傳性共濟(jì)失調(diào)的60%，其患病率為3～5/10萬(wàn)，僅我國(guó)就有4萬(wàn)余名患者[1-2]。該病以進(jìn)展性小腦型共濟(jì)失調(diào)為主要臨床表現(xiàn)，主要包括步態(tài)不穩(wěn)、肢體搖晃、動(dòng)作準(zhǔn)確性變差等，可伴眼外肌麻痹、吞咽困難、舌肌纖顫、錐體征及錐體外系征等其他臨床表現(xiàn)[3-4]，多數(shù)患者在起病后10～20 a內(nèi)失去運(yùn)動(dòng)能力。目前此類(lèi)疾病的常規(guī)治療只能改善臨床癥狀，缺乏有效治療手段，給患者及其家庭造成極大的軀體、精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此對(duì)脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)3型發(fā)病機(jī)制進(jìn)行深入研究，尋找新的治療靶點(diǎn)具有重要意義，本文就其致病基因、致病蛋白、包涵體形成、Ataxia-3毒性片段形成、蛋白質(zhì)質(zhì)量控制系統(tǒng)異常、轉(zhuǎn)錄異常、線粒體功能異常、RNA異常等方面做一簡(jiǎn)要綜述。

1 SCA3的致病基因和致病蛋白Ataxin-3

1．1 致病基因—Ataxin-3基因 SCA3是一種常染色體顯性遺傳病，由Ataxin-3基因(又稱為MJD1基因)突變所致。1994年，日本科學(xué)家Yoshiya Kawaguchi等[5]首先發(fā)現(xiàn)并報(bào)道了Ataxin-3基因。Ataxia-3基因位于14號(hào)染色體長(zhǎng)臂，含有11個(gè)外顯子，其10號(hào)外顯子中有一段CAG重復(fù)序列(圖1)[6]。正常人Ataxin-3基因CAG重復(fù)次數(shù)為12～44次，當(dāng)CAG重復(fù)次數(shù)≥52次時(shí)，即會(huì)發(fā)病，而當(dāng)CAG重復(fù)次數(shù)在45～51次時(shí)，疾病不完全外顯(即可能會(huì)發(fā)病或發(fā)病時(shí)癥狀不典型)[7-8]，因其由CAG重復(fù)過(guò)多而使其翻譯形成過(guò)長(zhǎng)的多聚谷氨酰胺鏈而致病，故SCA3是一種多聚谷氨酰胺病。

1．2 致病蛋白—Ataxin-3蛋白 Ataxia-3蛋白是一種廣泛表達(dá)的去泛素化酶，分子量約42 kDa(千道爾頓)，因多聚谷氨酰胺鏈長(zhǎng)短不一，分子量會(huì)有所差異，該蛋白具有3個(gè)重要結(jié)構(gòu)：Josephin結(jié)構(gòu)域、泛素結(jié)合區(qū)(ubiquitin interacting motifs，UIM)和PolyQ序列(圖1)。其Josephin 結(jié)構(gòu)域具有去泛素化酶活性，UIM結(jié)構(gòu)域則可特異地識(shí)別并結(jié)合泛素化的蛋白底物。Ataxia-3通過(guò)其UIM結(jié)構(gòu)特異識(shí)別泛素化的蛋白底物，進(jìn)而通過(guò)其Josephin結(jié)構(gòu)域發(fā)揮去泛素化酶活性，使與其結(jié)合的底物去泛素化，調(diào)節(jié)底物蛋白的活性和穩(wěn)定性[9-10]。Ataxia-3的PolyQ結(jié)構(gòu)為其致病突變直接調(diào)控的結(jié)構(gòu)，可抑制組蛋白乙?；^(guò)程而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

2 發(fā)病機(jī)制

目前SCA3確切發(fā)病機(jī)制仍不十分清楚，下面將從包涵體形成、Ataxia-3毒性片段形成、轉(zhuǎn)錄異常、RNA異常、蛋白質(zhì)質(zhì)量控制系統(tǒng)異常、線粒體功能異常等方面進(jìn)行敘述(圖2)。

2．1 包涵體形成 神經(jīng)元內(nèi)廣泛的包涵體形成是SCA3病人及動(dòng)物模型最早發(fā)現(xiàn)的特征病理改變，主要位于細(xì)胞核內(nèi)，此外軸突內(nèi)亦可形成少量包涵體[11-12]。軸突內(nèi)的包涵體可干擾神經(jīng)元的軸漿運(yùn)輸，進(jìn)而導(dǎo)致神經(jīng)元功能受損；而核內(nèi)包涵體形成的意義目前仍存在較大爭(zhēng)議；有研究提示包涵體具有毒性作用，神經(jīng)元內(nèi)包涵體形成的多少與疾病嚴(yán)重程度成相關(guān)，包涵體中成分復(fù)雜，其中包括泛素、蛋白酶體組分、分子伴侶、轉(zhuǎn)錄因子、正常Ataxia-3蛋白等細(xì)胞內(nèi)必需組分，這些重要物質(zhì)聚集在包涵體內(nèi)，不能正常發(fā)揮相應(yīng)功能，進(jìn)而影響細(xì)胞內(nèi)多種代謝過(guò)程，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)環(huán)境紊亂[12-13]；但也有學(xué)者認(rèn)為包涵體形成具有保護(hù)作用，可將毒性蛋白聚集到包涵體中，避免對(duì)細(xì)胞的進(jìn)一步損傷[11]。目前認(rèn)為包涵體形成是由突變的Ataxia-3蛋白裂解而促發(fā)。

2．2 Ataxia-3毒性片段的形成 Ataxia-3蛋白可被鈣蛋白酶(Calpain)裂解形成C端片段和N端片段，其中polyQ位于C端片段，正常情況下C端片段及N端片段均可被降解，不會(huì)聚集形成包涵體；突變的Ataxia-3被calpain裂解后，其含延長(zhǎng)的polyQ的C-端片段形成不溶性的核內(nèi)包涵體。體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)抑制鈣蛋白酶的活性可減少SCA3小鼠動(dòng)物模型的包涵體形成，緩解其神經(jīng)系統(tǒng)退行性變；增強(qiáng)鈣蛋白酶的活性，則使SCA3小鼠模型的神經(jīng)系統(tǒng)退行性變加重[14-15]。相應(yīng)的體外實(shí)驗(yàn)顯示增加鈣蛋白酶的活性可促進(jìn)Ataxia-3 C端毒性片段形成，使不溶性聚集體形成增加，并導(dǎo)致細(xì)胞凋亡增加[16]。且相對(duì)于全長(zhǎng)的Ataxia-3蛋白裂解后形成含延長(zhǎng)的polyQ的C端片段具有更強(qiáng)的毒性，故可將含延長(zhǎng)polyQ的Ataxia-3的 C端片段視為毒性片段[14-16]。

2．3 轉(zhuǎn)錄異常 轉(zhuǎn)錄異常被認(rèn)為在SCA3發(fā)病過(guò)程中起重要作用。在SCA3發(fā)病過(guò)程中，轉(zhuǎn)錄因子可被結(jié)合到核內(nèi)包涵體中，使轉(zhuǎn)錄因子水平下調(diào)，不能發(fā)揮正常的轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能，引起轉(zhuǎn)錄異常[17]。此外，突變的Ataxia-3失去對(duì)組蛋白乙?；囊种?，組蛋白乙?；缴撸疝D(zhuǎn)錄異常[18]。有研究顯示，突變的Ataxia-3蛋白后，其亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)與DNA雙鏈的GAGGAA富集區(qū)相互作用異常，影響轉(zhuǎn)錄[19-22]。Chou等[23]利用SCA3小鼠模型對(duì)腦組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究，結(jié)果表明：谷氨酸能神經(jīng)遞質(zhì)傳遞相關(guān)的基因、熱休克蛋白(Heat Shock Protein，HSP)、調(diào)控神經(jīng)細(xì)胞存活及分化的轉(zhuǎn)錄因子、伽馬氨基丁酸受體亞基等的轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)；介導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞死亡的Bax、細(xì)胞周期蛋白D1等基因的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)。但SCA3疾病動(dòng)物模型的轉(zhuǎn)錄情況和SCA3病人并不完全相同，轉(zhuǎn)錄異常的確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

2．4 RNA異常 在SCA3發(fā)病進(jìn)展過(guò)程中，多種ataxia-3相關(guān)RNA存在異常。

Ataxia-3基因的CAG重復(fù)序列可編碼含CUG重復(fù)序列的RNA。Li等[24]的研究表明，含過(guò)長(zhǎng)CUG重復(fù)序列的RNA片段本身有毒性作用，在果蠅模型中，轉(zhuǎn)錄含過(guò)長(zhǎng)CUG重復(fù)序列的RNA，可導(dǎo)致果蠅神經(jīng)功能退化。進(jìn)一步研究顯示，含過(guò)長(zhǎng)CUG重復(fù)序列的RNA可形成發(fā)夾樣結(jié)構(gòu)，并和MBNL1(Muscleblind Like 1)在細(xì)胞核中共定位，提示其可將MBNL1募集到細(xì)胞核中，使MBNL1介導(dǎo)的RNA可變性剪接發(fā)生異常，進(jìn)而導(dǎo)致下游蛋白表達(dá)異常，并導(dǎo)致細(xì)胞功能異常[25]。

microRNA是一類(lèi)內(nèi)源性非編碼的線性小RNA，通過(guò)與靶基因信使RNA(Manage RNA，mRNA)3’端非編碼區(qū)特異性結(jié)合，調(diào)控靶基因表達(dá)。在SCA3病人血液中，發(fā)現(xiàn)miR-34b水平相比于正常人上調(diào)，miR-29a、miR25、miR-125b表達(dá)水平相比于正常人下調(diào)，提示miRNA參與SCA3發(fā)病過(guò)程[26]。此外，在SCA3動(dòng)物模型中，抑制miRNA的表達(dá)，可加重動(dòng)物模型的神經(jīng)功能缺損和病例改變；在SCA3細(xì)胞系中，阻斷miRNA可使Ataxia-3的毒性增加，并使細(xì)胞凋亡增加，提示干預(yù)miRNA可作為潛在靶點(diǎn)，但具體機(jī)制及干預(yù)方式仍需進(jìn)一步研究[27]。

此外，非ATG起始的翻譯過(guò)程、雙向轉(zhuǎn)錄等使神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生多種異常的毒性產(chǎn)物(如聚丙氨酸、聚絲氨酸等)，亦可能在SCA3發(fā)病中起到一定作用，影響神經(jīng)細(xì)胞功能，但相關(guān)研究少，具體機(jī)制仍不明確[28]。

2．5 蛋白質(zhì)質(zhì)量控制系統(tǒng)異常 SCA3主要通過(guò)影響分子伴侶系統(tǒng)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)降解途徑、泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-proteasome system，UPS)及自噬溶酶體通路(autophagy-lysosome pathway)等途徑影響蛋白質(zhì)降解過(guò)程。

熱休克蛋白在調(diào)控蛋白質(zhì)質(zhì)量控制系統(tǒng)，介導(dǎo)蛋白質(zhì)聚集及解聚，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等方面起重要作用[29]。在多種多聚谷氨酰胺病中，均發(fā)現(xiàn)在疾病早期熱休克蛋白表達(dá)上調(diào)，增加錯(cuò)誤折疊蛋白的在細(xì)胞中的溶解度，減少其聚集，而隨著疾病進(jìn)展，熱休克蛋白的水平持續(xù)下調(diào)[30-31]。在SCA3病人腦組織中，發(fā)現(xiàn)HSP40、HSP90在包涵體中和Ataxia-3共定位；而在SCA3動(dòng)物模型中，可見(jiàn)HSP40、HSP70的表達(dá)水平下調(diào)；此外，在SCA3病人來(lái)源的成纖維細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)HSP40的表達(dá)水平和SCA3的發(fā)病年齡相關(guān)聯(lián)；而在SCA3細(xì)胞模型中過(guò)表達(dá)HSP40時(shí)，神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的包涵體形成減少，可見(jiàn)熱休克蛋白在SCA3發(fā)病過(guò)程中起重要作用，上調(diào)熱休克蛋白可作為潛在的治療策略[23，32- 33]。

Ataxin 3參與調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)錯(cuò)誤折疊蛋白的降解。VCP/p97蛋白(valosin-containing protein，VCP)可使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中錯(cuò)誤折疊的分泌型蛋白離開(kāi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，并在蛋白酶體中降解，這一過(guò)程稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)降解途徑(endoplasmic reticulum associated degradation，ERAD)[34]。Ataxia-3可與VCP/p97結(jié)合，形成Ataxin 3-VCP/p97復(fù)合體，參與ERAD過(guò)程，調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)錯(cuò)誤折疊蛋白的降解[35]。突變的Ataxia-3蛋白可影響ERAD過(guò)程，突變的Ataxia-3與VCP/p97之間結(jié)合力增加，影響VCP/p97的底物蛋白從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中脫離，使VCP/p97的底物蛋白難以被轉(zhuǎn)運(yùn)至蛋白酶體降解，最終導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)錯(cuò)誤折疊蛋白降解的異常，即ERAD異常[36]。

泛素-蛋白酶體系統(tǒng)的功能在SCA3中受損。對(duì)于突變的Ataxia-3，其去泛素化活性并無(wú)明顯改變，但部分蛋白酶體組分被聚集在包涵體中，使蛋白酶體功能異常[37-38]。此外，泛素E3連接酶CHIP、Parkin在SCA3中表達(dá)下調(diào)，CHIP和Parkin均有神經(jīng)保護(hù)作用。突變的Ataxia-3蛋白使Parkin的泛素化水平降低，促使Parkin通過(guò)細(xì)胞自噬途徑降解增加，當(dāng)Ataxia-3聚集形成包涵體時(shí)，可與Parkin結(jié)合使其進(jìn)入包涵體中，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Parkin量降低，Parkin底物降解異常[39- 40]。一些研究表明，突變的Ataxia-3與CHIP親和力增加，在SCA3動(dòng)物模型中，CHIP表達(dá)下調(diào)，使CHIP的底物蛋白降解異常，但其具體機(jī)制尚不明確[40-41]。

自噬溶酶體通路在降解大分子蛋白復(fù)合物及維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的過(guò)程中起重要作用。一系列研究表明，自噬溶酶體通路在SCA3中受損[42-43]。Beclin1在自噬通路中起重要作用，在SCA3小鼠模型中，受累腦區(qū)Beclin1含量減少；過(guò)表達(dá)Beclin1，激活自噬系統(tǒng)，可緩解SCA3小鼠模型的神經(jīng)功能缺損并減少神經(jīng)元內(nèi)包涵體形成，提示自噬異常在SCA3發(fā)病過(guò)程中起重要作用，調(diào)控自噬通路可作為潛在的治療靶點(diǎn)[42-43]。

2．6 線粒體功能異常與細(xì)胞凋亡 既往研究表明，在亨廷頓病、脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)7型等多種polyQ疾病中，均存在線粒體能量代謝異常[44-45]。在SCA3細(xì)胞模型及動(dòng)物模型中，亦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞能量代謝障礙，其線粒體呼吸鏈復(fù)合體活性降低，導(dǎo)致自由基清除能力降低，自由基大量蓄積，一方面導(dǎo)致線粒體DNA損傷，DNA拷貝數(shù)降低，另一方面導(dǎo)致氧化壓力增加，最終促發(fā)細(xì)胞凋亡[46-47]。在SCA3患者受累腦區(qū)進(jìn)行病理染色，亦可見(jiàn)細(xì)胞凋亡的表現(xiàn)如核固縮、凋亡小體形成。目前關(guān)于線粒體功能異常及細(xì)胞凋亡在SCA3發(fā)病過(guò)程中所起到的作用仍不十分明確，有學(xué)者認(rèn)為抗氧化治療可能在SCA3治療中起一定作用，但具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究。

3 總結(jié)與展望

SCA3目前發(fā)病機(jī)制尚未明確，現(xiàn)主要通過(guò)對(duì)癥治療提高患者的生活質(zhì)量。而隨著科學(xué)的發(fā)展，隨著人類(lèi)對(duì)這一疾病機(jī)制研究的不斷深入，隨著基因治療、細(xì)胞治療等新的治療方式出現(xiàn)，必將為疾病治療提供了新的思路，更有效的治療靶點(diǎn)也會(huì)被不斷發(fā)現(xiàn)。相信在不久的將來(lái)，人類(lèi)對(duì)這一疾病定能找到更好的治療辦法。

圖1 Ataxin3基因及Ataxin3蛋白的基本結(jié)構(gòu)

圖2 SCA3發(fā)病機(jī)制模式圖

[1] Gan SR，Shi SS，Wu JJ，et al．High frequency of Machado-Joseph disease identified in southeastern Chinese kindreds with spinocerebellar ataxia[J]．BMC Med Genet，2010，11：47．

[2] Tang B，Liu C，Shen L，et al．Frequency of SCA1，SCA2，SCA3/MJD，SCA6，SCA7，and DRPLA CAG trinucleotide repeat expansion in patients with hereditary spinocerebellar ataxia from Chinese kindreds[J]．Arch Neurol，2000，57(4)：540-544．

[3] Riess O，Rub U，Pastore A，et al．SCA3：neurological features，pathogenesis and animal models[J]．Cerebellum，2008，7(2)：125-137．

[4] Rosenberg RN．Machado-Joseph disease：an autosomal dominant motor system degeneration[J]．Mov Disord，1992，7(3)：193-203．

[5] Kawaguchi Y，Okamoto T，Taniwaki M，et al．CAG expansions in a novel gene for Machado-Joseph disease at chromosome 14q32．1[J]．Nat Genet，1994，8(3)：221-228．

[6] Heilig R，Eckenberg R，Petit JL，et al．The DNA sequence and analysis of human chromosome 14[J]．Nature，2003，421(6 923)：601-607．

[7] Evers MM，Toonen LJ，van Roon-Mom WM．Ataxin-3 Protein and RNA Toxicity in Spinocerebellar Ataxia Type 3：Current Insights and Emerging Therapeutic Strategies[J]．Mol Neurobiol，2014，49(3)：1 513-1 531．

[8] Padiath QS，Srivastava AK，Roy S，et al．Identification of a novel 45 repeat unstable allele associated with a disease phenotype at the MJD1/SCA3 locus[J]．Am J Med Genet B Neuropsychiatr Genet，2005，133B(1)：124-126．

[9] Burnett B，Li F，Pittman RN．The polyglutamine neurodegenerative protein Ataxin-3 binds polyubiquitylated proteins and has ubiquitin protease activity[J]．Hum Mol Genet，2003，12(23)：3 195-3 205．

[10] Masino L，Musi V，Menon RP，et al．Domain architecture of the polyglutamine protein Ataxin-3：a globular domain followed by a flexible tail[J]．FEBS Lett，2003，549(1-3)：21-25．

[11] Seidel K，den Dunnen WFA，Schultz C，et al．Axonal inclusions in spinocerebellar ataxia type 3[J]．Acta Neuropathologica，2010，120(4)：449-460．

[12] Paulson HL，Perez MK，Trottier Y，et al．Intranuclear inclusions of expanded polyglutamine protein in spinocerebellar ataxia type 3[J]．Neuron，1997，19(2)：333-344．

[13] Chai Y，Wu L，Griffin JD，et al．The role of protein composition in specifying nuclear inclusion formation in polyglutamine disease[J]．J Biol Chem，2001，276(48)：44 889-44 897．

[14] Simoes AT，Goncalves N，Koeppen A，et al．Calpastatin-mediated inhibition of calpains in the mouse brain prevents mutant Ataxin 3 proteolysis，nuclear localization and aggregation，relieving Machado-Joseph disease[J]．Brain，2012，135(8)：2 428-2 439．

[15] Hubener J，Weber JJ，Richter C，et al．Calpain-mediated Ataxin-3 cleavage in the molecular pathogenesis of spinocerebellar ataxia type 3(SCA3)[J]．Hum Mol Genet．，2013，22(3)：508-518．

[16] Koch P，Breuer P，Peitz M，et al．Excitation-induced Ataxin-3 aggregation in neurons from patients with Machado-Joseph disease[J]．Nature，2011，480(7 378)：543-546

[17] Perez MK，Paulson HL，Pendse SJ，et al．Recruitment and the role of nuclear localization in polyglutamine-mediated aggregation[J]．J Cell Biol，1998，143(6)： 1 457-1 470．

[18] Evert B O，Araujo J，Vieira-Saecker AM，et al．Ataxin-3 Represses Transcription via Chromatin Binding，Interaction with Histone Deacetylase 3，and Histone Deacetylation[J]．J Neurosci，2006，26(44)：11 474-11 486．

[19] Li F，Macfarlan T，Pittman RN，et al．Ataxin-3 is a histone-binding protein with two independent transcriptional corepressor activities[J]．J Biol Chem，2002， 277(47)：45 004-45 012．

[20] Araujo J，Breuer P，Dieringer S，et al．FOXO4-dependent upregulation of superoxide dismutase-2 in response to oxidative stress is impaired in spinocerebellar ataxia type 3[J]．Human Molecular Genetics，2011，20(15)： 2 928-2 941．

[21] Wang G，Sawai N，Kotliarova S，et al．Ataxin-3，the MJD1 gene product，interacts with the two human homologs of yeast DNA repair protein RAD23，HHR23A and HHR23B[J]．Hum Mol Genet，2000， 9(12)：1 795-1 803．

[22] Landschulz WH，Johnson PF，Mcknight SL．The leucine zipper：a hypothetical structure common to a new class of DNA binding proteins[J]．Science，1988，240(4860)：1 759-1 764．

[23] Chou A，Yeh T，Ouyang P，et al．Polyglutamine-expanded Ataxin-3 causes cerebellar dysfunction of SCA3 transgenic mice by inducing transcriptional dysregulation[J]．Neurobiol Dis，2008，31(1)：89-101．

[24] Li L，Yu Z，Teng X，et al．RNA toxicity is a component of Ataxin-3 degeneration in Drosophila[J]．Nature，2008，453(7198)：1 107-1 111．

[25] Mykowska A，Sobczak K，Wojciechowska M，et al．CAG repeats mimic CUG repeats in the misregulation of alternative splicing[J]．Nucleic Acids Research，2011，39(20)：8 938-8 951．

[26] Shi Y，Huang F，Tang B，et al．MicroRNA profiling in the serums of SCA3/MJD patients[J]．Int J Neurosci，2013，124(2)：97-101．

[27] Bilen J，Liu N，Burnett BG，et al．MicroRNA pathways modulate polyglutamine-induced neurodegeneration[J]．Mol Cell，2006，24(1)：157-163．

[28] Zu T，Gibbens B，Doty NS，et al．Non-ATG-initiated translation directed by microsatellite expansions[J]．Proc Natl Acad Sci U S A，2011，108(1)：260-265．

[29] Kampinga HH，Bergink S．Heat shock proteins as potential targets for protective strategies in neurodegeneration[J]．Lancet Neurol，2016，15(7)：748-759．

[30] Muchowski PJ，Schaffar G，Sittler A，et al．Hsp70 and hsp40 chaperones can inhibit self-assembly of polyglutamine proteins into amyloid-like fibrils[J]．Proc Natl Acad Sci U S A，2000，97(14)：7 841-7 846．

[31] Huen NY，Chan HY．Dynamic regulation of molecular chaperone gene expression in polyglutamine disease[J]．Biochem Biophys Res Commun，2005，334(4)：1 074-1 084．

[32] Zijlstra MP，Rujano MA，Van Waarde MA，et al．Levels of DNAJB family members(HSP40)correlate with disease onset in patients with spinocerebellar ataxia type 3[J]．Eur J Neurosci，2010，32(5)：760-770．

[33] Ito N，Kamiguchi K，Nakanishi K，et al．A novel nuclear DnaJ protein，DNAJC8，can suppress the formation of spinocerebellar ataxia 3 polyglutamine aggregation in a J-domain independent manner[J]．Biochem Biophys Res Commun，2016，474(4)：626-633．

[34] Zhong X，Pittman RN．Ataxin-3 binds VCP/p97 and regulates retrotranslocation of ERAD substrates[J]．Hum Mol Genet，2006，15(16)：2 409-2 420．

[35] Wang Q，Li L，Ye Y．Regulation of retrotranslocation by p97-associated deubiquitinating enzyme Ataxin-3[J]．J Cell Biol，2006，174(7)：963-971．

[36] Wang Q，Li L，Ye Y．Regulation of retrotranslocation by p97-associated deubiquitinating enzyme Ataxin-3[J]．J Cell Biol，2006，174(7)：963-971．

[37] Chai Y，Koppenhafer SL，Shoesmith SJ，et al．Evidence for proteasome involvement in polyglutamine disease：localization to nuclear inclusions in SCA3/MJD and suppression of polyglutamine aggregation in vitro[J]．Hum Mol Genet，1999，8(4)：673-682．

[38] Winborn B J，Travis SM，Todi SV，et al．The deubiquitinating enzyme Ataxin-3，a polyglutamine disease protein，edits Lys63 linkages in mixed linkage ubiquitin chains[J]．J Biol Chem，2008，283(39)：26 436-26 443．

[39] Durcan TM，Kontogiannea M，Thorarinsdottir T，et al．The Machado-Joseph disease-associated mutant form of Ataxin-3 regulates parkin ubiquitination and stability[J]．Human Molecular Genetics，2010，20(1)：141-154．

[40] Durcan TM，F(xiàn)on EA．Ataxin-3 and Its E3 Partners：Implications for Machado-Joseph Disease[J]．Front Neurol，2013，4：46．

[41] Scaglione KM，Zavodszky E，Todi S V，et al．Ube2w and Ataxin-3 coordinately regulate the ubiquitin ligase CHIP[J]．Mol Cell，2011，43(4)：599-612．

[42] Nascimento-Ferreira I，Nobrega C，Vasconcelos-Ferreira A，et al．Beclin 1 mitigates motor and neuropathological deficits in genetic mouse models of Machado-Joseph disease[J]．Brain，2013，136(7)：2 173-2 188．

[43] Nascimento-Ferreira I，Santos-Ferreira T，Sousa-Ferreira L，et al．Overexpression of the autophagic beclin-1 protein clears mutant Ataxin-3 and alleviates Machado-Joseph disease[J]．Brain，2011，134(5)：1 400-1 415．

[44] Ajayi A，Yu X，Lindberg S，et al．Expanded Ataxin-7 cause toxicity by inducing ROS production from NADPH oxidase complexes in a stable inducible Spinocerebellar ataxia type 7(SCA7)model[J]．BMC Neurosci，2012，13(1)：86．

[45] Goswami A，Dikshit P，Mishra A，et al．Oxidative stress promotes mutant huntingtin aggregation and mutant huntingtin-dependent cell death by mimicking proteasomal malfunction[J]．Biochem Biophys Res Commun，2006，342(1)：184-190．

[46] Kazachkova N，Raposo M，Montiel R，et al．Patterns of Mitochondrial DNA Damage in Blood and Brain Tissues of a Transgenic Mouse Model of Machado-Joseph Disease[J]．Neurodegener Dis，2013，11(4)：206-214．

[47] Emerit J，Edeas M，Bricaire F．Neurodegenerative diseases and oxidative stress[J]．Biomed Pharmacother，2004，58(1)：39-46．

(收稿2016-11-14)

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1673-5110(2017)06-0124-05