超高效液相色譜三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定水產(chǎn)品中氯霉素類藥物殘留

陳 杰 天津市東麗區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所

氯霉素具有廣譜抗菌能力，被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)中。但氯霉素類藥物用于食用性動(dòng)物易導(dǎo)致在動(dòng)物源性食品中殘留量超標(biāo)，可引起人體再生障礙性貧血和溶血性貧血等，對(duì)人體產(chǎn)生嚴(yán)重危害，因此引起國(guó)內(nèi)外的廣泛重視。目前，大多數(shù)國(guó)家已嚴(yán)格限制其使用，并對(duì)食品中氯霉素類藥物的最高殘留量（MRL）進(jìn)行了規(guī)定。

本文對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《可食動(dòng)物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 20756-2006）和儀器自帶的方法進(jìn)行比較分析，以期為提高水產(chǎn)品檢驗(yàn)質(zhì)量，保障水產(chǎn)品安全性提供參考。結(jié)果表明，兩種方法檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），線性相關(guān)密切。儀器自帶方法檢測(cè)具有易操作，省時(shí)省力的優(yōu)點(diǎn)，可在對(duì)水產(chǎn)品中氯霉素類藥物殘留檢測(cè)中加以推廣應(yīng)用，樣品加標(biāo)回收率為81.5%～105.5%。

實(shí)驗(yàn)部分

實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備

實(shí)驗(yàn)材料：選取天津市市售水產(chǎn)品進(jìn)行加標(biāo)實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)儀器：超高效液相色譜儀于三重四極桿質(zhì)譜儀，具體配置為輸液泵，在線脫氣機(jī)，自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱，系統(tǒng)控制器等。

水產(chǎn)品中氯霉素的液相色譜條件

分析儀器：LC-30A 系統(tǒng)；色譜柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODSⅢ 2.0 mmI.D.×50 mmL.，1.6 μm；流動(dòng)相：A為水，B為乙腈；流速：0.4 mL/ min；進(jìn)樣體積：10μL；柱溫：40 ℃；洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為30%，時(shí)間程序見(jiàn)表1。

樣品制備

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：用甲醇配制10 mg/L的氯霉素混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，用甲醇-水溶液（V/V，50∶50）稀釋成0.2、0.5、1、5、10、50 μg/L和100 μg/L不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

樣品前處理：稱取5.00 g試樣至50 mL離心管中，加入25 mL乙酸乙酯，在均質(zhì)器中以14 000 r/min均質(zhì)30 s，以4 000 r/min離心5 min，上層乙酸乙酯提取液收集于50 mL平底燒瓶中，殘?jiān)尤?0 mL乙酸乙酯，重復(fù)上述操作，合并提取液；45 ℃減壓旋轉(zhuǎn)濃縮至干，殘留物用1 mL甲醇-水溶液（V/ V，50∶50）溶解，再加3.0 mL正己烷混合，并轉(zhuǎn)移至10 mL比色管中，渦動(dòng)混合30 s；以4 000 r/min離心2 min，棄去上層正己烷，移取下層，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾后，用液質(zhì)分析。

結(jié)果分析

線性關(guān)系

將濃度為0.2、0.5、1、5、10、50μg/L和100 μg/L氯霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液，按1.2中的分析條件進(jìn)行測(cè)定，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，外標(biāo)法制作校準(zhǔn)曲線，如圖1所示，氯霉素線性良好。線性方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表2。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法氯霉素線性如圖2所示。

圖1 儀器自帶方法氯霉素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

圖2 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法氯霉素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

基質(zhì)加標(biāo)實(shí)驗(yàn)

按1.3中樣品制備方法，樣品中添加混合標(biāo)樣，加標(biāo)含量見(jiàn)表2，各平行4次。測(cè)試結(jié)果顯示，水產(chǎn)品加標(biāo)回收率在81.5%～105.5%，見(jiàn)表2。

表2 加標(biāo)樣的回收率結(jié)果（n=4）

結(jié)論

使用儀器自帶方法和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法對(duì)氯霉素藥物殘留進(jìn)行檢測(cè)，兩種方法的線性良好相關(guān)系數(shù)均大于0.999?；|(zhì)加標(biāo)回收率在81.5%～105.5%。根據(jù)統(tǒng)計(jì)分析表明，二者線性關(guān)系極為顯著，并無(wú)明顯差異且符合良好。二者在檢測(cè)結(jié)果上并無(wú)實(shí)質(zhì)差異。表現(xiàn)的一致性較好。兩種方法的其他指標(biāo)對(duì)比顯示，前者的易操性、勞動(dòng)強(qiáng)度、計(jì)數(shù)準(zhǔn)確度及計(jì)數(shù)時(shí)長(zhǎng)均優(yōu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)法，因此值得被廣泛應(yīng)用于實(shí)際檢測(cè)中。