王新杰，王 霞，尚 磊，戴肖力

（河北省臨城縣人民醫(yī)院呼吸內科，河北邢臺054300）

慢性阻塞性肺疾病患者血清Clara細胞分泌蛋白CC16和SP-D水平與肺功能的關系

王新杰，王 霞，尚 磊，戴肖力

（河北省臨城縣人民醫(yī)院呼吸內科，河北邢臺054300）

目的 研究慢性阻塞性肺疾病的患者血清中Clara細胞分泌蛋白CC16和SP-D水平與患者肺功能的關系。方法選取在2013年12月至2014年12月之間，隨機選擇我院呼吸內科住院及門診受試患者。將患者隨機分為三組，A組為COPD的急性加重期（AECOPD）患者組（n=25），B組為COPD穩(wěn)定期患者組（n=25），C組為非COPD對照組（n=25）。收集患者及對照組臨床資料和血清標本，采用ELISA法測定血清CC16、SP-D水平。檢測受試者第一秒鐘用力呼氣量占預計值的百分比（FEV1%）、FEV1和用力肺活量的比值（FEV1/FVC）、肺一氧化碳彌散量占預計值百分比（DLCO%）。結果 COPD的急性加重期患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）水平最低，其次是COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）水平最高（P＜0.05）。COPD的急性加重期的患者血清中SP-D水平最高，其次是COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其血清中SP-D水平最低（P＜0.05）。三組慢性阻塞性肺疾病的患者肺功能的變化與血清中CC16和SP-D水平密切相關，Clara細胞分泌蛋白CC16和與患者肺功能的關系：兩者間均呈現(xiàn)出高度的一致性，呈正相關關系；SP-D水平與患者肺功能的關系：兩者間均呈現(xiàn)出高度的反向性，呈負相關關系（P＜0.05）。結論 COPD患者血清CC16降低而SP-D水平升高，Clara細胞分泌蛋白CC16和與患者肺功能呈正相關關系；SP-D水平與患者肺功能呈負相關關系。

慢性阻塞性肺疾??； Clara細胞分泌蛋白； 肺表面活性物質相關蛋白D； 肺功能； 預后轉歸

人Clara細胞的分泌蛋白（Clara cell secretion protein，CCSP）是該細胞的分泌物的主要組成部分，其包含兩條肽鏈［1-3］。該蛋白屬于特異性的標志蛋白，可以作為上皮屏障完整或者損傷的標志［2，4］。該蛋白具有抗炎和免疫調節(jié)等多種活性［5］。該蛋白的異常與慢性阻塞性肺疾病等疾病有關［6］。在本文中，筆者研究慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary diseases，COPD）的患者血清中Clara細胞分泌蛋白CC16和肺表面活性物質相關蛋白D（pulmonary surfactant associated protein D，SP-D）水平與患者肺功能和患者預后轉歸的關系，可為慢性阻塞性肺疾病的防治研究奠定理論基礎。

材料和方法

1 一般資料

選取在2013年12月至2014年12月之間，隨機選擇我院呼吸內科住院及門診受試患者。

試驗A組和試驗B組患者入組標準：①慢性阻塞性肺疾病的患者；②性別不拘；③年齡25歲至65歲。

試驗A組和試驗B組患者排除標準：①各型肝炎病毒感染者；②自身免疫性疾病患者；③其他惡性腫瘤患者；④各種高血壓患者；⑤糖尿病患者；⑥各種精神疾患的患者；⑦艾滋病毒感染者。

失聯(lián)原因及其應對措施：預計原因：患者中途退出試驗，患者在試驗過程中轉院治療；應對措施：按照1∶1比例相應補充受試患者進試驗組。

倫理學考量：①患者及其直系家屬在充分了解研究過程的基礎之上簽署參與該臨床研究的知情同意書。②入選患者相關診治和監(jiān)護措施均以臨床指南相關原則為依據(jù)，對患者的醫(yī)療治療和安全有充分保障。③對入選患者的信息及診療記錄予以保密，保護患者的隱私權。④在中國臨床試驗注冊中心注冊試驗方案，試驗中遵循《渥太華工作組關于臨床試驗注冊的聲明》（Ottawa Group Statement for Clinical Trial Registration）。

2 受試者的分組

將受試者按診斷分為試驗A組和試驗B組，試驗A組為COPD的急性加重期患者，即AECOPD患者（n=25），試驗B組為COPD穩(wěn)定期患者（n= 25）；另納入健康體檢者作為對照組（n=25）。

3 儀器與試劑

BIOBASE-EL10A型全自動酶聯(lián)免疫檢測儀（山東博科公司）；C-8800D肺功能儀（日本捷斯特公司）。

4 觀察指標和手段

①收集患者及對照組臨床資料、血清標本，采用ELISA法測定血清CC16、SP-D水平；②受試者第一秒鐘用力呼氣量占預計值的百分比（FEV1%）；③受試者FEV1和用力肺活量的比值（FEV1/FVC）；④受試者肺一氧化碳彌散量所占預計值的百分比（DLCO %）；⑤患者血清中Clara細胞分泌蛋白CC16和SP-D水平與患者肺功能的相關性分析。

5 統(tǒng)計學處理

計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料采用方差分析，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（±s）表示，用統(tǒng)計軟件包SPSS19.0進行統(tǒng)計分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 受試者一般情況

A、B、C三組受試者的一般情況進行比較，結果顯示無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。此外，研究過程中所有受試者均完成了全部試驗，無中途退出者，亦無因血壓控制不佳而改用其他療法者（表1）。

表1 受試者一般情況

2 三組慢性阻塞性肺疾病患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）和SP-D的水平

比較三組慢性阻塞性肺疾病的患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）發(fā)現(xiàn)，COPD的急性加重期的患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）水平最低，其次是COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）水平最高（P＜0.05）。比較三組慢性阻塞性肺疾病的患者血清中SP-D水平發(fā)現(xiàn)，COPD的急性加重期的患者血清中SP-D水平最高，其次是COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其血清中SP-D水平最低（P＜0.05），見表2。

表2 三組慢性阻塞性肺疾病患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）和SP-D水平的比較（ng/mL，±s）

表2 三組慢性阻塞性肺疾病患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）和SP-D水平的比較（ng/mL，±s）

蛋白試驗A組（n=25）項目CC16蛋白SP-D 65.43±46.42154.25±43.41試驗B組（n=25）93.25±8.83125.53±40.46對照組（n=25）107.89±12.4597.18±30.15 P值P＜0.05P＜0.05

3 三組慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能

比較三組慢性阻塞性肺疾病的患者肺功能發(fā)現(xiàn)，COPD的急性加重期的患者肺功能最差，其次是COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其肺功能最好（P＜0.05），見表3。

表3 三組慢性阻塞性肺疾病的患者肺功能的比較

4 三組慢性阻塞性肺疾病的患者血清中Clara細胞分泌蛋白CC16和SP-D水平與患者肺功能的相關性分析

各組患者血清中Clara細胞分泌蛋白CC16和與患者肺功能的關系：兩者間均呈現(xiàn)出高度的一致性，呈正相關關系（P＜0.05）；SP-D水平與患者肺功能的關系：兩者間均呈現(xiàn)出高度的反向性，呈負相關關系（P＜0.05），見表4。

表4 各組患者MMSE評分與各向異性比值的關系

討 論

COPD的特點是吸氣和呼氣的氣流受限，而且這種氣流受限是一種不可逆的病變進程。該病變和有害顆粒誘發(fā)的氣道和肺臟的炎癥反應關系密切［7］。該疾病近年來已經成為造成人類死亡的第四位原因。

Clara細胞屬于非纖毛類的上皮細胞，其多襯覆在遠端的細支氣管上。該類細胞的分泌非?；钴S，同時Clara細胞還具有較強的增殖分化以及生物轉化的特性［8-9］。CCSP是該細胞的分泌物，大概占支氣管肺泡的灌洗液之中可溶性蛋白的3%［10-11］。CCSP蛋白的二條肽鏈多呈現(xiàn)反向排列，這兩條肽鏈分別通過3位半胱氨酸和69位半胱氨酸的二硫鍵連接。CCSP在人體血清中的正常水平為10μg/L至15μg/L。在慢性肺損傷時氣道Clara細胞數(shù)目減少，血清CCSP水平降低［11-12］。目前，CC-SP在血清中的水平是檢測Clara細胞的損傷程度和評估上皮屏障的主要標志物［13-14］。

肺表面活性物質相關蛋白D（surfactant protein D，SP-D）是包括肺泡的Ⅱ型上皮細胞以及遠端細支氣管的Clara細胞等呼吸道的上皮細胞的主要分泌物。SP-D蛋白是膠原凝集家族蛋白的一員，其具有天然免疫功能。此外，SP-D蛋白還能抑制炎癥的發(fā)生和發(fā)展。尤其值得指出的是，SP-D蛋白能夠協(xié)助機體的免疫系統(tǒng)清除病原體。故而，SP-D蛋白在COPD的發(fā)展中具有重要作用［15-17］。

本研究比較三組慢性阻塞性肺疾病的患者血清中CC16和SP-D水平發(fā)現(xiàn)，COPD的急性加重期的患者血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）水平最低，其次是 COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其血清中Clara細胞分泌蛋白（CC16）水平最高。COPD的急性加重期的患者血清中SP-D水平最高，其次是COPD穩(wěn)定期患者組，再次是對照組的受試者，其血清中SP-D水平最低。此外，三組慢性阻塞性肺疾病的患者肺功能的變化與血清中CC16和SPD水平密切相關，Clara細胞分泌蛋白CC16和與患者肺功能呈正相關關系；SP-D濃度與患者肺功能呈負相關關系。

CCSP能夠抑制分泌性磷脂酶A2的活性，同時減少花生四烯酸衍生的炎癥介質，抑制單核細胞IFNγ的濃度。而且，CCSP蛋白還能夠降低巨噬細胞、中性粒細胞、成纖維細胞的趨化活性，抑制血小板的聚集。CCSP在肺內感染性和變態(tài)反應性炎癥的調控中起有重要作用。COPD患者小氣道CCSP的表達降低，提示CCSP與COPD的發(fā)生有關。

本試驗的結果表明，穩(wěn)定期和急性加重期的COPD患者的其SP-D蛋白的水平都會明顯增高。人體血清中SP-D蛋白的水平增高與其肺部急慢性炎癥關系密切。急慢性氣道炎癥是COPD的致病原因，故而推測SP-D蛋白可以通過肺泡與支氣管上皮間隙進入血流，而炎癥程度的變化導致肺泡與上皮細胞的間隙變大，導致肺部炎癥部位更多的SP-D蛋白滲漏入血液，故而能夠解釋COPD患者血清中SPD蛋白水平上調的根本原因。

綜上所述，對慢性阻塞性肺疾病的患者血清中CC16和SP-D檢測發(fā)現(xiàn)，COPD患者血清 CC16水平降低而SP-D水平升高，Clara細胞分泌蛋白CC16和與患者肺功能呈正相關關系；SP-D水平與患者肺功能呈負相關關系。

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（潘子昂編輯）

胰腺癌術后生存期可預測

復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院胰腺外科王文權博士在導師虞先濬教授指導下，歷經6年臨床研究發(fā)現(xiàn)，胰腺癌微環(huán)境可用于預測患者預后，即通過檢測胰腺癌患者術后腫瘤標本中4個分子免疫標記的不同表達，準確判斷患者術后生存預期；而術前通過超聲胃鏡穿刺法，也可獲知胰腺癌患者微環(huán)境中4個分子免疫標記的不同表達信息，由此鑒別出不能從手術中獲益的患者。該成果相關論文近日在國際外科學頂級期刊《英國外科學雜志》上發(fā)表。

腫瘤微環(huán)境是指在腫瘤生長過程中，由腫瘤細胞和非腫瘤細胞共同構成的，與腫瘤發(fā)生和轉移相關的局部穩(wěn)態(tài)環(huán)境。王文權從79名術后胰腺癌患者的腫瘤標本中，檢測到有6個分子免疫標記陽性細胞（即CD4+、CD8+、CD117+和CD15+、CD20+、CD206+），它們受SMAD4突變基因的控制，從而導致胰腺癌惡性程度的增高。王文權等還發(fā)現(xiàn)，6個分子免疫標記陽性細胞中，前3個是"優(yōu)良分子"，后3個是"破壞分子"。

進一步研究發(fā)現(xiàn)，如果患者體內2個破壞分子表達高，優(yōu)良分子表達低，加之SMAD4基因已突變，其預后就很差，即便是早期患者預后也不好；如果2個破壞分子表達低，優(yōu)良分子表達高，加之SMAD4基因未突變，患者預后就很好，術后中位生存期可達26個月以上，有的患者已生存72個月以上。對151名胰腺癌術后患者的臨床試驗證實，與上述研究成果結論一致。

王文權團隊隨機挑選54名胰腺癌患者，將術前以超聲胃鏡穿刺法獲得的患者體內微環(huán)境中的4個分子免疫標記的不同表達信息，與術后腫瘤標本檢測結果進行比對分析，證實微環(huán)境檢測確可預測術后患者預后，即鑒別出潛在的、不能從手術中獲益的患者。

——摘自《健康報》第10158期（2016年7月25日）

Relationship Between Serum Levels of CC16 and SP-D and Pulmonary Function in Patients w ith Chronic Obstructive Pulmonary Disease

WANG Xin-jie，WANG Xia，SHANG Lei，DAIXiao-li
（Respiratory Medicine People′s Hospital of Lincheng County，Xingtai054300，China）

Objective To study the relationship between serum levels of Clara cell secretory protein（CC16）and Surfactant protein D（SP-D）and pulmonary function in patients w ith chronic obstructive pulmonary disease（COPD）.Methods Patients from our hospitalwere random ly divided into two groups，group A，25 patientswas acute exacerbation of COPD（AECOPD）.Group B，25 patients was stable COPD.Group C was non COPD control group，25 subjects.Serum CC16 and SP-D weremeasured by ELISA method.Forced expiratory volume（FEV1%），F(xiàn)EV1/FVC ratio and the percentage of carbon monoxide diffusing capacity（DLCO%）were determined by the test of forced expiratory volume in the first second.Results CC16 concentration was significantly lower in the patients w ith acute exacerbation of COPD when compared w ith stable COPD and control group（P＜0.05）.The serum level of SP-D was significantly higher in AECOPD when compared w ith stable COPD and control group（P＜0.05）.Serum levels of CC16 and SP-D were closely correlated w ith patient’s pulmonary function.CC16 was positively correlated w ith patient’s pulmonary function.SP-D was negatively correlated w ith lung function of patients（P＜0.05）.Conclusion The serum CC16 in COPD patients was decreased and the SP-D concentration was increased.CC16 was positively correlated w ith the pulmonary function of the patients，the SP-D concentration was negatively correlated with the patient’s lung function.

Chronic obstructive pulmonary disease； Clara cell secretory protein； Pulmonary surfactant associated protein D； Pulmonary function； Prognosis

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.08.006

2015-11-24；

2016-02-18