賈叢偉,孫 洋,張婷婷,盧朝輝,陳 杰
中國醫(yī)學科學院 北京協(xié)和醫(yī)學院 北京協(xié)和醫(yī)院病理科,北京 100730
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·論著·
miR- 125a- 5p對胰腺癌細胞增殖、凋亡和細胞周期的影響
賈叢偉,孫洋,張婷婷,盧朝輝,陳杰
中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院北京協(xié)和醫(yī)院病理科,北京 100730
目的探討miR- 125a- 5p對胰腺癌細胞增殖、凋亡和細胞周期的影響。方法熒光定量PCR檢測胰腺癌組織中miR- 125a- 5p的表達水平,細胞計數(shù)試劑盒- 8檢測下調(diào)miR- 125a- 5p水平對胰腺癌細胞生長的影響,流式細胞術(shù)檢測下調(diào)miR- 125a- 5p表達水平對胰腺癌細胞周期和凋亡的影響,軟瓊脂集落形成實驗評價miR- 125a- 5p在胰腺癌細胞惡性轉(zhuǎn)化過程中的作用。結(jié)果miR- 125a- 5p在胰腺癌組織的表達高于癌旁正常組織(P<0.05)。下調(diào)miR- 125a- 5p表達水平后,胰腺癌細胞系Panc- 1和MIA PaCa- 2的生長受到抑制(P<0.05),早期凋亡率分別增加13.6%和11.0%(P<0.05),細胞集落數(shù)目分別下降27.3%和27.8% (P<0.05),Panc- 1細胞S期細胞百分比降低11.8% (P<0.05)。結(jié)論miR- 125a- 5p在胰腺癌組織中高表達,下調(diào)miR- 125a- 5p表達水平使胰腺癌細胞生長受到抑制,集落形成能力下降,細胞周期受到阻滯,凋亡比例增加,提示miR- 125a- 5p在胰腺癌中發(fā)揮癌基因的作用。
胰腺癌;miR- 125a- 5p;癌基因
ActaAcadMedSin,2016,38(4):415-421
胰腺癌是一種惡性程度高、預后極差的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。2015年統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,在美國,胰腺癌分別位居男性、女性腫瘤發(fā)病率的第11位和第8位,而其死亡率卻均高居第4位[1]。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類長18~25個核苷酸的非編碼單鏈小RNA分子。成熟的miRNA通過與靶基因mRNA分子的3’端非編碼區(qū)域完全或不完全互補配對,降解靶基因mRNA或抑制其轉(zhuǎn)錄后翻譯導致靶基因的轉(zhuǎn)錄后沉默[2],參與多種生命活動,與腫瘤的發(fā)生有著密切的關(guān)系[3- 4]。miR- 125a- 5p是近年受到廣泛關(guān)注的一個miRNA,其在肺癌、胃癌、食管癌等疾病中的作用機制已經(jīng)日漸明朗[5- 6]。到目前為止,還極少有miR- 125a- 5p在胰腺癌中研究的相關(guān)報道。本研究探討miR- 125a- 5p對胰腺癌細胞增殖、凋亡和細胞周期的影響。
材料10對胰腺癌及癌旁新鮮組織取自2010年7月至2013年5月北京協(xié)和醫(yī)院手術(shù)切除標本,液氮中冰凍保存。4株胰腺癌細胞系Panc- 1、MIA PaCa- 2、BxPC- 3和AsPC- 1均購自美國模式培養(yǎng)物集存庫。miR- 125a- 5p抑制劑是類似小干擾RNA的片段,由上海吉瑪公司設計合成,其序列為5’-UCACAAGUUAG GGUCUCAGGGA- 3’。
細胞培養(yǎng)Panc- 1、MIA PaCa- 2和AsPC- 1培養(yǎng)于含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基(Gibico,美國)中,BxPC- 3培養(yǎng)于含有10%的胎牛血清的1640培養(yǎng)基(Gibico,美國)中,37℃、5%CO2條件下培養(yǎng),實驗細胞均處于對數(shù)生長期。
轉(zhuǎn)染將細胞分為3組,轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑(100 nmol/L)的抑制劑組、轉(zhuǎn)染無關(guān)序列(negative control,NC)(100 nmol/L)的陰性對照組和只加轉(zhuǎn)染試劑的空白對照組,按lipo2000(Invitrogen,美國)說明書進行轉(zhuǎn)染,4~6 h更換為完全培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染24 h后提取RNA。
熒光定量PCR檢測miR- 125a- 5p表達水平使用Trizol試劑(Invitrogen,美國)提取組織和細胞的總RNA,超純水(無RNA酶、DNA酶)溶解,檢測濃度和純度。使用Taqman microRNA RT Kit(ABI,美國),以管家基因U6作為內(nèi)參,用miR- 125a- 5p引物逆轉(zhuǎn)錄成cDNA(逆轉(zhuǎn)錄引物序列:5’-CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGCACAGGTT- 3’)。使用SYBR?Green PCR Master Mix(ABI,美國)作為核酸染料,配制好反應體系:cDNA 1 μl,上游引物(5 μmol/L)2 μl,下游引物(5 μmol/L)2 μl,SYBR Green PCR Master mix 10 μl,加ddH2O至20 μl。在ABI Stepone Plus實時熒光定量PCR儀上進行擴增(上游引物:5’-ACACTCCAGCTGGGTCCCTGAGACCCTTTAA- 3’;下游引物:5’-CTCAACTGGTGTCGTGGAGT- 3’),反應條件為:95℃ 10 min,95℃ 15 s、60℃ 1 min(40個循環(huán));記錄循環(huán)閾值(cycle threshold,Ct),采用2-△△Ct方法,比較樣品間的表達差異。
細胞計數(shù)試劑盒- 8檢測細胞活性Panc- 1、MIA PaCa- 2細胞系分組同前,轉(zhuǎn)染后以約3000個/孔的密度接種于96孔板,分別于轉(zhuǎn)染24、48、72 h后更換為含10%細胞計數(shù)試劑盒- 8的培養(yǎng)基,然后再置于37℃、5% CO2條件下培養(yǎng)1.5 h,酶標儀檢測波長450 nm的光密度值。
碘化丙啶單染檢測細胞周期Panc- 1和MIA PaCa- 2細胞系分組同前,轉(zhuǎn)染后以2×105個/孔的密度接種于6孔板,轉(zhuǎn)染72 h后用4℃磷酸鹽緩沖液清洗,胰酶消化,收集細胞至離心管中,加入70%冰乙醇固定,4℃過夜,4℃ 800×g離心后棄上清,4℃磷酸鹽緩沖液清洗,于400 μl結(jié)合緩沖液中重懸,加入50 μl RNA酶(Sigma,美國)37℃孵育30 min,避光加入50 μl碘化丙啶(propidium iodide,PI)(50 μg/ml)(Sigma,美國),室溫避光孵育30 min,流式細胞儀檢測細胞(FACSAriaⅡ,BD,美國)周期。
膜聯(lián)蛋白Ⅴ-異硫氰酸熒光素/PI雙染法檢測細胞凋亡率按PI單染操作步驟收集細胞至離心管,離心后棄上清,4℃磷酸鹽緩沖液清洗,按膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,F(xiàn)ITC)凋亡檢測試劑盒Ⅰ(BD,美國)說明進行操作,將細胞重懸于500 μl結(jié)合緩沖液中,避光各加入5 μl異硫氰酸熒光素和PI,混勻,室溫避光孵育15 min,流式細胞儀(C6,BD,美國)檢測細胞凋亡率。
軟瓊脂集落形成實驗Panc- 1、MIA PaCa- 2細胞系設陰性對照組和抑制劑組,首先將下層軟瓊脂培養(yǎng)液(10%胎牛血清+0.5%軟瓊脂溶液+1×DMEM培養(yǎng)基)鋪于6孔板,放入4℃冰箱,凝固后,轉(zhuǎn)入37℃培養(yǎng)箱。轉(zhuǎn)染24 h后,以1×104/L的細胞密度加入上層軟瓊脂培養(yǎng)液中(10%胎牛血清+0.35%軟瓊脂溶液+1×DMEM培養(yǎng)基),混合均勻后加入鋪有下層軟瓊脂的6孔板中。37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14 d,每孔加入200 μl噻唑藍溶液(5 mg/ml),繼續(xù)培養(yǎng)過夜,顯微鏡下觀察集落形成情況,計數(shù)。
統(tǒng)計學處理采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,t檢驗及方差分析結(jié)果,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
miR- 125a- 5p在胰腺癌組織及細胞系中的表達10例胰腺癌標本的基本資料見表1。熒光定量PCR結(jié)果顯示miR- 125a- 5p在胰腺癌組織中的相對表達量明顯高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計學意義(t=6.42,P=0.000)(圖1)。同時,miR- 125a- 5p在4種胰腺癌細胞系(AsPC- 1、BxPC- 3、MIA PaCa- 2、Panc- 1)中的相對表達水平均高于正常胰腺組織(設正常胰腺組織為1,4個細胞系分別為AsPC- 1=1.37、BxPC- 3=1.61、MIA PaCa- 2=1.46、Panc- 1=1.41)(t=8.81,P=0.003)。
表 1 10例胰腺癌標本的基本資料Table 1 General information of 10 patients with pancreatic ductal adenocarcinoma
圖 1miR- 125a- 5p在胰腺癌組織(T)和癌旁組織(N)中的相對表達量
Fig 1The relative expression of miR- 125a- 5p in pancreatic ductal adenocarcinoma tissues(T) and adjacent normal tissues(N)
轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對胰腺癌細胞系的生長、增殖的影響細胞計數(shù)試劑盒- 8結(jié)果顯示,Panc- 1細胞中抑制劑組的24、48、72 h數(shù)值分別為0.370、0.502、1.083;MIA PaCa- 2細胞中抑制劑組的24、48、72 h數(shù)值分別為0.542、0.681、1.198。相對空白對照組和陰性對照組,轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑后,Panc- 1和MIA PaCa- 2細胞在轉(zhuǎn)染24 h后生長開始受到抑制,并隨著培養(yǎng)時間延長,抑制作用進一步增大,培養(yǎng)72 h時抑制作用最大,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(圖2)。
轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對胰腺癌細胞系凋亡的影響膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/PI雙染流式細胞學結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑 72 h后,Panc- 1
與陰性對照和空白對照比較,aF=13.56,aP=0.02;bF=89.89,bP=0.00;cF=9.87,cP=0.04
aF=13.56,aP=0.02;bF=89.89,bP=0.00;cF=9.87,cP=0.04 compared with normal control and mock groups
圖 2轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑后各組Panc- 1(A)和MIA PaCa- 2(B)細胞的相對增殖數(shù)量
Fig 2Relative proliferation of Panc- 1(A) and MIA PaCa- 2(B) cell after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
細胞中,陰性對照組和抑制劑組異硫氰酸熒光素單陽性細胞比例(即早期凋亡)分別是3.6%和17.2%;異硫氰酸熒光素、碘化丙啶雙陽性細胞比例(即晚期凋亡)分別是5.0%和9.6%。與陰性對照組相比,Panc- 1細胞的早期凋亡率和晚期凋亡率分別升高了13.6 %和4.6 %(早期凋亡:χ2=8.99,P=0.00;晚期凋亡:χ2=1.80,P=0.18)(圖3)。MIA PaCa- 2細胞中,陰性對照組和抑制劑組的早期凋亡率分別是5.4%和16.4%;晚期凋亡率分別是7.4%和12.4%。與陰性對照組相比,MIA PaCa- 2細胞的早期凋亡率和晚期凋亡率分別升高了11.0 %和5.0%(早期凋亡:χ2=6.44,P=0.01;晚期凋亡:χ2=1.45,P=0.23)(圖4)。
轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對胰腺癌細胞周期的影響轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑后,Panc- 1細胞中抑制劑組、空白對照組和陰性對照組的S期細胞比例分別為28.2%、37.0%和40.0%,與空白對照組和陰性對照組相比,抑制劑組S期細胞的比例均明顯下降(P<0.05)(圖5),但MIA PaCa- 2細胞系在轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑后,抑制劑組、空白對照組和陰性對照組的S期細胞比例分別為26.1%、28.2%和26.0%,差異無統(tǒng)計學意義(圖6)。
FL1-A:通道1-A,代表碘化丙啶染色;FL2-A:通道2-A,代表膜聯(lián)蛋白V染色;Q1-UL:點數(shù)1-左上,為碎片及損傷細胞;Q1-UR:點數(shù)1-右上,為晚期凋亡及死亡細胞;Q1-LL:點數(shù)1-左下,為陰性對照的正常細胞;Q1-LR:點數(shù)1-右下,為早期凋亡細胞
FL1-A: flow 1-A,represents propidium iodide staining;FL2-A:flow 2-A,represents annexin V staining;Q1-UL:quantumdots 1-up left,are pieces and damaged cells;Q1-UR:quantumdots 1-up right,are late apoptosis and death cells;Q1-LL:quantumdots 1-low left,are negative control cells;Q1-LR:quantumdots 1-low right,are early apoptosis cells
A. 陰性對照組;B. miR- 125a- 5p抑制劑組
A. negative control group;B. miR- 125a- 5p inhibitor group
圖 3轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對Panc- 1細胞早期凋亡的影響
Fig 3Effect on the early apopotosis rate of Panc- 1 cell after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
A.陰性對照組;B. miR- 125a- 5p抑制劑組
A. negative control group;B. miR- 125a- 5p inhibitor group
圖 4轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對MIA PaCa- 2細胞早期凋亡的影響
Fig 4Effect on the early apopotosis rate of MIA PaCa- 2 cell after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
A.miR- 125a- 5p抑制劑;B. 空白對照;C. 陰性對照
A.miR- 125a- 5p inhibitor;B. mock;C.negative control
圖 5轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對Panc- 1細胞周期的影響
Fig 5Effect on the cell cycle of Panc- 1 after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
A. miR- 125a- 5p抑制劑;B. 空白對照;C. 陰性對照
A.miR- 125a- 5p inhibitor;B. mock;C.negative control
圖 6轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對MIA PaCa- 2細胞周期的影響
Fig 6Effect on the cell cycle of MIA PaCa- 2 after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對胰腺癌細胞集落形成能力的影響轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑后胰腺癌細胞的集落形成顯著低于陰性對照組(圖7、8)。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,Panc- 1細胞中,抑制劑組和陰性對照組的集落數(shù)分別為(566±44)個和(778±25)個,轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑對集落數(shù)目的抑制率為27.3%;MIA PaCa- 2細胞中,抑制劑組和陰性對照組的集落數(shù)分別為(323±35)個和(447±50)個,轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對集落數(shù)目的抑制率為27.8%,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
A. miR- 125a- 5p抑制劑組;B. 陰性對照組
A. miR- 125a- 5p inhibitor group;B. negative control group
圖 7轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對Panc- 1細胞集落形成能力的影響
Fig 7Effect on the colony formation ability of Panc- 1 cell after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
A. miR- 125a- 5p抑制劑組;B. 陰性對照組
A. miR- 125a- 5p inhibitor group;B. negative control group
圖 8轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑對MIA PaCa- 2細胞集落形成能力的影響
Fig 8Effect on the colony formation ability of MIA PaCa- 2 cell after transfection with the miR- 125a- 5p inhibitor
胰腺癌是預后最差的惡性腫瘤之一,其相關(guān)分子機制研究具有重要臨床意義。本研究小組長期從事胰腺癌分子機制的研究,已篩選出一些作為癌基因或抑癌基因參與胰腺癌發(fā)生、發(fā)展的miRNAs,并發(fā)現(xiàn)一些miRNAs的異常表達與診斷及預后相關(guān)。2007年,Bloomston等[7]用組織芯片篩查出miR- 125a在胰腺癌及胰腺炎組織中的表達高于正常胰腺組織,但未進一步研究其在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機制。隨后的研究報道,miR- 125a- 5p在胃癌[8]、乳腺癌[9]、肝癌[10]、肺癌[5]、結(jié)腸癌[11]等腫瘤中可抑制腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移,發(fā)揮抑癌基因的作用,在不同腫瘤中表達程度亦不相同,提示miR- 125a- 5p在不同腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮不同的作用。為探討miR- 125a- 5p在胰腺癌中的表達及作用,本研究從表達和功能方面進行研究。
首先,本研究收集10對胰腺癌及癌旁正常組織,提取總RNA,運用熒光定量PCR的方法檢測miR- 125a- 5p的表達水平,結(jié)果顯示miR- 125a- 5p在胰腺癌組織中的表達高于癌旁組織,這與Bloomston等[7]的芯片篩選結(jié)果一致。隨后檢測了4個胰腺癌細胞系(Panc- 1、MIA PaCa- 2、AsPC- 1和BxPC- 3)中miR- 125a- 5p的表達水平,發(fā)現(xiàn)4個胰腺癌細胞系miR- 125a- 5p的表達均高于癌旁正常組織。
為了解miR- 125a- 5p在胰腺癌中表達增高在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用,并更好地研究miR- 125a- 5p的功能,本研究首先使用細胞計數(shù)試劑盒- 8實驗初步探討miR- 125a- 5p與胰腺癌細胞增殖的關(guān)系,通過轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p抑制劑下調(diào)miR- 125a- 5p的表達水平后,抑制劑組與空白對照組及陰性對照組相比,增殖率明顯降低,表明下調(diào)miR- 125a- 5p的表達水平可抑制Panc- 1、MIA PaCa- 2兩個細胞系的生長及增殖能力。
細胞計數(shù)試劑盒- 8反映的是活細胞數(shù)量變化情況,多種因素均可導致活細胞數(shù)量變化,包括影響細胞周期、促進凋亡等。研究證實miR- 125a- 5p下游有與凋亡及細胞周期相關(guān)的一些靶基因,包括Rock- 1基因、E2F3基因等,并發(fā)現(xiàn)表皮生長因子可以通過調(diào)節(jié)miR- 125a- 5p影響下游通路促進腫瘤生長[12]。為進一步探討miR- 125a- 5p抑制劑抑制胰腺癌細胞生長、增殖的機制,本研究采用流式細胞術(shù),使用膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶雙染法檢測細胞凋亡,碘化丙啶單染法檢測細胞周期。結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑 72 h后,與陰性對照組相比,抑制劑組Panc- 1和MIA PaCa- 2早期凋亡和晚期凋亡的細胞比例均升高;與空白對照組和陰性對照組相比,Panc- 1的S期細胞比例明顯降低,而在MIA PaCa- 2細胞系中,細胞周期各期的比例卻未發(fā)生變化。兩個細胞系產(chǎn)生不一樣的結(jié)果可能與細胞背景不同有關(guān)。以上結(jié)果提示下調(diào)miR- 125a- 5p表達水平抑制細胞生長、增殖的功能,部分通過促進細胞凋亡實現(xiàn),部分通過影響細胞周期,引起G0/G1期阻滯實現(xiàn)。
每個miRNA都有多個靶基因,miRNA最終體現(xiàn)出的功能是多個靶基因間形成復雜網(wǎng)絡綜合作用的結(jié)果,因此miRNA對腫瘤的影響也是多方面的。為研究miR- 125a- 5p除影響增殖外,是否影響腫瘤細胞的集落形成能力,本研究進一步通過軟瓊脂集落形成實驗檢測miR- 125a- 5p在胰腺癌細胞惡性轉(zhuǎn)化中的作用。結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR- 125a- 5p 抑制劑的兩種胰腺癌細胞Panc- 1和MIA PaCa- 2形成的集落數(shù)目顯著低于陰性對照組,差異均具有統(tǒng)計學意義。下調(diào)miR- 125a- 5p的表達水平可以抑制胰腺癌細胞的集落形成能力,表明miR- 125a- 5p可以通過增加胰腺癌細胞集落形成能力促進胰腺癌的惡性轉(zhuǎn)化。
綜上,本研究揭示了miR- 125a- 5p在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的部分作用機制,提示在胰腺癌中異常高表達的miR- 125a- 5p可能通過影響細胞周期、抑制細胞凋亡,促進胰腺癌細胞生長、增殖;并通過增加胰腺癌細胞集落形成能力,促進胰腺癌惡性轉(zhuǎn)化。這些結(jié)果顯示miR- 125a- 5p在胰腺癌發(fā)生發(fā)展過程中通過多種途徑發(fā)揮癌基因的作用,miR- 125a- 5p有可能成為胰腺癌的治療靶點。
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Effects of miR- 125a- 5p on Cell Proliferation,Apoptosis and Cell Cycle of Pancreatic Cancer Cells
JIA Cong-wei,SUN Yang,ZHANG Ting-ting,LU Zhao-hui,CHEN Jie
Department of Pathology,PUMC Hospital,CAMS and PUMC,Beijing 100730,China
CHEN JieTel: 010- 69155389,E-mail: xhblk@163.com
ObjectiveTo investigate the effects of miR- 125a- 5p on cell proliferation,apoptosis and cell cycle of pancreatic cancer cells.MethodsThe expression level of miR- 125a- 5p in pancreatic cancer was determined using quantitative real-time polymerase chain reaction analysis in 4 pairs of pancreatic cancer tissues and matched adjacent normal tissues samples. The expression of miR- 125a- 5p was downregulated in pancreatic cancer cell lines by transfection with miR- 125a- 5p inhibitor. Cell counting kit- 8 assays was conducted to detect the growth ability of pancreatic cancer cell lines. Flow cytometry was applied to detect the cell cycle and apopotosis. Soft agar colony formation test was employed to assess the role of miR- 125a- 5p in process of malignant transformation.ResultsMiR- 125a- 5p was significantly highly expressed in pancreatic ductal adenocarcinoma tissues than adjacent normal tissues(P<0.05). After the expression level of miR- 125a- 5p in Panc- 1 and MIA PaCa- 2 was downregulated,the growth ability was suppressed(P<0.05),early apopotosis rate was promoted by 13.6% and 11.0% respectively(P<0.05),the amount of colony formation was reduced by 27.3% and 27.8%,respectively(P<0.05),and the percentage of S stage of Panc- 1 was reduced by 11.8% (P<0.05).ConclusionsThe expression of miR- 125a- 5p is high in pancreatic ductal adenocarcinoma tissues. After the expression level of miR- 125a- 5p is downregulated,the growth ability,colony formation,and cell cycle of Panc- 1 and MIA PaCa- 2 are suppressed,and the early apopotosis rate will be promoted. Therefore,miR- 125a- 5p may play an oncogenic role in pancreatic ductal adenocarcinoma.
pancreatic ductal adenocarcinoma;miR- 125a- 5p;oncogene
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R735.9
A
1000- 503X(2016)04- 0415- 07
10.3881/j.issn.1000- 503X.2016.04.009
2015- 08- 15)