劉震凌　王佳楠

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HPLC法測(cè)定米格來寧片中安替比林與咖啡因的含量

劉震凌王佳楠

【摘要】目的 用HPLC法同時(shí)測(cè)定米格來寧片中安替比林與咖啡因的含量。方法 采用 Waters C(18)色譜柱；以乙腈-水（20：80）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為273 nm。結(jié)果 安替比林進(jìn)樣量在0.014 12～0.706 20 μg、咖啡因進(jìn)樣量在0.002 79～0.139 60 μg，均與峰面積呈良好的線性關(guān)系，安替比林、咖啡因的平均回收率與RSD分別為99.7%、0.6%，100.0%、0.5%（n=9）。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】米格來寧片；HPLC法；安替比林；咖啡因

作者單位：130033長(zhǎng)春，吉林省藥品檢驗(yàn)所化學(xué)室

米格來寧片又名安比咖片，主要由安替比林與咖啡因組成的復(fù)方制劑，為解熱鎮(zhèn)痛藥，主治偏頭痛。原標(biāo)準(zhǔn)采用三氯甲烷萃取咖啡因，以排除安替比林的干擾，方法操作繁瑣，結(jié)果誤差大，且易造成污染環(huán)境，因此建立HPLC法同時(shí)測(cè)定安替比林和咖啡因，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確［1］。

1　儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀。安替比林對(duì)照品批號(hào)：100506-200301，咖啡因?qū)φ掌放?hào)：171215-200809（含量為99.9%），均為含量測(cè)定用，購自中國食品藥品檢定研究院；乙腈為色譜純，甲醇為色譜純，水為純化水。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性

色譜柱：Waters C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（20：80）；流速： 0.8 ml/min；柱溫：35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：273 nm；進(jìn)樣量：20 μl。理論板數(shù)按安替比林峰計(jì)算不低于5 000，安替比林峰與咖啡因峰的分離度應(yīng)符合要求。出峰順序?yàn)榭Х纫颉蔡姹攘帧?/p>

2.2對(duì)照品溶液的制備

取安替比林對(duì)照品與咖啡因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加水溶解并稀釋制成每1 ml中含安替比林27 μg與咖啡因2.7 μg的溶液。

2.3供試品溶液的制備

取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于安替比林0.27 g），置100ml量瓶中，加水適量振搖使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 ml，置100 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例配制不含安替比林和咖啡因的陰性樣品［2-3］，按供試品溶液的制備方法配制陰性對(duì)照溶液，注入液相色譜儀，結(jié)果在陰性對(duì)照溶液色譜圖中未檢出與對(duì)照品溶液兩個(gè)主成分峰保留時(shí)間一致的色譜峰。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線

取安替比林與咖啡因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加水溶解分別制成每1 ml中含安替比林0.014 12 mg與咖啡因0.002 793 mg 的混合溶液，分別精密吸取1、10、20、35、50 μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，安替比林：Y=5 061.2X+3.641，R=1.000 0；咖啡因：Y=3 585.5X+0.192 4，R=1.000 0。結(jié)果表明安替比林進(jìn)樣量在0.014 12～0.706 20 μg、咖啡因進(jìn)樣量在0.002 79～0.139 60 μg，均與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn)

精密量取對(duì)照品溶液20 μl，注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜峰面積，安替比林與咖啡因的RSD均為0.1%。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別于0、6、12、18、24 h時(shí)，注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，安替比林與咖啡因的RSD分別為0.2%，0.6%。

2.8重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批次供試品（批號(hào)：140104），按2.3項(xiàng)下方法制備6份供試品溶液，測(cè)定含量，安替比林、咖啡因的平均含量與RSD分別為97.1%、0.4%，93.8%、0.9%。

2.9樣品的測(cè)定

按上述方法測(cè)定3批樣品中安替比林與咖啡因的含量，結(jié)果見表1。

表1　3批樣品含量測(cè)定結(jié)果

3　討論

經(jīng)紫外-可見分光光度計(jì)掃描，安替比林分別在242 nm與255 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，咖啡因在273 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，因咖啡因處方量小，故選擇273 nm為該方法的測(cè)定波長(zhǎng)［4-5］。

參考氨基比林咖啡因片［1］的色譜條件，以甲醇—水（35： 65）為流動(dòng)相，結(jié)果安替比林色譜峰的拖尾因子較大，經(jīng)試驗(yàn)將流動(dòng)相優(yōu)化為乙腈—水（20：80）后，安替比林色譜峰對(duì)稱性較好?？疾觳煌放粕V柱測(cè)定本品，兩個(gè)主成分均分離效果良好，且測(cè)定結(jié)果重現(xiàn)性較好，本品對(duì)不同品牌色譜柱均適用［6-8］。

參考文獻(xiàn)

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Determination of Antipyrine and Caffeine Contents of Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets by HPLC

LIU Zhenling WANG Jia’nan Jilin Province Institute for Drug Control，Chemical Room，Changchun 130033，China

【Abstract】

Objective We measured antipyrine and caffeine content in the Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets by HPLC.Methods We used Waters C18 column， and used acetonitrile-water（20:80）as the mobile phase，and the detection wavelength was 273 nm.Results The injection volume of antipyrine was 0.014 12 to 0.706 20 μg， and the injection volume of caffeine was 0.002 79 to 0.139 60 μg.They were associated with the peak area showed a good linear relationship.The antipyrine’s and caffeine’s average recovery and RSD respectively 99.7%，0.6%，100.0%，0.5%（n=9）.Conclusion The method is simple，accurate，specific，reproducible，and can be used for quality control of the preparation.

【Key words】Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets，HPLC，Antipyrine，Caffeine

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2016.04.083

【中圖分類號(hào)】R927

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1674-9316（2016）04-0118-02