李　兵　胡世頡　王　冰　羅　鵬　呂　超　李　亮　曹寶萍　費　舟

第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院神經(jīng)外科　西安　710032

?

CD133與CD166在腦膜瘤中的表達(dá)及意義

李兵胡世頡王冰羅鵬呂超李亮曹寶萍費舟△

第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院神經(jīng)外科西安710032

【摘要】目的研究腦膜瘤中CD133與CD166標(biāo)記物的表達(dá)情況及臨床意義。方法選擇我院診治的40例腦膜瘤患者，運用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測CD133和CD166標(biāo)記物的情況。結(jié)果CD133和CD166在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)，表現(xiàn)為簇狀或散在的聚集分布。CD133、CD166積分光密度(IOD)值在級別不同腦膜瘤患者中存在明顯差異(Z=-4.080，P=0.000；Z=-4.657，P=0.000)，2個指標(biāo)均隨著病理級別的升高而上升，表達(dá)存在明顯的相關(guān)性(r=0.706，P=0.000)。結(jié)論組織病理級別與CD133和CD166表達(dá)密切相關(guān)，CD166可能是腦膜瘤干細(xì)胞的一個標(biāo)記物。

【關(guān)鍵詞】CD133；CD166；腦膜瘤；表達(dá)；臨床意義

腦膜瘤是顱內(nèi)常見的一種腫瘤，約為顱內(nèi)腫瘤的1/5，臨床治療上主要為手術(shù)治療，約90%的患者為WHOⅠ級腦膜瘤，腦膜瘤患者中4.7%～7.2%處于WHO Ⅱ級腦膜瘤，1%～3%為WHO Ⅲ級腦膜瘤[1]。隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展，腫瘤干細(xì)胞理論在臨床中得到應(yīng)用，而CD133蛋白是常見的腫瘤標(biāo)記物，在臨床中的應(yīng)用也較廣泛。Rath等[2]研究顯示，培養(yǎng)腦膜瘤干細(xì)胞中分離出CD133，進(jìn)一步說明其臨床中的應(yīng)用優(yōu)越性[3]。本文選擇40例腦膜瘤患者，運用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測CD133和CD166標(biāo)記物，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇我院2012-04—2014-04診治的40例腦膜瘤患者，所有患者依據(jù)WHO(2007)腦腫瘤分級標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅰ級腦膜瘤 16例，Ⅱ級22例，Ⅲ級2例，均為間變性腦膜瘤。根據(jù)級別將其分為2組，低級別為Ⅰ級腦膜瘤，高級別為Ⅱ～Ⅲ級腦膜瘤。

1.2免疫組化方法及試劑CD133兔抗人多克隆抗體(北京中杉金橋公司)，CD166兔抗人多克隆抗體(北京博奧森公司)，免疫組化試劑盒(Biogenex公司)。將選取的標(biāo)本采取10.0%的福爾馬林處理，并進(jìn)行石蠟、包埋和固定，緊接著將其進(jìn)行切片處理，厚度5.0 μm。之后給予脫蠟水化進(jìn)行修復(fù)抗原，整個實施均嚴(yán)格按照說明書的方法進(jìn)行實施。陽性對照為結(jié)腸癌標(biāo)本的CD133、CD166，陰性對照為PBS液代替-抗體。

1.3結(jié)果判斷[4]陽性：CD133、CD166陽性表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜上，且染色顯示棕黃色；應(yīng)用棕黃色物質(zhì)的積分光密度(IOD)值表示腫瘤組織陽性，且選取10個高倍視野，并經(jīng)過Image-Pro Plus 6.0病理圖像分析軟件計算IOD值，并詳細(xì)記錄。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法此次研究數(shù)據(jù)均采取SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析與處理，計量數(shù)據(jù)采取均值表示，兩獨立樣本采取Wlicoxon秩和檢驗，組間多個樣本采取Kruskal-WallisH進(jìn)行檢驗，CD133、CD166IOD值相關(guān)性采取Spearman法進(jìn)行檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1CD133、CD166表達(dá)及特征CD133、CD166定位在細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)，高、低病理級別組腦膜瘤CD133 IOD值為2466.59、578.56，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-4.080，P=0.000)；高、低病理級別組腦膜瘤CD166 IOD值為12919.51、4678.79，2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-4.080，P=0.000)。見表1。

CD133 與CD166陽性細(xì)胞分布相似，且均在高級別腫瘤組織觀察，并出CD133/CD166陽性細(xì)胞聚集；低級別腫瘤組織顯示分散的陽性細(xì)胞或完全陰性，且血管周圍顯示出陽性細(xì)胞。腫瘤組織CD166弱表達(dá)，CD133強表達(dá)，分布廣泛。未成熟血管內(nèi)顯示內(nèi)皮祖細(xì)胞CD133陽性，CD166陰性。

表1　CD133/CD166表達(dá)與臨床的關(guān)系

2.2CD166、CD133表達(dá)的相關(guān)性分析CD133表達(dá)升高，CD166表達(dá)也逐漸增加，相關(guān)性分析顯示：CD166與CD133在腦膜瘤組織中IOD值呈正相關(guān)性(r=0.706，P=0.000)。

3討論

腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的因素受干細(xì)胞樣細(xì)胞的影響，尤其在腫瘤組織中含有的腫瘤干細(xì)胞較少，但直接關(guān)系到腫瘤的發(fā)展、放化療抵抗、起源及轉(zhuǎn)移等過程[5-6]。通過對腦腫瘤干細(xì)胞進(jìn)行分析，目前臨床上大部分學(xué)者認(rèn)可的是干細(xì)胞標(biāo)記物CD133，還沒有足夠的證據(jù)表明其他的分子標(biāo)記物具有相同的功能。Kijima等[7]研究顯示，膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中CD166和CD133均有較高的表達(dá)，且高于正常組織。Rath等研究顯示，在血清培養(yǎng)基培養(yǎng)出腦膜瘤干細(xì)胞球，而且分析腦膜瘤干細(xì)胞標(biāo)記物后發(fā)現(xiàn)，免疫熒光表明CD166在腫瘤干細(xì)胞球中均表達(dá)為陽性，因而認(rèn)為不僅CD133是一種具有潛在價值的腦膜瘤干細(xì)胞標(biāo)記物，CD166也是[8]。

CD166蛋白在臨床中屬于免疫球蛋白超家族的主要成員，臨床稱為白細(xì)胞黏附因子，在人體的多個細(xì)胞組織中廣泛分布，參與多個過程[9]。研究表明，這個標(biāo)記物與腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲相關(guān)，是反映腫瘤預(yù)后的一個方面。本研究詳細(xì)闡述了CD166在腦膜瘤組織中的表達(dá)狀況，結(jié)果顯示其陽性細(xì)胞與CD133陽性細(xì)胞分布相似，且具有緊密的聯(lián)系[10]。

本研究指出，CD133和CD166都在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，表現(xiàn)為簇狀或散在的聚集分布。CD133、CD166積分光密度(IOD)值在級別不同腦膜瘤患者中存在明顯的差異(Z=-4.080，P=0.000；Z=-4.657，P=0.000)，2個指標(biāo)都隨著病理級別的升高而上升，兩者表達(dá)存在明顯的相關(guān)性(r=0.706，P=0.000)。同一個組織相同位置均顯示兩種抗體的表達(dá)，且均為陽性聚集細(xì)胞，表明CD133和CD166具有在這類細(xì)胞上共同表達(dá)的特點。雖然結(jié)構(gòu)略有變化，但在連續(xù)進(jìn)行切片是厚度為5 μm時，這個差異是能夠接受的，也可以說是在同一簇細(xì)胞。此次的臨床研究與Rath等[2]研究一致，均認(rèn)為CD166是一種腦膜瘤干細(xì)胞的重要標(biāo)記物。CD133IOD值明顯低于CD166IOD值，進(jìn)一步說明臨床中檢測CD166的價值高于CD133[11]。

綜上所述，組織病理級別與CD133和CD166表達(dá)密切相關(guān)，CD166可能是腦膜瘤干細(xì)胞的一個標(biāo)記物。以往研究對CD166與腦膜瘤之間的聯(lián)系報道較少，且國內(nèi)并無相關(guān)的支持報道，可能與獲得高級別腦膜瘤的標(biāo)本緊密相關(guān)。

4參考文獻(xiàn)

[1]鄭文博，潘凌霄，唐煒，等.乳腺癌干細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，31(12):2 021-2 025.

[2]Rath P， Miller DC，Litofsky NS，et al. Isolation and characterization of apopulation of stem-like progenitor cells from an atypical meningioma[J].Exp Mol Pathol， 2011，90(2):179-188.

[3]Maitin-Belmonte F，Perez-Moreno M. Epithelial cell polarity， stem cells and cancer[J]. Nat Rev Cancer， 2012，12(1):23-38.

[4]張澤立，劉玉光，王宏偉，等.腦膜瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)因素分析[J].中華神經(jīng)外科雜志，2009，25(9):806-808.

[5]張道寶，劉艷輝，余水，等.惡性腦膜瘤的診斷與治療[J].中華神經(jīng)外科雜志，2010，26(9):784-785.

[6]江南凱，岑遠(yuǎn)光，黃常堅，等.顯微外科手術(shù)治療矢狀竇鐮旁腦膜瘤的研究[J].使用醫(yī)學(xué)雜志，2012，28(2):231-233.

[7]肖麗，王貴學(xué)，唐朝君.血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的研究進(jìn)展[J].中華心血管病雜志，2006，34(7):662-664.

[8]Liang S，Huang C，Jia S，et al. Activated leukocyte cell adhesion molecule expression is up-regulated in the development of endometrioid carcinoma[J].Int J Gynecol Cancer，2011，21(3):523-528.

[9]呂宏升，朱慶生，王軍，等.全自動顯微鏡及圖像分析系統(tǒng)處理免疫組化圖像[J].中國體視學(xué)與圖像分析，2004，9(1):37-40.

[10]Piras F，Perra MT，Murtas D，et al. The stem cell marker nestin predicts poor prognosis in human melanoma[J].Oncol Rep， 2010，23(1):17.

[11]陳翔，梅廣林，王鼎，等.Cortactin及CD166在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27(16):2 973-2 975.

(收稿2014-12-09)

The expression and effect of CD133 and CD166 on meningioma

LiBing，HuShijie，WangBing，LuoPeng，LvChao，LiLiang，CaoBaoping，F(xiàn)eiZhou

DepartmentofNeurosurgery，XijingHospitaloftheFourthMilitaryMedicalUniversity，Xi'an710032，China

【Abstract】ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of CD133 and CD166 markers in meningioma patients.MethodsForty cases with meningioma in our hospital from April 2012 to April 2014 were recruited. And then the CD133 and CD166 markers were tested by immunohistochemical technique.ResultsCD133 and CD166 expressed in cell membrane and cytoplasm， which showed the presentation of clustered or scattered distribution. Integrated optical density (IOD) values of CD133 and CD166 varied and differentiated with different levels of meningioma (Z=-4.080，P=0.000;Z=-4.657，P=0.000). With the increasing pathological level， both indicators increased， of which the expressions had a significant correlation with pathological levels (r=0.706，P=0.000).ConclusionThe pathological level may be closely related to CD133 and CD166 expressions， and CD166 stem cell may be a marker in meningioma.

【Key words】CD133; CD166; Meningioma; Expression; Clinical significance

【中圖分類號】R739.45

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1673-5110(2015)24-0026-02

基金項目：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目(編號：81101710)

△通訊作者：費舟(1961- )，男，漢族，教授，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師。研究方向：腦腫瘤、腦損傷診治研究。E-mail:2396425585@qq.com