烏麗雅蘇

（內(nèi)蒙古阿拉善盟食品藥品化妝品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，內(nèi)蒙古 巴彥浩特 750306）

吉日木松湯的薄層色譜鑒別

烏麗雅蘇

（內(nèi)蒙古阿拉善盟食品藥品化妝品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，內(nèi)蒙古 巴彥浩特 750306）

目的建立吉日木松湯薄層色譜鑒別方法。方法以脯氨酸對(duì)照品及鎖陽(yáng)、甘草次酸及甘草作為對(duì)照，采用TLC鑒別方法。結(jié)果該方法提取完全，斑點(diǎn)清晰，分離理想。經(jīng)空白試驗(yàn)證明：其他味藥對(duì)結(jié)果無(wú)干擾。結(jié)論吉日木松湯中鎖陽(yáng)和甘草的薄層鑒別實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，無(wú)陰性干擾，重現(xiàn)性好，斑點(diǎn)清晰，專一性強(qiáng)，結(jié)果滿意，可以作為蒙藥吉日木松湯的薄層鑒別方法。

吉日木松湯；薄層色譜法；鎖陽(yáng)；甘草

吉日木松湯為用于健胃，止反酸，嘔吐，尤其用于妊娠嘔吐的復(fù)方制劑。該方為湯劑劑型，處分由粳米，甘草，鎖陽(yáng)，冰糖四味藥組成。處方中除了粳米（制）、冰糖外，其余二味藥材均在《中國(guó)藥典》2005年版一部有收載。

為提高民族藥的內(nèi)在質(zhì)量，建立了吉日木松湯中鎖陽(yáng)和甘草的薄層鑒別的方法。該法操作簡(jiǎn)便，無(wú)陰性干擾，重現(xiàn)性好，斑點(diǎn)清晰，專一性強(qiáng)，結(jié)果滿意，為該制劑的質(zhì)量提供了準(zhǔn)確的測(cè)定方法。

1 儀器與試劑

1.1 儀器：DG20-002臺(tái)式干燥箱，SLD-I型薄層顯色噴霧泵。

1.2 試劑：硅膠H（青島海洋華工廠產(chǎn)品）其他試劑均為分析純薄層板（10 cm×20 cm，自制，含0.5% cmc-Na）。

1.3 脯氨酸對(duì)照品（批號(hào)111659-200301）購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4 甘草次酸對(duì)照品（批號(hào)110723-200310）購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.5 吉日木松湯生產(chǎn)廠家為阿拉善盟額濟(jì)納旗中蒙醫(yī)院（批號(hào)：20051125、20051129、20060318）。

2 方法與結(jié)果

2.1 A.鎖陽(yáng)薄層鑒別[1]：溶液的制備。

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備以及TLC實(shí)驗(yàn)。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備：取脯氨酸對(duì)照品適量，加水制成每1 mL含2 μL的溶液，搖勻，即得。

2.1.3 對(duì)照藥材溶液的制備：取鎖陽(yáng)對(duì)照藥材1 g，加水10 mL，浸漬30 min，濾過(guò)，取濾液即得。

2.1.4 供試品溶液的制備，取本品粉末5 g，加水10 mL，浸漬30 min，濾過(guò)，即得。

2.1.5 TLC實(shí)驗(yàn)：取對(duì)照品溶液，對(duì)照藥材溶液，供試品溶液：分別吸取上述溶液各5 μL，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以正丙醇－冰醋酸－乙酸－水（4∶1∶1∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以吲哚醌試液，晾干，在100 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果表明，供試品色譜中，在于對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。Rf值為0.52（圖1）。

圖1 1.供試品；2.脯氨酸對(duì)照品；3.鎖陽(yáng)對(duì)照藥材

圖2 1.空白；2.脯氨酸對(duì)照品；3.鎖陽(yáng)對(duì)照藥材

圖3 1.陽(yáng)性供試品；2.脯氨酸對(duì)照品；3.鎖陽(yáng)對(duì)照藥材

圖3 1.陽(yáng)性供試品；2.脯氨酸對(duì)照品；3.鎖陽(yáng)對(duì)照藥材

圖5 1.供試品；2.甘草次酸對(duì)照品；3.甘草對(duì)照藥材

圖6 1.空白；2.甘草次酸對(duì)照品；3.甘草對(duì)照藥材

圖8 1～3.供試品；4.甘草次酸對(duì)照品；5.甘草對(duì)照藥材

圖8 1～3.供試品；4.甘草次酸對(duì)照品；5.甘草對(duì)照藥材

2.1.6 空白試驗(yàn)與自配對(duì)照品實(shí)驗(yàn)。

2.1.7 陰性對(duì)照品實(shí)驗(yàn)按處方自配缺鎖陽(yáng)的吉日木松湯，制備成空白溶液，然后按上述方法點(diǎn)樣、展開、顯色。結(jié)果在與脯氨酸對(duì)照品及鎖陽(yáng)對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上沒(méi)有出現(xiàn)相應(yīng)的斑點(diǎn)。Rf值0.47（圖2）。

2.1.8 陽(yáng)性對(duì)照品按照額濟(jì)納旗中蒙醫(yī)院所提供的處方，制備成吉日木松湯樣品，并按上述方法進(jìn)行提取、點(diǎn)樣、展開，顯色。結(jié)果自配樣品在與對(duì)照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點(diǎn)（圖3）。

說(shuō)明只要生產(chǎn)中投料的鎖陽(yáng)是合格的，生產(chǎn)工藝正確，其產(chǎn)品用本文的TLC方法就可以檢出相應(yīng)的鎖陽(yáng)斑點(diǎn)。

2.1.9 樣品檢驗(yàn)取額濟(jì)納旗中蒙醫(yī)院3批樣品，按上述TLC法檢驗(yàn)，結(jié)果樣品在與對(duì)照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點(diǎn)。Rf值0.46（圖4）。

2.2 B.甘草薄層鑒別[2]：對(duì)照品溶液的制備以及TLC實(shí)驗(yàn)。

2.2.1 對(duì)照品溶液：取甘草次酸對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，即得。

2.2.2 對(duì)照藥材溶液的制備：取甘草對(duì)照藥材1 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備，取本品5 g，加鹽酸1 mL，氯仿15 mL，加熱回流提取1 h，放冷，濾過(guò)濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為供試品溶液。

2.2.4 TLC實(shí)驗(yàn)：取對(duì)照品溶液，對(duì)照藥材溶液，供試品溶液，吸取供試品溶液10 μL，對(duì)照品溶液2 μL，對(duì)照藥材2 μL分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚－苯－乙酸乙酯－冰醋酸（5∶10∶4∶0.6）為展開劑，展開，取出晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，于對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。Rf值為0.42（圖5）。

2.2.5 空白試驗(yàn)與自配對(duì)照品實(shí)驗(yàn)。

2.2.6 陰性對(duì)照品實(shí)驗(yàn)按處方自配缺甘草的吉日木松湯，制備成空白溶液，然后按上述方法點(diǎn)樣、展開、顯色。結(jié)果在與對(duì)照品及鎖陽(yáng)對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上沒(méi)有出現(xiàn)相應(yīng)的斑點(diǎn)。Rf值為0.51（圖6）。

2.2.7 陽(yáng)性對(duì)照品按照額濟(jì)納旗中蒙醫(yī)院所提供的處方，制備成吉日木松湯樣品，并按上述方法進(jìn)行提取、點(diǎn)樣、展開，顯色。結(jié)果自配樣品在與對(duì)照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點(diǎn)。Rf值為0.45（圖7）。說(shuō)明只要生產(chǎn)中投料的甘草是合格的，生產(chǎn)工藝正確，其產(chǎn)品用本文的TLC方法就可以檢出相應(yīng)的甘草斑點(diǎn)。

2.2.8 樣品檢驗(yàn)取額濟(jì)納旗中蒙醫(yī)院3批樣品，按上述TLC法檢驗(yàn)，結(jié)果樣品在與對(duì)照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點(diǎn)。Rf值為0.39（圖8）。

3 討 論

3.1 取樣量：供試品的取樣量為5 g，相當(dāng)于原藥材1 g。

3.2 從3批樣品的TLC結(jié)果可以看出3批樣品的質(zhì)量較好，均與對(duì)照品和對(duì)照藥材有相應(yīng)的斑點(diǎn)。

3.3 提取條件與展開系統(tǒng)的選擇：脯氨酸是組成蛋白質(zhì)的常見氨基酸之一，脯氨酸以天然存在形式，膠原的主要成分之一。為無(wú)色針狀結(jié)晶，含一個(gè)結(jié)晶水。熔點(diǎn)為190 ℃（無(wú)結(jié)晶水，205 ℃分解）。具有潮解性。能溶于水和醇，難溶于丙酮和氯仿，不溶于乙醚。根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，以藥典為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行了試驗(yàn)：取本品，加水10 mL，浸漬30 min。濾液作為供試品溶液。試驗(yàn)結(jié)果確證：該方法提取完全，斑點(diǎn)清晰，分離理想，Rf值適中。經(jīng)空白試驗(yàn)證明，其他味藥對(duì)結(jié)果無(wú)干擾[3]。

甘草根及根莖含甘草甜素，為甘草酸的鉀，鈣鹽。甘草次酸為白色結(jié)晶性粉末，無(wú)味，微溶于水，溶于乙醇，氯仿。根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，以《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行了試驗(yàn)：取本品加鹽酸1 mL，氯仿15 mL，加熱回流提取1 h，放冷，濾過(guò)濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為供試品溶液。

試驗(yàn)結(jié)果確證：該方法提取完全，斑點(diǎn)清晰，分離理想。經(jīng)空白試驗(yàn)證明：其他味藥對(duì)結(jié)果無(wú)干擾。

4 結(jié) 論

該實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，無(wú)陰性干擾，重現(xiàn)性好，斑點(diǎn)清晰，專一性強(qiáng)，結(jié)果滿意，可以作為蒙藥吉日木松湯的薄層鑒別方法。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2005年版(一部)[M]..北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:103.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].蒙藥分冊(cè).赤峰:內(nèi)蒙古科學(xué)技術(shù)出版社,1998.

[3]北京中醫(yī)藥大學(xué).中藥鑒定學(xué)(供中藥類專業(yè)用)[M].北京:科學(xué)出版社,2002:290.

R282.710.3

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1671-8194（2015）05-0058-02