趙春 （長(zhǎng)江大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院，湖北 荊州434023）

車(chē)前草 （Plantago asiatica L.）又名車(chē)輪菜，為車(chē)前科 （Plantaginaceae）多年生草本植物，含有黃酮類(lèi)、胡蘿卜苷、桃葉珊瑚苷、車(chē)前苷、多酚、生物堿、三萜、甾醇類(lèi)化合物等化合物［1～6］。車(chē)前草在我國(guó)分布廣泛，具有悠久的藥用歷史，以種子和全草入藥，中醫(yī)認(rèn)為其具有抗菌、殺蟲(chóng)、清熱利尿、祛痰、涼血、解毒的功效，主治水腫尿少、熱淋澀痛、暑濕瀉痢、痰熱咳嗽和痛腫瘡毒等［7～10］。本研究通過(guò)測(cè)定車(chē)前草中類(lèi)黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽的含量，旨在為車(chē)前草的綜合開(kāi)發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

車(chē)前草采自長(zhǎng)江大學(xué)東校區(qū)校園內(nèi)，洗去泥土，風(fēng)干，粉碎，過(guò)80目篩，密封保存?zhèn)溆谩?/p>

試劑：蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、無(wú)水乙醇、硝酸鋁、氫氧化鈉、草酸、重鉻酸鉀、次甲基藍(lán)、碳酸鈉、硫酸、單寧、三氯化鐵、硫酸鋅、N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽、對(duì)氨基苯磺酸、亞硝酸鈉、氨水等，均為市售分析純?cè)噭?/p>

主要儀器：722型分光光度計(jì)為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；植物粉碎機(jī)為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；EB－330H分析天平為上海精科電子天平廠產(chǎn)品；數(shù)顯恒溫水浴鍋、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱為常州國(guó)華電器有限公司產(chǎn)品。

1.2 活性物質(zhì)含量的測(cè)定方法

類(lèi)黃酮的測(cè)定采用超聲波乙醇浸提法［11］，草酸的測(cè)定采用次甲基藍(lán)－重鉻酸鉀法［12］，單寧的測(cè)定采用比色法［13］，亞硝酸鹽含量測(cè)定采用分光光度法［14］。每種處理重復(fù)4次。

1.3 加樣回收率試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量樣品2份，一份不加入標(biāo)樣，另一份加入等量標(biāo)準(zhǔn)品，按1.2所述方法測(cè)定類(lèi)黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽含量，計(jì)算回收率，重復(fù)4次。

2 結(jié)果與分析

2.1 車(chē)前草不同部位的類(lèi)黃酮含量

以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)、光密度為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到光密度 （y）與濃度 （x）的線(xiàn)性方程為y＝－0.0149＋0.0114 x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9998?？梢?jiàn)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與光密度之間存在極顯著的線(xiàn)性關(guān)系。

車(chē)前草中類(lèi)黃酮的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖1。從圖1可知，根中類(lèi)黃酮含量最高，葉中類(lèi)黃酮含量次之，花中類(lèi)黃酮含量最低，三者間含量差異顯著。

2.2 車(chē)前草不同部位的草酸含量

草酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的光密度 （y）與濃度 （x）的線(xiàn)性方程為y＝0.0373＋0.0101x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9998，車(chē)前草各部分草酸含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖2?？梢?jiàn)，車(chē)前草葉的草酸含量最高，而花的草酸含量最低。

2.3 車(chē)前草不同部位的單寧含量

以單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)、光密度為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到光密度 （y）與單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度 （x）的線(xiàn)性方程為y＝0.0443＋0.005 x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9922?？梢?jiàn)，濃度與光密度之間存在極顯著的線(xiàn)性關(guān)系。

車(chē)前草各部位單寧的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖3。測(cè)定結(jié)果說(shuō)明，車(chē)前草葉、花中單寧含量較高，二者間無(wú)明顯差異，根中單寧含量最小。

圖1 車(chē)前草不同部位的類(lèi)黃酮含量

圖2 車(chē)前草不同部位的草酸含量

2.4 車(chē)前草不同部位的亞硝酸鹽含量

以光密度為縱坐標(biāo)，亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，光密度 （y）與亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 （x）的線(xiàn)性方程為y＝－0.0029＋0.7034x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9997。

車(chē)前草根、葉、花中亞硝酸鹽含量見(jiàn)圖4。由圖4可知，車(chē)前草葉中亞硝酸鹽含量最高，根中亞硝酸鹽含量最低。

圖3 車(chē)前草不同部位的單寧含量

圖4 車(chē)前草不同部位的亞硝酸鹽含量

2.5 回收率

類(lèi)黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽回收率測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，各活性物質(zhì)測(cè)定回收率均達(dá)到94%以上，說(shuō)明測(cè)定方法是可靠的。

表1 回收率測(cè)定結(jié)果

3 討論與小結(jié)

類(lèi)黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽都是植物次生代謝產(chǎn)物，植物中的類(lèi)黃酮和單寧具有較強(qiáng)的生理活性，在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有著廣泛用途。類(lèi)黃酮具有降血壓、降血脂的作用，而單寧有利于心臟血管疾病的預(yù)防；草酸攝入過(guò)多會(huì)影響人體對(duì)鈣的吸收，引起低血鈣，造成骨質(zhì)疏松癥；亞硝酸鹽具有很強(qiáng)的毒性，還會(huì)生成有強(qiáng)致癌性的亞硝胺。

在農(nóng)業(yè)有害生物的防治中，一般認(rèn)為黃酮類(lèi)化合物對(duì)昆蟲(chóng)具有防御作用，其防御機(jī)制或在于影響昆蟲(chóng)的行為和代謝，使之發(fā)生忌避和拒食；或是破壞昆蟲(chóng)正常的代謝過(guò)程，引起中毒甚至死亡。單寧一般被認(rèn)為是有效的化學(xué)防御物質(zhì)，對(duì)昆蟲(chóng)的不利作用主要是干擾昆蟲(chóng)對(duì)食物的利用，尤其是干擾腸道的消化。單寧分子能與蛋白質(zhì)分子結(jié)合形成穩(wěn)定的交叉鏈，能抑制酶的活性，使昆蟲(chóng)不能利用鞣化的蛋白質(zhì)，單寧還能與淀粉形成絡(luò)合物而影響昆蟲(chóng)對(duì)淀粉的消化。植物中草酸和亞硝酸鹽含量也會(huì)影響昆蟲(chóng)的取食行為。

本研究測(cè)定了車(chē)前草根、葉、花中類(lèi)黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽的含量，可為車(chē)前草的綜合開(kāi)發(fā)利用提供參考。

［1］ 李明娟，朱琪，劉柳成，等.車(chē)前草超微粉黃酮的提取工藝研究 ［J］.中藥材，2013，36（8）：1335～1339.

［2］ 李明娟，劉磊，傅春燕，等.高效液相色譜法分析車(chē)前草中的黃酮化合物 ［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2013，30（3）：1437～1443.

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［11］ 杜娜娜，盛良全，蔣雪月.超聲波法提取苦丁茶總黃酮含量的工藝 ［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2011，28（3）：1447～1450.

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