傅 雷 王珂萌 孫藝平 張冬梅 趙心宇 (大連醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院，遼寧 大連 6044)

鹿茸有提高性功能，增強機體免疫力，促進骨折愈合，保護心血管功能等作用。低鈣或高鈣的條件對中老年人身體極其不利，特別是女性更年期后由于卵巢功能衰退，骨骼缺乏雌激素的保護不能拮抗甲狀旁腺激素對骨吸收作用，致使骨礦物質迅速流失導致缺鈣，很容易導致骨質疏松和心血管疾病。激素替代治療可延緩及阻止與絕經相關疾病的發(fā)生〔1〕，但是又出現許多副作用。研究表明:在低鈣條件下，鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力具有保護作用;但在高鈣的條件下鹿茸對離體蟾蜍心臟作用如何，以及在低鈣或高鈣的條件下鹿茸對離體蟾蜍心臟作用機制是否與β受體有關，國內外未見報道。本文旨在探討鹿茸對心臟的保護機制，為鹿茸合理用藥提供參考依據。

1 方法與材料

1.1 動物及分組 中華蟾蜍90只，體重80～100 g，由大連醫(yī)科大學動物實驗中心提供。將蟾蜍隨機分為對照組和實驗組。對照組又分為正常任氏液組、陽性對照組、陰性對照組和藥品對照組;正常任氏液組為蟾蜍離體心臟標本只灌流正常任氏液，描記正常離體蟾蜍心肌收縮力曲線;陽性對照組為蟾蜍離體心臟標本在灌流正常任氏液后改灌流的高鈣任氏液，描記心肌收縮力增強曲線;陰性對照組為蟾蜍離體心臟標本在灌流正常任氏液后改灌流低鈣任氏液，描記心肌收縮力減弱曲線;藥品對照組為蟾蜍離體心臟標本在灌流正常任氏液后改灌流鹿茸(2 g/L)和異丙腎上腺素(I50，10 mg/L)溶液，觀察藥物本身作用。實驗組分為異丙腎上腺素低鈣組和異丙腎上腺素高鈣組，低鈣組或高鈣組又分為鹿茸前及后加鹿茸兩組，每組10只。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器 鹿茸凍干粉由美國德州大學圣安東尼奧健康中心霍玉書教授提供，以純凈蒸餾水稀釋。Iso(上海禾豐制藥有限公司生產，批號110401)，任氏液、低鈣任氏液和高鈣任氏液按照文獻〔2〕配制。BL-420F生物機能實驗系統和FT-100張力換能器由成都泰盟公司生產。

1.2.2 給藥方法 以任氏液+低鈣任氏液+鹿茸+Iso組為例，離體蟾蜍心臟灌流任氏液，穩(wěn)定后將心室內任氏液吸出后的改灌流低鈣任氏液，在該基礎上加入鹿茸稀釋液后再灌流Iso溶液，每次換液穩(wěn)定后觀察40 min。其余組給藥方法與上述基本相同，每次加 20 μl藥之前先吸出 20 μl灌洗液，記錄心搏曲線。

1.3 統計學分析 應用SPSS19.0軟件行t檢驗。

2 結果

2.1 鹿茸在低鈣和高鈣的條件下對離體蟾蜍心肌收縮力的保護作用 在低鈣狀態(tài)下心室外鹿茸濃度為2 g/L時，心肌收縮力明顯增強(P＜0.05，見表1);在高鈣狀態(tài)下心室外鹿茸濃度為2 g/L時，心肌收縮力明顯降低(P＜0.01，見表2)，即在低鈣狀態(tài)下和高鈣狀態(tài)下心室外鹿茸濃度為2 g/L時，鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力具有雙向調節(jié)保護作用。

2.2 Iso在低鈣狀態(tài)下對鹿茸離體蟾蜍心肌收縮力保護作用的影響 在低鈣狀態(tài)下，灌流液Iso濃度為10 mg/L時，心肌收縮力明顯增強(P＜0.001);之后加鹿茸，心肌收縮力在相對較強的狀態(tài)下明顯抑制(P＜0.001);而在低鈣狀態(tài)下先加鹿茸(P＜0.05)再加 Iso，心肌收縮力明顯興奮后再被興奮(P＜0.001)。即在低鈣狀態(tài)下，無論是在灌流鹿茸凍干粉溶液前或是后只要灌流鹿茸凍干粉溶液，心肌收縮力均明顯興奮，而在離體蟾蜍心肌收縮力下降或上升狀態(tài)下，只要灌流鹿茸凍干粉溶液，心肌收縮力就會保護性增強或降低，見表1。

表1 在低鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力保護作用的影響(±s，g，n=10)

表1 在低鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力保護作用的影響(±s，g，n=10)

后一列數據與前一列數據比較:1)P＜0.05;2)P＜0.001;下表同

組別 開始狀態(tài) 第1次換灌流液穩(wěn)定后第2次換灌流液穩(wěn)定后正常任氏液組2.90±0.11 2.95±0.07 －任氏液+低鈣組 2.93±0.10 1.71±0.09 －低鈣+鹿茸組 1.71±0.09 3.07±0.811) －低鈣+Iso組 1.71±0.09 5.18±0.172) －低鈣+Iso+鹿茸組 1.71±0.09 5.18±0.172) 1.66±0.142)低鈣+鹿茸+Iso組 1.71±0.09 3.07±0.811) 3.53±0.401)

2.3 Iso在高鈣狀態(tài)下對鹿茸離體蟾蜍心肌收縮力保護作用的影響 在高鈣狀態(tài)下，灌流液Iso濃度為10 mg/L時，心肌收縮力明顯增強(P＜0.01)，之后加鹿茸，心肌收縮力在相對較強的狀態(tài)下加入鹿茸后心肌收縮力明顯抑制(P＜0.001);而在高鈣狀態(tài)下先加鹿茸再加Iso，心肌收縮力是在先加鹿茸心肌收縮力被抑制后再被明顯被增加(P＜0.001)，見表2。

表2 在高鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力保護作用的影響(±s，g，n=10)

表2 在高鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力保護作用的影響(±s，g，n=10)

組別 開始狀態(tài) 第1次換灌流液穩(wěn)定后第2次換灌流液穩(wěn)定后正常任氏液組2.94±0.05 2.92±0.03 －任氏液+高鈣組 2.95±0.04 5.95±0.05 －高鈣+鹿茸組 5.95±0.05 2.90±0.031) －高鈣+Iso組 5.95±0.05 10.70±0.471) －高鈣+Iso+鹿茸組 5.95±0.05 10.70±0.471) 2.91±0.122)高鈣+鹿茸+Iso組 5.95±0.05 2.90±0.031) 10.91±1.072)

3 討論

鹿茸化學成分比較復雜，有機成分為雌二醇、雌酮、表皮生長因子、轉化生長因子、神經生長因子等〔3〕，無機成分為人體必需常量元素Ca、Na、K、P和11種微量元素。馬英淇等〔4〕研究發(fā)現:在低鈣條件下，鹿茸提取液對離體蟾蜍心臟活動的興奮作用比在正常任氏液的條件下更容易出現，即在低鈣條件下對心肌具有保護作用。本實驗結果顯示:在低鈣條件下，鹿茸凍干粉溶液對離體蟾蜍心臟的作用與馬英淇等〔4〕發(fā)現基本相同，鹿茸在高鈣條件下，即在心肌收縮力明顯增強的條件下被抑制，是心肌在高鈣條件下的一種保護作用，這是一種雙向保護性調節(jié)〔5〕。一定濃度的睪酮可以維持血管的一定張力，改善心臟傳導或擴張冠脈;改善心肌缺血、減少心肌細胞凋亡及纖維化，保護心臟〔6〕。人類若長期處在低鈣或高鈣情況下對心臟非常不利，臨床上有低鈣和高鈣條件下誘發(fā)患者死亡的報道。

Iso是β受體激動劑，β受體分為β1和β2受體，興奮β1腎上腺素受體，增快心率、增強心肌收縮力，增加心臟傳導系統的傳導速度，縮短竇房結的不應期，還可擴張外周血管，減輕心負荷，以糾正低排血量和血管嚴重收縮的休克狀態(tài)。興奮支氣管上β2腎上腺素受體，使支氣管平滑肌松弛，抑制組胺等介質的釋放。實際上β1受體主要分布于心臟，可增加心肌收縮性、自律性和傳導功能。無論在高鈣或低鈣狀態(tài)下，只要加入Iso離體蟾蜍心肌收縮力就增強，之后加入鹿茸心肌收縮力得以恢復性保護;然后再加Iso，心肌收縮力再次被興奮，推測鹿茸的心肌保護作用與β受體興奮有關。鹿茸對心肌收縮影響的具體作用機制涉及更微觀的領域，仍待進一步研究。

1 劉俊寶，劉曉軍，郭曉娟.絕經期雌激素替代治療對血脂的影響〔J〕．中國婦幼保健，2010;25(21):3014-5.

2 董 帥，唐澤耀，張冬梅，等.茶色素在低鈣及高鈣濃度下對離體蟾蜍心肌收縮力的影響〔J〕．中藥新藥與臨床藥理，2013;24(6):561-4.

3 凌 云，羅方成，李秋俠，等.中藥鹿茸性激素的含量測定〔J〕．中草藥，1999;30(7):499-501.

4 馬英淇，張冬梅，李 壯，等.鹿茸在正常和低鈣條件下對離體蟾蜍心肌收縮力和心率的影響〔J〕．遼寧中醫(yī)藥學學報，2014;16(7):40-2.

5 周玉文，曹雪濱，徐 鵬，等.睪酮對鈣離子通道和心臟功能的影響〔J〕．心臟雜志，2012;24(2):275-8，280.

6 顏永紅，馬瑛桓.老年人低鈣引起心力衰竭1例〔J〕．中華老年醫(yī)學雜志，2003;22(2):97-9.