周兆祥，白石琦，鄒燁，馮偉偉，趙婷，王鑫彤，朱昀，張漪靜，仰榴青

（江蘇大學(xué)1.化學(xué)化工學(xué)院；2.藥學(xué)院；3.食品與生物工程學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江212013）

黃秋葵茶葉的成分分析及其水提物的抗氧化活性測定

周兆祥1，白石琦2，鄒燁3，馮偉偉3，趙婷1，王鑫彤1，朱昀1，張漪靜1，仰榴青1

（江蘇大學(xué)1.化學(xué)化工學(xué)院；2.藥學(xué)院；3.食品與生物工程學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江212013）

目的：對黃秋葵茶葉營養(yǎng)成分和活性成分進(jìn)行分析，并對其水提取物進(jìn)行抗氧化活性測定。方法：采用國標(biāo)法和農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法分析黃秋葵茶葉的營養(yǎng)成分和活性成分，同時測定其水提物對DPPH自由基、羥自由基的清除作用。結(jié)果：黃秋葵茶葉（以干基計(jì)）中灰分含量為15.32%，粗蛋白含量為27.58%，粗脂肪含量為2.27%，總糖含量為12.06%；氨基酸分析結(jié)果表明，黃秋葵茶葉含有多種人體必需氨基酸；元素分析結(jié)果表明，黃秋葵茶葉中含有豐富的鉀、鈣、鎂、鐵等元素；活性成分黃酮和多糖的含量分別為1.36%和4.70%。黃秋葵茶葉水提物清除DPPH自由基、羥自由基的半數(shù)抑制濃度分別為156.8 mg/L和674.5mg/L。結(jié)論：黃秋葵茶葉具有較好的營養(yǎng)價值和抗氧化保健功能，為消費(fèi)者提供了一種新型的綠色健康飲品。

黃秋葵茶葉；營養(yǎng)成分；黃酮；多糖；抗氧化

1 材料與方法

1.1 材料

黃秋葵采自江蘇省鎮(zhèn)江市，并經(jīng)鎮(zhèn)江食品藥品監(jiān)督管理局主任中藥師陳黎鑒定，采摘成熟黃秋葵果實(shí)下方的新鮮葉片，清洗，置陰涼干燥通風(fēng)處攤晾12 h，切碎，于115℃殺青7min，揉捻，70℃烘12 h，得黃秋葵茶葉成品。

1.2 試劑與儀器

二苯代苦味肼基（DPPH·）為美國Sigma公司產(chǎn)品，其余試劑均為市售分析純。SHZ-D（Ⅲ）型防腐臺式循環(huán)水真空泵（上海羌強(qiáng)儀器設(shè)備有限公司），YP102N電子天平（上海高致精密儀器有限公司），DT5-1B低速離心機(jī)（北京時代北利離心機(jī)有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 黃秋葵茶葉營養(yǎng)成分的檢測 水分按照GB5009.3-2010直接干燥法進(jìn)行測定；灰分測定按照GB5009.4-2010灼燒稱重法進(jìn)行；按照苯酚 硫酸法［7］測定總糖含量；粗蛋白含量按照GB 5009.5-2010凱氏定氮法測定；粗脂肪含量按照GB 14772-2008方法測定；采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜ICP-AES測定各個元素的含量；氨基酸含量按照GB/T5009.124-2003方法測定。

1.3.2 黃秋葵茶葉活性成分測定 采用中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 1295-2007測定總黃酮；采用苯酚-硫酸法［7］測定多糖含量。

1.3.3 黃秋葵茶葉水提取物抗氧化活性測定

1.3.3.1 黃秋葵茶葉提取物的制備 精確稱取上述黃秋葵茶葉成品，料液比1：50（g/mL），沸水提取2 h，重復(fù)提取2次，合并濾液，濃縮，冷凍干燥，得提取物粉末。

此后，經(jīng)福建鼎力司法鑒定中心鑒定，林運(yùn)娘所占用林地面積達(dá)6.1畝，造成林木蓄積量損失23.424立方米，且該處林種為水源涵養(yǎng)林（國家生態(tài)公益林）。水源涵養(yǎng)林屬于防護(hù)林，按照法律規(guī)定，非法占用并毀壞5畝以上即構(gòu)成非法占用農(nóng)用地罪。

1.3.3.2 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn) 精確稱取DPPH標(biāo)準(zhǔn)品7.9 mg，用無水乙醇溶解并定容于100 mL棕色容量瓶中，配制成濃度為0.2 mmol/L的DPPH-乙醇溶液，4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。分別量取1.5 mL維生素C（Vc）溶液于試管中，加入1.5 mL的DPPH-乙醇溶液，搖勻，暗處反應(yīng)30 min，于波長517 nm處測定光密度值（Di），用試樣溶劑代替Vc溶液測定空白光密度值（D0），用無水乙醇代替DPPH溶液測定光密度值（Dj），其中Vc為陽性對照，樣品測定方法同Vc，按照以下公式進(jìn)行清除率計(jì)算［8］：

1.3.3.3 羥自由基清除實(shí)驗(yàn) 精確稱取14.87 mg鄰二氮菲，用無水乙醇溶解并定容至100 mL的容量瓶中，量取1 mL鄰二氮菲無水乙醇溶液，加入2 mL 0.05 mol/L pH7.4的磷酸鹽緩沖液和1 mL無水乙醇，充分混合后再加入1 mL 0.75 mmol/L硫酸亞鐵溶液，搖勻，然后加入1mL 0.01%過氧化氫溶液，37℃水浴60 min，510 nm處測光密度值（D損）；以Vc溶液代替無水乙醇測得樣品的光密度值（D樣）；以蒸餾水代替0.01%過氧化氫溶液測得光密度值（D未），其中Vc為陽性對照，樣品測定方法同Vc，清除率公式如下［8］：

2 結(jié)果

2.1 黃秋葵茶葉營養(yǎng)成分

黃秋葵茶葉各組成成分中，蛋白質(zhì)含量最高，達(dá)27.58%，其次為灰分，占15.32%，總糖含量為12.06%，水分含量為6.55%，粗脂肪為2.27%。

表1為黃秋葵茶葉中氨基酸分析結(jié)果?？梢婞S秋葵茶葉中氨基酸種類豐富，其中賴氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、亮氨酸為人體必需氨基酸。黃秋葵茶葉所含各元素中含量最高的是鉀元素，為1 143.375 mg/100 g，其他依次為Ca（478.164 mg/100 g），Mg（162.163 mg/100 g），Na（77.371 mg/100 g），F(xiàn)e（22.757 mg/100 g），Mn（17.502 mg/ 100 g），Se（5.278mg/100 g）以及Zn（4.756mg/100 g）。

表1 黃秋葵茶葉氨基酸分析結(jié)果

2.2 活性成分分析

經(jīng)測定黃秋葵茶葉中黃酮含量為1.36%，多糖為4.70%。

2.3 黃秋葵茶葉水提取物的抗氧化活性

2.3.1 DPPH自由基清除能力 根據(jù)檢測到的各試樣光密度值進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見圖1，黃秋葵茶葉水提取物清除DPPH自由基的IC50為156.8 mg/L（Vc的IC50為12.0 mg/L）。黃秋葵茶葉水提取物對DPPH自由基清除能力強(qiáng)，當(dāng)提取物濃度為320 mg/L時，對DPPH自由基的清除率可達(dá)82.91%。

圖1 黃秋葵茶葉水提物對DPPH自由基清除率

2.3.2 羥基自由基清除能力 黃秋葵茶葉水提物與Vc對羥基自由基的清除作用見圖2。清除率隨著黃秋葵茶葉水提物與Vc質(zhì)量濃度的增加而增大。在該體系中黃秋葵茶葉水提物與Vc的IC50分別為674.5 mg/L和34.8 mg/L，當(dāng)提取物質(zhì)量濃度為2 000 mg/L時，對羥自由基的清除率可達(dá)80.09%。

圖2 黃秋葵茶葉水提物對羥基自由基清除能力

3 結(jié)論

黃秋葵茶葉富含黃酮、多糖等活性成分和蛋白質(zhì)、脂肪、氨基酸和微量元素等營養(yǎng)成分，其水提物具有較好的抗氧化能力。由此可見，黃秋葵茶葉具有較好的營養(yǎng)價值和抗氧化保健功能，為消費(fèi)者提供了一種新型的綠色健康飲品。本文為黃秋葵茶葉的研究與應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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Ingredient analysis and antioxidant activity of water extract of Abelmoschus esculentus tea

ZHOU Zhao-xiang1，BAIShi-qi2，ZOU Ye3，F(xiàn)ENGWei-wei3，ZHAO Ting1，WANGXin-tong1，ZHU Yun1，ZHANG Yi-jing1，YANG Liu-qing1
（1.School of Chemistry and Chemical Engineering，2.School of Pharmacy，3.School of Food and Biological Engineering，Jiangsu University，Zhenjiang Jiangsu 212013，China）

Objective：To analyze nutritional ingredient and active ingredient of Abelmoschus esculentus tea，and study on antioxidant activity ofwater extract.M ethods：To analyze nutritional ingredient and active ingredient of Abelmoschus esculentus tea with GB method and agriculture standard method.Scavenging effects ofwater extract on DPPH and OH were determined.Results：The content of ash，crude protein，crude fatand total carbohydratewere 15.32%，27.58%，2.27%and 12.06%of dried sample，respectively.The amino acid analysis results showed that Abelmoschusesculentus tea containedmany kinds of essential amino acid.The trace element analysis results showed that Abelmoschus esculentus tea contained K，Ca，Mg，F(xiàn)e，et al.The active ingredient flavonoids and polysaccharide were 1.36%and 4.70%，respectively.The IC50of water extract scavenging DPPH and OH were 156.8 mg/L and 674.5 mg/L，respectively.Conclusion：Abelmoschus esculentus tea has good nutritional value and antioxidant effect which can provide a new green health drinks for consumers.

Abelmoschus esculentus tea；nutritional ingredient；flavonoids；polysaccharide；antioxidant activity

R282.71 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A ［文章編號］ 1671-7783（2015）03-0260-03

10.13312/j.issn.1671-7783.y130069

周兆祥（1988—），男，碩士研究生；仰榴青（通訊作者），博士，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail：yangliuqing@ujs.edu.cn

2013-04-09 ［編輯］ 陳海林