董志同 李 妍

(1.內(nèi)蒙古大唐藥業(yè)有限公司，內(nèi)蒙古，呼和浩特 010010; 2.內(nèi)蒙古自治區(qū)食品藥品檢驗所，內(nèi)蒙古，呼和浩特 010020)

本方來源于包頭市中蒙醫(yī)院的蒙醫(yī)驗方，是蒙醫(yī)常用的蒙藥制劑。1988 年內(nèi)蒙古衛(wèi)生廳編寫起草《內(nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準》補充本時収載本方。1998 年收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準》蒙藥分冊［1］，為現(xiàn)行有效標(biāo)準，該標(biāo)準項下規(guī)定了性狀項和制劑的通項檢查。質(zhì)量控制標(biāo)準低，為了提高質(zhì)量控制標(biāo)準，經(jīng)過對收集的7 批參竹精顆粒中2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的定量分析，可控制其質(zhì)量，為參竹精顆粒的質(zhì)量評價提供可靠的方法。

1 儀器與試劑試藥

日本島津LC-20AT 型高效液相色譜儀(帶SPD-M20A 型二極管陣列檢測器)和LC-10ATvp 型高效液相色譜儀(帶SPD-10Avp 型紫外檢測器)，Sartorius ME5 型電子天平，Mettler AE-100 電子天平，JD200-2 型電子天平;AS 5150A 超聲清洗儀。

2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對照品：中國藥品生物制品檢定所提供(批號：110844-200606)

乙腈為色譜純，其他均為分析純試劑，水為高純水。

2 方法

2.1 色譜條件的選擇：色譜柱：島津C18(250 ×4. 6mm 5μm)色譜柱;流動相乙腈-水(25：75);檢測波長320nm;柱溫30℃;流速1.0mL/min;進樣量10μL。

2.2 對照品溶液的制備：精密稱取2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對照品適量，置100mL 量瓶中，加稀乙醇制成每1mL 中含25μg 的溶液，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液制備方法：取本品，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加稀乙醇25mL，稱定重量，超聲處理20、30、40、60min，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，靜置，上清液濾過，取上清液5mL 加至10mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得(避光操作)。

2.4 線性考察：按“2.2”項下，分別精密吸取濃度為0.025mg/mL 的對照品溶液2μL、5μL、10μL、20μL、30μL 注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以峰面積對進樣量進行回歸分析，結(jié)果二苯乙烯苷在50.62ng ～759.3ng 范圍內(nèi)分別呈良好的線性關(guān)系?；貧w方程分別為：

圖1 二本乙烯苷對照品

圖2 供試品色譜圖

2.5 重復(fù)性試驗：取同一批號供試品6 份，分別按上述供試品溶液的制備方法和色譜條件進行測定，進樣量各20μL，計算RSD 為0.13%。

2.6 穩(wěn)定性試驗：取同一供試品溶液分別于0h、2h、4h、8h、12h、24h 進行測定，計算RSD 為2.69%。

2.7 回收率實驗：取同一批號供試品6 份，各約1.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，按“2.3”項下分別加入對照品溶液，同法測定，結(jié)果見表1。

表1 二苯乙烯苷加樣回收試驗

3 樣品測定方法

分別收集內(nèi)蒙古凱蒙制藥有限公司樣品6 批，內(nèi)蒙古奧特奇股份有限公司樣品1 批，按上述色譜條件，測定2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的峰面積。結(jié)果7 批樣品的含量(mg/袋)分別為0.943、0.812、0.917、0.665、0.654、0.739、4.215。

4 討論

《中國藥典》2010 年版一部“何首烏”及注冊標(biāo)準YBZ12992009 含量測定項下均采用超聲提取法［2-3］，提取液過濾后直接進樣。實驗過程中發(fā)現(xiàn)，因流動相為乙腈-水(20：80)，無機相比例大，提取液直接進樣時易析出不溶物，導(dǎo)致色譜預(yù)柱堵塞，不利于操作，將樣品液用水稀釋1 倍，此現(xiàn)象得到改善。故采用稀乙醇超聲提取，提取液再用水稀釋后進樣。

以稀乙醇作為提取溶劑分別考察超聲20、30、40、60min后含量的變化，發(fā)現(xiàn)30min 后結(jié)果相差不大，故選擇以稀乙醇超聲30min 作為提取方法。

本試驗的方法工作曲線線性關(guān)系好，結(jié)果的準確度和精密度均能滿足要求，分析方法簡便、快速、重復(fù)性好、對提高參竹精顆粒質(zhì)量標(biāo)準的控制水平很有價值。

［1］國家藥典委員會.衛(wèi)生部藥品標(biāo)準蒙藥分冊［S］.127.

［2］國家藥典委員會.中國藥典［S］.版一部.北京;中國醫(yī)藥科技出版社，2010：164.

［3］國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊標(biāo)準YBZ12992009