許 軍（山東省諸城市諸城外貿(mào)有限責(zé)任公司 262200）

硒是動(dòng)物的必需營(yíng)養(yǎng)元素。高硒和低硒均會(huì)引起動(dòng)物發(fā)生各種疾病。適量硒在動(dòng)物體內(nèi)的生理作用是多方面的，通過(guò)清除機(jī)體脂質(zhì)氫過(guò)氧化物，保護(hù)和維持免疫系統(tǒng)。通過(guò)調(diào)節(jié)甲狀腺激素影響機(jī)體的代謝，維持正常的生殖功能，促進(jìn)生長(zhǎng)。硒中毒時(shí)，硒都是一種致病因子或病原體。通過(guò)置換含硫氨基酸或者誘發(fā)的活性氧自由基對(duì)人和動(dòng)物細(xì)胞和組織產(chǎn)生破壞作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 1日齡健康雛鴨100只。

1.1.2 試驗(yàn)藥品 亞硒酸鈉(飼料級(jí))、亞硒酸鈉、多聚賴(lài)氨酸、地高辛標(biāo)記dUTP、促甲狀腺激素、測(cè)定試劑盒、游離T3(FT3)測(cè)定試劑盒、游離T4(FT4)測(cè)定試劑盒、反T3(rT3)測(cè)定試劑盒及其它試劑。

1.2 方法

雛鴨預(yù)飼全價(jià)飼料(Se=0.3mg/kg)7d后，隨機(jī)分成2組，每組50只。對(duì)照組飼喂全價(jià)日糧。中毒組飼喂含8mg/kg硒的全價(jià)日糧。各組隨機(jī)分成4批次，分別于試驗(yàn)期15、30、60、90d稱(chēng)重、割殺、采樣，10只/次。

1.2.1 樣品采集 2組試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行心臟采血1～4ml，制備肝素抗凝血，分成3份，1份用于氧自由基含量的測(cè)定，1份用于硒含量測(cè)定，1份用于血常規(guī)的測(cè)定。

1.2.2 管理 常規(guī)飼養(yǎng)，定期稱(chēng)重，收集中毒組動(dòng)物的臨床癥狀，篩選雛鴨硒中毒臨床診斷指標(biāo)。

1.2.3 病理組織學(xué)檢查 采取甲狀腺等臟器組織樣，在電子顯微鏡下觀察病理組織學(xué)變化。

1.2.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析與處理 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析，兩組差異不顯著(P>0.05)、差異極顯著(P<0.01)、差異顯著(P<0.05)。

2 結(jié)果

2.1 臨床癥狀與病理變化

2.1.1 臨床癥狀 中毒組早期無(wú)明顯癥狀，與對(duì)照組相比，15日齡體重差異不顯著(P>0.05)；30日齡時(shí)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，表現(xiàn)出生長(zhǎng)發(fā)育不良；60日齡以后，差異極顯著(P<0.01)，開(kāi)始出現(xiàn)精神萎靡，拉白色或黑色稀便等癥狀。重癥病例癱瘓麻痹，心跳疾速，最終衰竭死亡，死亡率達(dá)4%。對(duì)照組羽毛光亮，精神狀態(tài)良好，飲食正常。

2.1.2 病理變化 中毒組試驗(yàn)后期表現(xiàn)各器官發(fā)育不良，實(shí)質(zhì)性器官病變明顯。對(duì)照組器官形態(tài)無(wú)明顯異常變化。

2.2 硒中毒的診斷

表1 血液中硒含量的測(cè)定結(jié)果

根據(jù)中毒動(dòng)物臨床體重明顯降低，生長(zhǎng)發(fā)育嚴(yán)重遲緩，貧血；實(shí)質(zhì)性器官肝、腎、腦組織細(xì)胞變性壞死；飼料、血液、組織和羽毛中硒含量高于正常含量：結(jié)合流行病學(xué)和病史調(diào)查，即可建立鴨硒中毒的診斷。

2.3 硒中毒對(duì)甲狀腺代謝影響

表2 硒中毒對(duì)甲狀腺代謝影響的測(cè)定結(jié)果

從表2可見(jiàn)，中毒組與對(duì)照組相比，血清rT3、血清FT3、血清FT4、均有不同程度的降低，并且有明顯的時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。硒中毒動(dòng)物血清TSH早期降低，后期顯著升高。

3 討論

3.1 雛鴨硒中毒診斷的建立

本試驗(yàn)通過(guò)人工復(fù)制雛鴨硒中毒模型，收集硒中毒雛鴨的臨床表現(xiàn)、病理變化、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，從中篩選出雛鴨硒中毒診斷的可靠指標(biāo)。為生產(chǎn)實(shí)踐中診斷和防治雛鴨的硒中毒提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

3.2 硒中毒對(duì)甲狀腺代謝的影響

甲狀腺是動(dòng)物體內(nèi)重要的內(nèi)分泌腺，主要分泌甲狀腺激素。甲狀腺激素包括3，3′，5，5′—四碘甲腺原氨酸(T4)和3，3′，5—三碘甲腺原氨酸(T3)。甲狀腺激素對(duì)機(jī)體組織的分化、成熟、生長(zhǎng)發(fā)育以及物質(zhì)代謝等過(guò)程都具有極其重要的調(diào)節(jié)作用。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，中毒組與對(duì)照組相比，血清FT3、FT4均降低，并且有明顯的時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。分析其發(fā)生原因可能是過(guò)量硒進(jìn)入體內(nèi)，影響了脫碘酶的活性。脫碘酶家族包括I型脫碘酶(ID-I)、II型脫碘酶(ID-Ⅱ)、III型脫碘酶(ID-Ⅲ)3個(gè)成員。其共同調(diào)節(jié)甲狀腺激素代謝的動(dòng)態(tài)平衡。其中IDⅠ主要是使甲狀腺激素生理活性低的形式(T4)轉(zhuǎn)化為生理活性高的形式(T3)，其活性受硒水平的影響。硒耗竭時(shí)，其活性很低，當(dāng)硒含量為0.05mg/kg飼料時(shí)，活性已升至最高水平，而硒含量的進(jìn)一步升高，其活性不再升高。當(dāng)硒含量為5mg/kg飼料時(shí)，其活性明顯降低，這可能與硒中毒有關(guān)。脫碘酶活性降低，則由其調(diào)節(jié)的甲狀腺激素代謝失調(diào)，所以血清FT3、FT4降低；硒中毒動(dòng)物血清rT3降低，并且具有明顯的時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。從而說(shuō)明甲狀腺功能降低；硒中毒動(dòng)物血清TSH早期降低，后期顯著升高。分析其原因：試驗(yàn)早期血清TSH降低可能是因?yàn)槲卸緦?dǎo)致機(jī)體自由基代謝和抗氧化功能紊亂，進(jìn)而損傷腺垂體結(jié)構(gòu)和功能，造成TSH合成和分泌減少。試驗(yàn)后期血清TSH升高，這是因?yàn)檠錞3、T4含量降低反饋刺激TSH代償分泌增加的結(jié)果。

由以上討論可知，硒中毒通過(guò)脂質(zhì)過(guò)氧化作用損傷甲狀腺器官組織，影響脫碘酶的活性和TSH的分泌，致使甲狀腺激素的合成和分泌障礙，因此血清FT3、FT4、rT3、TSH含量發(fā)生改變。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)采取分組對(duì)比的方法，研究硒中毒對(duì)雛鴨甲狀腺的影響，結(jié)果表明：（1）通過(guò)臨床癥狀、病理變化和硒診斷，證明雛鴨硒中毒模型人工復(fù)制成功。（2）雛鴨甲狀腺rT3、FT3和FT4含量降低，TSH含量升高。

[1]齊順章編.動(dòng)物生物化學(xué)[M],北京:農(nóng)業(yè)出版社,2007,295-297.

[2]Arthur JR,Beckett GJ.Roles of selenium in type I iodothyroinne 5′-deiodinase and in thyroid hormone and iodinemetabolism.ln:Selenium in Biology and Human Health.New York:Springer-Verlag,2006.