王 康 欒元金 蔡玉梅 李寶全 石有斐 崔文平 馬文杰 郭慧君*（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 山東 泰安 271018 山東省龍口市東萊街道畜牧獸醫(yī)工作站）

狐貍是一種以生產(chǎn)毛皮為主的重要經(jīng)濟動物。隨著人們生活水平的提高，對毛皮產(chǎn)品需求也日益增加，現(xiàn)階段我國主要依靠人工飼養(yǎng)狐貍來提高毛皮的產(chǎn)量。2009年山東狐貍的人工飼養(yǎng)量達到656萬多只，生產(chǎn)狐皮540萬余張，狐貍的養(yǎng)殖加工愈來愈成為農(nóng)民增加收入、國家出口創(chuàng)匯的新濟增長點[1]。但有關(guān)狐貍毛皮發(fā)育的基礎(chǔ)研究還很薄弱，限制了對狐貍毛皮發(fā)育的調(diào)控技術(shù)開發(fā)以及深加工技術(shù)的開發(fā)。本研究主要對雄性狐貍不同部位的毛囊結(jié)構(gòu)進行觀察比較，為其加工利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 6只發(fā)育正常、健康的30月齡雄性北極(大理石霜)狐，體重在7.0～8.5kg，來源于泰安郊區(qū)范鎮(zhèn)個體養(yǎng)殖戶；采樣季節(jié)為當年6月中旬。.

1.2 方法（1）取樣：電擊處死動物，選取頸部、背部、前肢、后肢和尾部毛皮4cm×4cm大小區(qū)域。用生理鹽水打濕，用刀片將毛皮表面的毛發(fā)刮凈。采取各個部位的組織塊的大小以不超過0.5cm3為宜。按照參考文獻所提供的方法[2]分別制作連續(xù)縱切切切片和橫切切片。（2）固定：把毛皮組織樣品迅速投入10%中性福爾馬林溶液，室溫下固定至少24h。（3）脫水：固定后的組織塊在進行脫水前用流水沖洗18～24h，然后用梯度酒精依次處理。酒精濃度分別為：70%、80%、85%、90%、95%、100%。處理時間分別為：過夜、1、1、1、>1、>1h。（4）透明：分2次進行：第1次用二甲苯Ⅰ浸泡10min，第2次用二甲苯Ⅱ浸泡10min。（5）浸蠟：將透明好的毛皮組織塊浸入融化的石蠟內(nèi)，停留時間為30min。（6）包埋：將浸好蠟的組織放入盛有溶化石蠟的包埋柜里，使組織塊埋于石蠟中。（7）切片：將制成的組織塊用切片機按需要的厚度(皮膚組織一般為5～7μm，切成薄片)。（8）展片、貼片：切下的組織蠟片在相應(yīng)溫水進行展片；在展平的蠟片附近，取一清潔載玻片垂直插入水中，然后緩緩上提載玻片，蠟片會自動附在于載玻片上，將其置于38℃溫箱中烘干。（9）脫蠟：取已經(jīng)干燥的切片，放于盛有二甲苯I和二甲苯II的染缸內(nèi)依次脫蠟10min和5min。（10）染色：根據(jù)參考文獻所提供的方法[3]進行。自二甲苯中取出切片，放在格板內(nèi)，滴少量的樹膠于組織片中央，切片進行蘇木素-伊紅(HE)染色。（11）鏡檢與照相：利用不同放大倍數(shù)的顯微鏡進行比較觀察，并選擇性照相分析。

2 結(jié)果

2.1 不同部位毛囊縱截面組織切片比較 成年狐貍背部、腿部及尾部縱切切片經(jīng)HE染色后，顯示較清晰的毛囊輪廓(見圖1)。毛囊根部細胞核一般被染成藍紫色，其它組織呈現(xiàn)粉紅色至桃紅色。狐貍皮膚組織由表皮、真皮和皮下結(jié)締組織組成。表皮為復(fù)層上皮，結(jié)構(gòu)致密；真皮分為乳頭層和網(wǎng)狀層。典型的毛囊呈漏斗狀，末端膨大部分是毛球，毛球向內(nèi)彎曲，形成一勺狀結(jié)構(gòu)，毛根傾斜與皮膚表面呈銳角，毛根與毛根呈平行排列。初級毛囊毛球分布在真皮層的底部，直徑較大，發(fā)育較早。次級毛囊直徑較小且生長較淺，分布在真皮層的中部，毛囊深度變化較大。毛囊從內(nèi)到外分別為毛干、內(nèi)根鞘、外根鞘、結(jié)締組織鞘，初級毛囊的結(jié)締組織鞘和外根鞘較厚，結(jié)構(gòu)也很致密。初級毛囊和次級毛囊的毛干又由毛小皮、毛皮質(zhì)和髓質(zhì)組成。

圖2 狐貍不同部位皮下毛囊組織橫截面切片和染色處理結(jié)果(40×10,HE)

2.2 不同部位毛囊橫截面組織切片比較 對頸部、前腿上部、背部和后大腿部位進行皮下2mm處做連續(xù)切片，選取1～5張進行HE染色，顯微鏡觀察(見圖2)。顯示頸部和前腿部毛囊密實，背部和后腿部毛囊較稀疏；頸部皮下是以單毛囊單毛發(fā)或雙毛發(fā)為主的次級毛囊，在前腿部和背部是以單毛囊多毛發(fā)為主的初級毛囊，在后腿部則是初級毛囊和次級毛囊混合結(jié)構(gòu)。

3 討論

（1）狐貍是一種經(jīng)濟價值相對較高的毛皮用動物，其毛皮發(fā)育程度決定毛皮的質(zhì)量及其經(jīng)濟價值。由于我國對狐貍的科學(xué)研究相對較少，特別是毛皮形態(tài)發(fā)育方面，導(dǎo)致對毛皮發(fā)育調(diào)控和加工利用的技術(shù)開發(fā)方面缺乏科學(xué)依據(jù)。（2）本研究主要對成年雄性狐貍不同部位的毛皮組織采用常規(guī)切片技術(shù)和HE染色技術(shù)對毛囊結(jié)構(gòu)進行觀察。從形態(tài)結(jié)構(gòu)來看，狐貍被毛由針毛和絨毛組成，皮膚毛囊也分為初級毛囊和次級毛囊，構(gòu)成復(fù)合毛囊，這與王卓等和Paus等觀察到的水貂毛囊結(jié)構(gòu)基本一樣[4,5]。狐貍的初級毛囊和次級毛囊內(nèi)均有發(fā)達的髓質(zhì)，髓質(zhì)腔可見大小不一的靜止空氣層，這對狐貍毛皮的隔熱保溫起到很好的保障；毛囊的毛根部呈彎鉤狀，這有利于毛根牢固地固著在皮內(nèi)，不容易脫落；另外，比較發(fā)現(xiàn)初級毛囊的位置較次級毛囊更深些，這對針毛和絨毛不同生物學(xué)特性的形成可能具有重要的作用。（3）從橫切切片來看，狐貍頸部、前腿部毛囊致密，顯示更多的毛發(fā)數(shù)量，但在頸部主要是次級毛囊為主，也就是說主要是絨毛較多，而在前腿部主要是初級毛囊為主，主要是針毛較多。在背部皮下分布較多的是初級毛囊，每個毛囊內(nèi)含有3～5個次級毛囊，顯示背部以針毛為主，絨毛和針毛之間具有結(jié)構(gòu)上的從屬關(guān)系。在后腿部顯示初級毛囊與次級毛囊不同的結(jié)構(gòu)層次，意味著針毛與絨毛的比例在發(fā)生變化，這可能與6月中旬狐貍季節(jié)性換毛有很大關(guān)聯(lián)。（4）在生產(chǎn)中，狐貍的絨毛長短及其與針毛比例對毛皮的質(zhì)量、形狀及其價格影響較大。絨毛短齊、所占比例大、毛色光亮都會提高毛皮的質(zhì)量，這均與次級毛囊和初級毛囊的發(fā)育有很大關(guān)系[6]。基于初級毛囊和次級毛囊結(jié)構(gòu)的發(fā)育調(diào)控將是開發(fā)提高狐貍毛皮質(zhì)量技術(shù)的科學(xué)依據(jù)。

[1]楊景晁,曲緒仙,馬澤芳等.山東省毛皮動物養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀與對策[J].經(jīng)濟動物學(xué)報,2013,17(1):41-44.

[2]梁東,楊福合,邢秀梅等.利用冷凍切片法與石蠟切片法對水貂組織切片進行優(yōu)化研究[J].特產(chǎn)研究,2011(1):5-8.

[3]李紅芬,鄭肇巽,馬品耀等.HE染色原理和試劑配制及染色過程中的若干問題的探討[J].醫(yī)學(xué)信息(上旬刊),2011,24(4):1985-1986.

[4]王卓,李光玉,楊雅涵等.初生水貂皮膚毛囊發(fā)育組織學(xué)觀察[J].中國畜牧獸醫(yī),2014,41(8):201-205.

[5]PausR,CotsarelisG.Thebiologyofhairfollicles[J].TheNew EnglandJournalofMedicine,1999,341(7):491-497.

[6]高雅琴,王宏博,梁麗娜等.藍狐、水貂和獺兔的毛纖維顯微結(jié)構(gòu)觀察[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(31):15275-15277.