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糖尿病腎病動(dòng)物模型建立的體會(huì)

2015-05-30 09:38代招弟??
關(guān)鍵詞:糖尿病腎病動(dòng)物模型

代招弟??

【摘要】目的:建立糖尿病腎?。―N)大鼠模型。方法:取Wistar大鼠24只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(12只)和模型組(12只)。模型組采用單純腹腔注射1%鏈脲佐菌素(STZ)懸液,復(fù)制Wistar大鼠糖尿病腎病動(dòng)物模型。結(jié)果:?jiǎn)渭兏骨蛔⑸?%鏈脲佐菌素懸液4周可成功復(fù)制糖尿病腎病大鼠動(dòng)物模型。結(jié)論:采用單純腹腔注射鏈脲佐菌素方法復(fù)制糖尿病腎病大鼠模型,該方法具有簡(jiǎn)便、容易掌握,短期內(nèi)可誘導(dǎo)出大量滿意的動(dòng)物模型。

【關(guān)鍵詞】鏈脲佐菌素懸液;糖尿病腎?。粍?dòng)物模型

【中圖分類號(hào)】R5872【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517(2015)01-0113-02

1儀器與藥物

11儀器SPS401F 型電子天平(北京西杰公司);GT10-2 臺(tái)式高速離心機(jī)(北京時(shí)代北利儀離心機(jī)儀器有限公司);PRONTO-E全自動(dòng)生化分析儀(意大利奔騰);強(qiáng)生血糖儀(美國(guó)強(qiáng)生公司);強(qiáng)生血糖試紙(美國(guó)強(qiáng)生公司);HY-612 半自動(dòng)尿液化學(xué)分析儀(深圳市匯研科創(chuàng)生物科技有限公司);HMIAS-2000彩色病理圖文分析系統(tǒng)(北京杰偉世視音頻設(shè)備有限公司);KD-BM生物組織包埋機(jī)(浙江省華市科迪儀器設(shè)備有限公司);KD-3358電腦超薄切片機(jī)(浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司)。

12試劑鏈脲佐菌素(streptozotocin C8H15N3O7,美國(guó)Sigma公司) ;檸檬酸(北京東方博愛生物科技有限公司);檸檬酸鈉(北京東方博愛生物科技有限公司);肌酐(批號(hào):A70333,上海撫生生物科技有限公司);尿素試劑盒(批號(hào):A64247,上海撫生生物科技有限公司);其余試劑均為分析純。

13STZ懸液的配制檸檬酸緩沖液母液的配法:檸檬酸19214g加入二蒸水100ml配成A液,檸檬酸鈉29410g加入二蒸水100ml配成B液。1%鏈脲佐菌素緩沖液的配制:將A、B液按比例(1∶132)均勻混合,其pH值為419~422,將此緩沖液配成1%鏈尿佐菌素懸液。

14試驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠,由吉林大學(xué)白求恩基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,衛(wèi)生許可生產(chǎn)號(hào):SCXK-(吉)2007-0003。

2方法

21造模方法及分組[1-2]選雄性Wistar大鼠24只,體重250~280g,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(12只)和模型組(12只)。將模型組禁食12h后,用01mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液將鏈脲佐菌素配成1%的懸液,按56mg/kg體重單次腹腔注射1%鏈脲佐菌素懸液復(fù)制糖尿病腎病模型。腹腔注射66h后開始禁食,不禁水,由尾靜脈取血測(cè)定血糖,血糖≥168mmol/L者,為糖尿病造模型成功。

22觀察與檢測(cè)指標(biāo)觀察情況:每天觀察大鼠的一般精神狀態(tài)、毛色、進(jìn)食、飲水及尿量等,模型建立成功后,每?jī)芍軠y(cè)定一次大鼠的體重,并加以記錄??崭寡牵耗P徒⒊晒螅謩e在第二、第四周末斷尾取血,采用血糖儀測(cè)定一次血糖。尿糖:模型建立成功后,分別在第二、第四周末,將大鼠放入洗凈的代謝籠內(nèi),收集尿液,用自動(dòng)尿液分析儀測(cè)定。第四周末(腹主動(dòng)脈血)采用生化分析儀檢測(cè)。

23統(tǒng)計(jì)方法采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x[TX-*3]±s)表示,采用t檢驗(yàn),P<005表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4討論

慢性腎功能衰竭(CRF)是嚴(yán)重危害人類健康的多發(fā)病之一,其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì),是世界性難題之一[2]?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有很多糖尿病腎病動(dòng)物模型的方法,如手術(shù)切除胰腺法、藥物破壞胰島素β細(xì)胞法及藥物與手術(shù)(5/6腎臟切除)聯(lián)合制作法等,其中筆者選用單次大量腹腔注射1%鏈脲佐菌素緩沖液誘導(dǎo)速發(fā)型糖尿病模型[2]。本次試驗(yàn)結(jié)果證明,單純腹腔注射鏈脲佐菌素溶液后4周時(shí)可成功的造成糖尿病腎病大鼠模型。該方法簡(jiǎn)便、容易掌握,短期內(nèi)可誘導(dǎo)出大量滿意的動(dòng)物模型。

參考文獻(xiàn)

[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì).2007年版中國(guó)2型糖尿病防治指南[J].中華流行病學(xué)雜志,2008,24(2):22-23.

[2] 王春艷.鏈脲佐菌素誘導(dǎo)大鼠2型糖尿病模型的建立[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào),2010,2(1):22.

(收稿日期:20140922)

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