喻 芳 任靜妮 龔肖清 張倍銘 朱 江 黃湘婷 王 馨 梁睿熙 辛麗梅

貴州省人口和計劃生育科學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)所（貴陽，550004）

親子鑒定主要是通過對遺傳基因的檢測，根據(jù)孟德爾遺傳規(guī)律判定被檢者之間是否存在生物學(xué)親生關(guān)系。短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）的應(yīng)用極大地提高了親子鑒定能力［1］，已成為親子鑒定的主要手段［2］，但與傳統(tǒng)的遺傳標(biāo)記（如紅細(xì)胞血型、酶型和血清蛋白型等）相比，STR基因座突變率較高［2－3］，遺傳突變使親子之間的遺傳關(guān)系不符合遺傳規(guī)律；當(dāng)爭議父（母）與真父（母）有血緣關(guān)系時，爭議父（母）與孩子之間（如祖孫、叔侄、姨甥等）就會有同源基因，而且血緣越近，有同源基因的STR基因座就會越多。這種情況下就會給親子鑒定尤其是單親案件的分析鑒定帶來困難?，F(xiàn)就本單位受理的兩例典型案例作一淺析。

1 資料背景

1.1 資料

2例親子鑒定案例均系紀(jì)檢部門委托，案例1要求鑒定爭議父1和爭議父2與孩子的親生血緣關(guān)系，爭議父1和爭議父2是親兄弟；案例2要求鑒定父母與孩子親生血緣關(guān)系，有領(lǐng)養(yǎng)其親戚小孩的背景。

1.2 方 法

應(yīng)用無錫中德美聯(lián)公司 AGCU EX－22、21＋1加上性別基因共40個STR基因座，用Genomappe軟件將等位基因標(biāo)準(zhǔn)Ladder中的片段與樣本進(jìn)行比較，確定樣本的基因分型。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)《親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范》（SF／Z JD0105001－2010），3個以上基因座不符合遺傳規(guī)律可排除親權(quán)關(guān)系，若基因座符合遺傳規(guī)律，計算親權(quán)指數(shù)PI，累計親權(quán)指數(shù)CPI≥10000支持親權(quán)關(guān)系存在；“二聯(lián)體親權(quán)指數(shù)計算標(biāo)準(zhǔn)”、“二聯(lián)體中存在不符合遺傳規(guī)律的遺傳標(biāo)記時親權(quán)指數(shù)計算標(biāo)準(zhǔn)”參照《親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范》和單親案鑒定的判斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。

2 結(jié)果

2.1 案 例1

STR基因座分型見表1。從表1檢測結(jié)果分析，AGCU EX22STR復(fù)合擴(kuò)增體系結(jié)果顯示爭議父1排除2個位點，不能下排除結(jié)論；爭議父2在vWA基因座不符合遺傳規(guī)律，通常會考慮發(fā)生突變，按突變基因座計算 PI值，CPI 3.2146E＋04＞10000，可下認(rèn)定親權(quán)關(guān)系。但因考慮到爭議父1、父2是親兄弟關(guān)系，僅做AGCU EX22STR復(fù)合擴(kuò)增體系下結(jié)論有風(fēng)險，我們加做AGCU 21＋1體系，40個STR基因座分型結(jié)果顯示爭議父1排除3個位點以上，可排除爭議父1；爭議父2僅一個位點不符合，按突變基因座計算PI值，累計親權(quán)指數(shù) ＞10000，不排除親生關(guān)系，支持親權(quán)關(guān)系存在。

2.2 案 例2

STR基因座分型見表2。從表2檢測結(jié)果分析，爭議父很明顯排除親緣關(guān)系，爭議母在AGCU EX22體系中只排除2個位點，不能下排除結(jié)論。慮到爭議母和孩子親生母親有可能具有血緣關(guān)系，我們加做AGCU21＋1后排除位點達(dá)3個以上，可下排除結(jié)論。

表1 爭議父1、父2和孩子40個STR基因座分型結(jié)果

表2 爭議父、母和孩子40個STR基因座分型結(jié)果

3 討論

在單親親子鑒定時，由于父子（或母子）組合缺少母親（或父親）的遺傳信息，勢必在排除信息親權(quán)指數(shù) （似然率）和RCP值等方面都要低于父、母、子組合的親子鑒定，影響到親子鑒定的準(zhǔn)確性。而且，在實踐中經(jīng)常會遇到是爭議父（或母）和孩子親生父（或母）具有較近的血緣關(guān)系，若不注意咨詢委托方或當(dāng)事人，很可能將面臨的是具有血緣關(guān)系且是單親的親子鑒定，如果再遇上有突變位點，將面臨較大風(fēng)險。

STR基因座具有高度多態(tài)性，有很高的非父排除率，同時STR的突變率也很高，使本來是親生的父子之間也會出現(xiàn)不符合遺傳規(guī)律的現(xiàn)象（即出現(xiàn)矛盾基因座），使得解釋實驗結(jié)果變得困難。在實施親子鑒定時發(fā)現(xiàn)矛盾基因座現(xiàn)象時，需要設(shè)法確定是突變造成的，還是被檢查者之間本來就不存在親生關(guān)系（特別是具有血緣關(guān)系單親案件），也是用STR進(jìn)行親子關(guān)系鑒定可能潛在錯誤的原因之一。如果所檢驗的男子（或者女子）與孩子的真父（母）可能有親緣關(guān)系時，會減少矛盾基因座的數(shù)量。有血緣關(guān)系時，爭議父（母）與孩子之間（如祖孫、叔侄、姨甥等）就會有同源基因，而且血緣越近有同源基因的STR基因座就會越多。本文案例1爭議父1和爭議父2在AGCU EX22STR復(fù)合擴(kuò)增體系有20個同源基因，因此，鑒定時要充分考慮到血緣關(guān)系的影響再下結(jié)論。

STR產(chǎn)生突變的機(jī)制是復(fù)制時的模板滑動。突變時產(chǎn)生1個重復(fù)單位的變化占突變總數(shù)的90%以上［6］。如果在矛盾基因座上爭議父所能提供的等位基因和孩子的生父基因之間相差超過1個重復(fù)單位，更傾向于排除他們之間有親生關(guān)系。父系突變高于母系突變（相差約6倍），在母子親權(quán)鑒定時應(yīng)該應(yīng)用不同的策略。

因此，在受理親子鑒定司法案件時，盡量要求提供父、母樣本。單親親子鑒定應(yīng)檢驗更多的STR基因座，若遇到有STR突變不要輕易下排除，有血緣關(guān)系時不要輕易下肯定。單親案在無法否定爭議父或爭議母是真父或真母的近親屬時，即使沒有發(fā)現(xiàn)矛盾基因座，也只作出“不排除親生關(guān)系”的結(jié)論。單親案鑒定起碼要檢測18個STR基因座以上，若發(fā)現(xiàn)矛盾基因座，要增加檢測至≥40個。按公式計算PI值＞10 000后，才可以做出“不排除親生關(guān)系”或“支持存在親生關(guān)系”的結(jié)論；若發(fā)現(xiàn)3個以上矛盾基因座，則應(yīng)作出否定“親生關(guān)系”的結(jié)論［4］。目前法醫(yī)學(xué)廣泛使用的 Powerplex、IdentifilerTM、SinofilerTM、DNATyper TM15Plus、ACGU EX22、基點20A復(fù)合擴(kuò)增體系均具有較高的個體識別率和非父排除率，通常檢測這些試劑盒的STR基因座已能基本滿足法醫(yī)物證中個體識別和親子鑒定的檢測要求，但在單親鑒定出現(xiàn)了突變、有血緣關(guān)系可能的案件中，我們的經(jīng)驗通常若只單做一個STR試劑盒或加做以上常用STR試劑盒很難下結(jié)論，因為他們都有13個CODIS基因座重復(fù)，加做ACGU 21＋1擴(kuò)增體系，往往可提高系統(tǒng)效能，滿足鑒定需求［7］。

［1］ Collete D，Sabine F，ceclle F，et al.A comprehensive genetic map of the human genome based on 5264microsatellites［J］.Nature，1996，380（14）：152－154.

［2］ America Association of Blood Banks.Annual report summary for testing in 2002 ［DB／OL］.http：／／www.aabb.org／about＿the＿AABB／stds＿and＿Accred／ptannrpt02.pdf.2003－11－01.

［3］ Brinkman B，klintschar M，Neuhuber F，et al.Mutation rate in human microsatellites：influence of the structureand length of the tandem repeat［J］.Am J Hum Genet，1998，62（6）：1408－1415.

［4］ 伍新堯，童大躍，朱運(yùn)良，等.用STR分型技術(shù)作親權(quán)鑒定時判斷標(biāo)準(zhǔn)的研究 ［J］.中山大學(xué)學(xué)報，2010，31（1）：1－6.

［5］ 侯一平，吳瑾，顏靜，等.考慮突變影響的親子鑒定父權(quán)指數(shù)計算［J］.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2008，25（2）：176－178.

［6］ 朱運(yùn)良，黃艷梅，伍新堯，等.單親案親權(quán)鑒定結(jié)果判定策略［J］.法醫(yī)學(xué)雜志，2006，22（4）：281－284.

［7］ 邵偉波，張素華，李莉，等.21個非CODIS STR基因座的遺傳多態(tài)性 ［J］.法醫(yī)學(xué)雜志，2011，27（1）：36－38.