魏金鳳,許艷東,曹鵬然,劉 宇,喬笑笑,羅予婉,康文藝*

(1.河南大學(xué)中藥研究所,河南開封475004;2.河南大學(xué)民生學(xué)院,河南開封475004)

HS-SPME-GC/MS法分析石刁柏果皮及種子中揮發(fā)性成分

魏金鳳1,2,許艷東1,曹鵬然1,劉 宇1,喬笑笑1,羅予婉1,康文藝1*

(1.河南大學(xué)中藥研究所,河南開封475004;2.河南大學(xué)民生學(xué)院,河南開封475004)

目的分析石刁柏果皮與種子的揮發(fā)性成分。方法采用頂空固相微萃取和氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HS-SPMEGC/MS),結(jié)合保留指數(shù)法并用峰面積歸一化法測定相對百分含量。結(jié)果從石刁柏果皮揮發(fā)油中鑒定出1個揮發(fā)性成分,占總峰面積的74.47%。石刁柏種子揮發(fā)油中鑒定出2個揮發(fā)性成分,占總峰面積的29.42%。結(jié)論石刁柏果皮的主要揮發(fā)性成分是十二酸乙酯(74.47%),種子的主要揮發(fā)性成分為十二酸乙酯(11.49%)和十六酸乙酯(17.93%)。

石刁柏;揮發(fā)性成分;固相微萃取;氣質(zhì)聯(lián)用

石刁柏(Asparagus officinalis L.),為百合科天門冬屬植物,我國新疆北部地區(qū)有野生,其他地區(qū)多為栽培,其嫩莖又稱蘆筍、龍須菜、露筍等[1]。入藥部位以干燥嫩莖為主,具有清熱利濕、活血散結(jié)功效,用于治療肝炎、銀屑病、高血脂癥、乳腺增生等癥,另對淋巴肉瘤、膀胱癌、乳腺癌、皮膚癌等也有一定療效[2]。亦有記載,石刁柏塊根入藥稱為小百部,具有潤肺鎮(zhèn)咳、祛痰殺蟲功效,外用治療皮膚疥癬等[3]。目前,石刁柏的研究主要以化學(xué)成分、藥理作用及產(chǎn)品加工為主,從其嫩莖中分離得到的化合物主要為黃酮類[4-5]、甾體皂苷[6-7]、氨基酸[8]、酚類[9]及多糖[10]等,具有抗癌[11]、提高機(jī)體免疫力[12-13]、降血脂[14]、抗衰老[15]、保肝[16-17]及殺菌鎮(zhèn)痛[18]等藥理作用。文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn),未見有對石刁柏?fù)]發(fā)性成分研究的報道。我們采用頂空固相微萃取和氣質(zhì)聯(lián)用的方法首次對石刁柏果皮及種子的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析,以期為其化學(xué)成分和藥理活性的深入研究提供基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

美國安捷倫公司GC 6890 N GC/5975 MS氣相色譜―質(zhì)譜聯(lián)用儀;美國Supelco公司手動固相微萃取(SPME)裝置;萃取頭為100μm聚二甲基硅氧烷(PDMS-DVB);C6-C26正構(gòu)烷烴(Alfa Aesar)。

石刁柏種子及果皮于2014年10月采集于河南省鶴壁市,經(jīng)河南大學(xué)中藥研究所李昌勤教授鑒定為石刁柏(Asparagus officinalis L.)的種子及果皮,標(biāo)本存于河南大學(xué)中藥研究所。

2 實(shí)驗方法

使用前先將SPME的萃取纖維頭在氣相色譜的進(jìn)樣口老化10 min,老化溫度為250℃,載氣體積流量為1.0 m L/min。取石刁柏果皮或種子0.7 g,置于5 m L進(jìn)樣瓶中,插入100μm PDMS-DVB萃取纖維頭,于50℃下頂空取樣30 min后,取出后立即插入色譜儀進(jìn)樣口(溫度250℃)脫附1 min。

3 GC/MS分析條件

氣相色譜條件HP-5 MS石英彈性毛細(xì)管柱(0.10μm×30.0 m×250μm),載氣為高純氦氣(99.999%),流速1.0 m L/min,進(jìn)樣口溫度250℃;色譜柱初始溫度50℃(保持2.0 min),以4℃/min升溫至120℃(保持2 min),最后以6℃/min升溫至230℃(保持10 min)。分流進(jìn)樣,分離比為10∶1。

質(zhì)譜條件電離方式:EI源,電離能量80 eV;離子源溫度為230℃;四極桿溫度150℃;傳輸線溫度為280℃;電子倍增器電壓1 494 V。質(zhì)量掃描范圍m/z 30～400,譜圖檢索:采用RTLPEST3.L和NIST05.L進(jìn)行檢索。

4 保留指數(shù)測定

按照文獻(xiàn)[19],將色譜正構(gòu)烷烴樣品(C6-C26)各取等量混合后,按上述GC-MS條件進(jìn)行色譜分析,測定各正構(gòu)烷烴的保留時間,再在完全相同的條件下,對樣品進(jìn)行分析,測定各組分的保留時間計算出各組分的Kovats保留指數(shù)。

5 實(shí)驗結(jié)果

用HS-SPME-GC/MS技術(shù),從石刁柏果皮揮發(fā)油中分離出3個組分,鑒定出1個揮發(fā)性成分,占總峰面積的74.47%。從石刁柏種子揮發(fā)油中分離出7個組分,鑒定出2個揮發(fā)性成分,占總峰面積的29.42%。具體結(jié)果見表1、圖1與圖2。

表1 石刁柏果皮及種子中揮發(fā)性成分及相對百分含量

圖1 石刁柏果皮揮發(fā)性成分總離子流圖

圖2 石刁種子揮發(fā)性成分總離子流圖

6 討論

從表1可以看出,石刁柏果皮中揮發(fā)性成分為十二酸乙酯(74.47%),種子中主要揮發(fā)性成分是十二酸乙酯(11.49%)和十六酸乙酯(17.93%)。結(jié)果表明,石刁柏果皮和種子中揮發(fā)性成分的種類較少,但含量均較高,且二者均含有十二酸乙酯。成分中,十二酸乙酯具有溫和的水果香味,是GB28321-2012規(guī)定中允許使用的食用香精;孫若等研究表明,十二酸乙酯對東亞飛蝗4齡蝗蝻拒食作用較高,可用于防治蝗蟲[20]。十六酸乙酯具有抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖活性[21]。以上揮發(fā)性成分的研究可為石刁柏化學(xué)成分和藥理活性等的深入研究提供依據(jù)。

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[責(zé)任編輯 李武營]

Analysis of volatile constituents from peel and seeds of Asparagus officinalis by HS-SPME-GC/MS

WEI Jinfeng1，2，XU Yandong1，CAO Pengran1，LIU Yu1，QIAO Xiaoxiao1，LUO Yuwan1，KANG Wenyi1*
（1.Institute of Chinese MɑteriɑMedicɑ，Henɑn University，Kɑifeng，Henɑn 475004，Chinɑ；2.Minsheng College，Henɑn University，Kɑifeng，Henɑn 475004，Chinɑ）

ObjectiveTo assay the volatile constituents of A.officinalis.MethodsThe volatiles were analyzed by head-space solid micro-extraction，coupled with GC/MS and Kovats.ResultsThere is 1 kind of volatile constituents in peel of A.officinalis，and2 different kinds of volatile constituents in seeds.The content of the identified compounds extracted from peel and seeds were 74.47%and 29.42%.ConclusionThe major volatile constituents of seedswere ethyl dodecanoate（11.49%）and ethyl hexadecanoate（17.93%）.The volatile constituent of peel was ethyl dodecanoate（74.47%）.

Asparagus officinalis；volatile constituents；SPME；GC/MS

TQ460.7

A

1672―7606(2015)04―0244―03

2015-09-28

河南大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(15NB075);河南省科技廳基礎(chǔ)前沿計劃(132300410255);河南省科技廳基礎(chǔ)前沿計劃(142300410123);河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計劃項目(教高[2012]704號)

魏金鳳(1975―),女,河南開封人,博士,副教授,從事藥用植物栽培及活性成分研究工作。

*通信作者,康文藝(1971―),男,黑龍江尚志人,博士,教授,從事天然藥物化學(xué)研究工作。