董春玲

（秦皇島市海港區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河北秦皇島066000）

羊在整個生長發(fā)育過程中都不斷受到寄生蟲病的侵襲。寄生蟲不僅消耗羊的營養(yǎng)，降低羊?qū)︼暳系睦?，提高養(yǎng)殖成本，降低飼料報酬等，引起的經(jīng)濟損失是其他任何疾病不能相比的，而且還會降低其產(chǎn)品的品質(zhì)，影響羊的體質(zhì)為其他的疾病打開門戶，嚴重時甚至引起羊只死亡，給養(yǎng)殖戶造成重大的經(jīng)濟損失，極大的制約了養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展和農(nóng)戶養(yǎng)羊的積極性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物

海港區(qū)某羊場波爾山羊100只。

1.1.2 試驗儀器

載玻片、蓋玻片、小木棒、燒杯、銅篩或多層紗布、膠頭滴管、顯微鏡、鐵絲環(huán)、網(wǎng)兜、蟲卵計數(shù)器、培養(yǎng)皿、測微器、300毫升容量瓶、離心機、離心管、塑料袋。

1.1.3 試劑

50%甘油水、飽和硫酸鋅溶液（100毫升水中加入硫酸鋅33克）、飽和食鹽水（100毫升沸水中加入38克食鹽，使其溶解，以紗布過濾冷卻后，如有結(jié)晶析出即成飽和溶液）、盧戈氏碘液、明礬蘇木素（有甲乙二液合成：甲液以蘇木素1.0克，無水乙醇12毫升配成；乙液以明礬1.0溶于240毫升蒸餾水內(nèi)，使用前以甲液2～3滴加入乙液數(shù)毫升中即可）、石炭酸復(fù)紅染色液（堿性復(fù)紅4克、95%酒精20毫升、苯酚8毫升、蒸餾水100毫升）、甲醛、木炭末、1.6%氫氧化鈉溶液。

1.2 方法

1.2.1 糞便檢查法

1.2.1.1 糞便的采集

清晨采集新鮮羊糞便，1份/羊，放于塑料袋中，編號后帶回實驗室檢查。

1.2.1.2 直接涂片法

首先在載玻片上加50%甘油水數(shù)滴，再以小木棒取新鮮糞便少許，與玻片上的甘油水混合均勻，去掉大塊粉渣，將糞便涂成薄膜，其厚度以能透視書報上的字跡為度，然后加蓋玻片，置顯微鏡下檢查，檢查時應(yīng)順序地查遍蓋玻片下所有部分。檢查中發(fā)現(xiàn)有蟲卵數(shù)量不多的，因此每份糞樣作了3～5片進行檢查。

1.2.1.3 漂浮法

利用比重大于蟲卵的飽和硫酸鋅溶液與糞混勻，銅篩過濾，用吸管吸取濾液于兩個離心管中，平衡后離心，1500轉(zhuǎn)/分鐘，離心5分鐘。然后用鐵絲環(huán)沾取上層液面鏡檢。

1.2.1.4 沉淀法

利用蟲卵比重大于水的特性，取10克糞便置于燒杯中，先加少量水，充分攪拌將糞搗成糊狀，再加常水適量繼續(xù)攪拌，通過糞篩濾到另一容器內(nèi)然后加滿常水，靜置15分鐘，再傾去上清液。如此反復(fù)用水洗沉淀數(shù)次，直到上層液體透明為止。最后傾去上清液，用膠頭滴管吸取沉淀于載玻片上，加蓋玻片鏡檢。檢出比重較大的肝片吸蟲卵。

1.2.1.5 蟲卵計數(shù)法一

麥克馬斯特氏法，此法先要用載玻片和一個蓋玻片做成蟲卵計數(shù)器，即在蓋玻片上刻長寬各1厘米的方格，再在大方格內(nèi)刻100個小方格，載玻片與蓋玻片間填上1.5毫米厚的玻條，并以粘合劑粘合。計數(shù)時取糞便2克置研缽中，先加入10毫升水，攪勻，再加飽和食鹽水50毫升，混勻后立即吸取糞液充滿計數(shù)室，靜置2分鐘，鏡檢記錄計數(shù)室的蟲卵數(shù)。蟲卵數(shù)乘以200即為每克糞便中蟲卵數(shù)。該法適用于線蟲。

1.2.1.6 蟲卵計數(shù)法二

片形吸蟲蟲卵計數(shù)法，稱取羊糞10克，置于300毫升的容量瓶中。加入少量1.6%氫氧化鈉溶液，靜置過夜，次日，將糞塊攪碎，再加入1.6%氫氧化鈉至300毫升刻度處。再搖勻，立即吸取7.5毫升糞液注入到離心管內(nèi)，在離心機內(nèi)以每分鐘1000轉(zhuǎn)離心2分鐘，傾去上層液體，換加飽和鹽水，再次離心后，再傾去上層液體，再換加飽和鹽水，如此反復(fù)操作，直到上層液體完全清澈為止。傾去上層液體，即將沉渣全部分別滴于數(shù)張載玻片上，檢查全部的載玻片上的蟲卵并計數(shù)，以總數(shù)乘以4，即為每克糞便中的肝片吸蟲蟲卵數(shù)。

1.2.2 血液檢查法

1.2.2.1 血液的采集

采集頸靜脈血液，1份/羊，放于裝有抗凝劑的試管中，編號后帶回實驗室檢查。

1.2.2.2 血液中蠕蟲檢查

取新鮮血液一滴于玻片上，覆以蓋片在低倍鏡下檢查。血中幼蟲較多時可做推片經(jīng)明礬蘇木素染色后檢查。血中幼蟲較少可采一大滴，在載玻片上略加涂布，待其自然干燥，使結(jié)成一層厚血膜，而后將此玻片反轉(zhuǎn)，血膜面向下，斜浸入一小杯蒸餾水中，待其完全溶血，取出晾干，在浸入甲醛中固定10分鐘，晾干后以明礬蘇木素染色，待白細胞的核染成深紫色，取出以蒸餾水沖洗2分鐘，顯微鏡下檢查。血中幼蟲很少時，可采血于離心機中，加入5%醋酸溶液以溶血，待溶血完成后離心，取沉淀渣檢查。

1.2.2.3 血液內(nèi)原蟲的檢查-鮮血壓滴標本檢查

將采出的血液滴于載玻片上，加等量生理鹽水，混合均勻后，加蓋片，立即放低倍顯微鏡下檢查。用于伊氏錐蟲和附紅細胞體的檢查。

1.2.2.4 血液內(nèi)原蟲的檢查-涂片染色標本檢查

采血，滴于載玻片一端，按常規(guī)推制成血片，并使其晾干。滴甲醛2滴于血膜上，使其固定，染色（姬氏染色法取姬氏染色粉0.5克，中性純甘油25.0毫升，無水中性甲醛25.0毫升。先將姬氏染色粉置研缽中，加少量甘油充分研磨，再加再磨，直到甘油全部加完為止。將其倒入100毫升容量的棕色小口試劑瓶中；在研缽中加少量的甲醛以沖洗甘油染液，沖洗液仍傾入上述瓶中，再加再洗再傾入，直至25毫升甲醛全部用完為止。塞緊瓶口，充分搖勻，而后將瓶置于65℃溫箱中24小時，并不斷搖動，此即為原液。染色時將原液2.0毫升加到中性蒸餾水100毫升中，即為染液。染液加與血膜上染色30分鐘后，用水洗5分鐘，晾干，鏡檢。）用油鏡檢查。用于泰勒蟲等多種寄生蟲的檢查。

2 結(jié)果與分析

2.1 糞便檢查

2.1.1 直接涂片法

在顯微鏡下發(fā)現(xiàn)蟲卵種類有消化道圓線蟲卵，鞭蟲卵，感染率分別為82%、18%。

2.1.2 漂浮法

在顯微鏡下發(fā)現(xiàn)蟲卵種類有消化道圓線蟲卵，鞭蟲卵。感染率分別為100%、38%。

消化道圓線蟲卵：顯微鏡下觀察三種圓線蟲卵兩端都無“塞”且在蟲卵內(nèi)都未形成幼蟲，蟲卵長度大于60微米小于85微米的是捻轉(zhuǎn)胃蟲卵，蟲卵長度大于90微米且有16～32卵胚細胞，其中略大的是馬歇爾線蟲蟲卵，而略小的是奧斯特線蟲卵。

鞭蟲卵：顯微鏡下觀察蟲卵呈紡錘形黃褐色，大小為50～54×22～23微米，卵殼厚，蟲卵兩端各有一個“塞”，即為鞭蟲卵。

2.1.3 沉淀法

在顯微鏡下發(fā)現(xiàn)蟲卵種類有消化道圓線蟲卵，鞭蟲卵，肝片吸蟲卵。感染率分別為100%、38%、25%。

肝片吸蟲卵：長橢圓形,大小為130～150微米×63～90微米，黃褐色，有小蓋，卵內(nèi)充滿卵黃細胞，卵細胞不易看清。

2.1.4 蟲卵計數(shù)法（一）-麥克馬斯特氏法

在每克糞便中查到有10052個消化道圓線蟲卵，感染程度是重度感染。

2.1.5 蟲卵計數(shù)法（二）-片形吸蟲蟲卵計數(shù)法

在每克糞便中查到有386個肝片吸蟲卵，感染程度是輕度感染。

2.2 血液檢查

2.2.1 血液中蠕蟲檢查

在血液中沒有查到蠕蟲感染。

2.2.2 鮮血壓滴標本檢查

沒有查到伊氏錐蟲、查到附紅細胞體感染。

2.2.3 血液內(nèi)原蟲的檢查-涂片染色標本檢查

僅查到有泰勒蟲感染，感染率為35%。

以上各種方法的檢查，結(jié)果匯總見下表。

抽檢一百只波爾山羊的寄生蟲感染情況

3 討論

本次調(diào)查中證明了該羊場中的波爾山羊體內(nèi)寄生蟲主要為圓線蟲，其次為肝片吸蟲和鞭蟲，其中圓線蟲在每克糞便中查到10052個圓線蟲卵，屬于重度感染，應(yīng)該給予驅(qū)蟲，但并沒有引起發(fā)病，造成羊的死亡，因此還沒有造成宏觀上的經(jīng)濟損失，但由于寄生蟲病是一種慢性、消耗性的疾病，不會在短時間內(nèi)造成大面積的發(fā)病、死亡，只是在消耗體內(nèi)營養(yǎng)，尤其是影響生長發(fā)育、生長緩慢、消瘦、抵抗力下降、降低飼料報酬,造成重大的微觀上的經(jīng)濟損失，也是對牧場的羊造成損失比較嚴重的一個根源。

3.1 在各種檢查方法中，各自的優(yōu)點

3.1.1 在糞便檢查法中，直接涂片法的優(yōu)點就是操作簡單、迅速，在短時間內(nèi)就可以出現(xiàn)結(jié)果，缺點是結(jié)果不完全且檢出率低，通過此法檢查到的蟲卵有消化道圓線蟲卵和鞭蟲卵，感染率分別是82%、18%。

3.1.2 沉淀法的優(yōu)點是檢查出來的結(jié)果檢出率高，缺點是操作復(fù)雜，需要很長的時間，通過此法檢查到的蟲卵有消化道圓線蟲卵，鞭蟲卵，肝片吸蟲卵。感染率分別為100%、38%、25%。

3.1.3 漂浮法只能檢查出比重小于所使用的漂浮液，該法的優(yōu)缺點介于直接涂片法和沉淀法兩者之間，要比直接涂片法檢出率高，但又沒有沉淀法檢出的結(jié)果完全，通過此法檢查到的蟲卵有消化道圓線蟲卵，鞭蟲卵。感染率分別為100%、38%。

3.1.4 蟲卵計數(shù)法一-麥克馬斯特氏法可粗略的推斷動物寄生蟲感染程度，但有局限性，僅適用于線蟲卵的計數(shù)。

3.1.5 蟲卵計數(shù)法二-片形吸蟲蟲卵計數(shù)法用于比重較大的片形吸蟲卵，操作時間相對于麥克馬斯特氏法要稍長。

3.1.6 血液檢查法中，血液中蠕蟲檢查要根據(jù)幼蟲的多少運用不同的方法，首先要考慮幼蟲較多，其次在考慮較少，最后考慮很少。

3.1.7 血液內(nèi)原蟲的檢查-鮮血壓滴標本檢查操作簡單，節(jié)省時間，但檢查出的結(jié)果僅限于伊氏錐蟲和附紅體細胞，具有局限性。

3.1.8 血液內(nèi)原蟲的檢查-涂片染色標本檢查，此法中使用的試劑材料較多，時間要長，但檢查出來的結(jié)果完善。

通過此次調(diào)查，大致總結(jié)出該地區(qū)秋季羊體肥大，糞中蟲卵占優(yōu)勢，這預(yù)示著羊體內(nèi)的幼蟲變成成蟲的數(shù)量在陸續(xù)增加。主要危害較大的消化道寄生蟲：圓線蟲和附紅細胞體還在威脅著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展，仍然未得到有效的控制。

寄生蟲病的傳播和流行，必須具備傳染來源、傳播途徑和易感動物三個基本環(huán)節(jié)，切斷或控制其中任一個環(huán)節(jié)，就可以有效地防制某種寄生蟲病的發(fā)生與流行。此外，寄生蟲病的傳播和流行，還受到自然因素和社會因素的影響和制約。

3.2 加強寄生蟲病防治工作

3.2.1 制訂寄生蟲病防治的長期規(guī)劃

根據(jù)本次調(diào)查的結(jié)果和不同寄生蟲病的流行程度及其分布特點，應(yīng)對該地區(qū)制訂重點寄生蟲病防治的長期規(guī)劃，將把對其前后盤吸蟲、華支睪吸蟲防治作為重點領(lǐng)域，把對人類健康危害較大的肝吸蟲病作為重點防治的寄生蟲病，從而保證該地區(qū)寄生蟲病防治工作有計劃、有重點地開展。

3.2.2 大力開展寄生蟲病防治知識的宣傳

寄生蟲病的傳播和流行與人們的行為密切相關(guān)。有必要通過各種宣傳途徑和方式，引導(dǎo)和教育群眾逐步改變不利于健康的生產(chǎn)、生活習(xí)慣和飲食、衛(wèi)生習(xí)慣，特別要加強對中小學(xué)生、婦女和農(nóng)牧民群眾的宣傳教育工作，提高群眾的防病意識和自我保護能力，減輕寄生蟲病的危害。

3.2.3 逐步加大該地區(qū)寄生蟲病防治力度

針對對人類危害較大的，感染率較高的多種寄生蟲病的現(xiàn)狀，采取有效的干預(yù)措施，把寄生蟲病防治工作與農(nóng)業(yè)、農(nóng)村和農(nóng)民問題緊密聯(lián)系起來，實施重點寄生蟲病綜合防治。通過開展重點寄生蟲病綜合防治項目，逐步壓縮流行范圍，防止因人員流動和物質(zhì)交流的頻繁而造成寄生蟲病的傳播。

3.2.4 進一步降低線蟲感染率

國內(nèi)外寄生蟲病防治經(jīng)驗證明，采取以藥物驅(qū)蟲為主，結(jié)合開展健康教育、改水改廁等綜合防治措施，對于消除傳染源，降低寄生蟲感染率有顯著成效。按照“因地制宜、分類指導(dǎo)、科學(xué)防治”的原則，在寄生蟲感染率較大的重度流行區(qū)，每年有計劃地開展集體驅(qū)蟲治療；在中度感染率的流行區(qū)，可采取對重點人群每年進行驅(qū)蟲治療的防治策略，進一步降低人群感染率，保障人民群眾身體健康。

3.2.5 加強重點寄生蟲病防治的應(yīng)用性科研

建立和完善寄生蟲病的監(jiān)測體系，研究制訂重點寄生蟲病的防治標準、技術(shù)規(guī)范和工作方案，使寄生蟲病防治工作科學(xué)、系統(tǒng)、規(guī)范地進行，保證我國寄生蟲病防治工作的可持續(xù)發(fā)展。