姜妍 高福佳 王妍 金玲 韓淑英
摘要:采用小鼠熱板法和扭體法進行鎮(zhèn)痛試驗,觀察外用蕎麥黃酮復合物低、中、高濃度對鎮(zhèn)痛的影響。結(jié)果表明:蕎麥黃酮復合物對小鼠熱刺激和醋酸所致的疼痛抑制作用不明顯結(jié)論:蕎麥黃酮復合物鎮(zhèn)痛作用尚不確定。
關(guān)鍵詞:蕎麥黃酮復合物;鎮(zhèn)痛;藥理
試驗目的:觀察蕎麥黃酮復合物鎮(zhèn)痛作用,為臨床用藥提供依據(jù),闡明其藥理作用及特點。
1.試驗材料
1.1試驗動物:
SPF級昆明小鼠,18-22g,雌性,購自北京華阜康生物科技股份有限公司,合格證號:SCXK<津>2009—0008;小鼠飼料由北京華阜康生物科技股份有限公司,合格證號:SCXK<京>2009—0008。
1.2受試藥物:
蕎麥黃酮復合物河北聯(lián)合大學藥理學系提供。1ml相當于0.27g生藥。用藥方法:外用。一次10ml,加溫開水至100ml混勻,浸洗外陰或以沖洗器沖洗陰道;重癥者也可用原藥液擦洗或用原藥液濕透藥棉敷患處,一日1~2次,七日為一療程。
1.3 對照藥物
①陽性對照賴氨匹林注射液:性狀:本品為無色液體,規(guī)格:0.9g/2ml。批號:100320,生產(chǎn)日期:2011.03.20;有效期至:2013.02,生產(chǎn)廠家:蚌埠豐原涂山制藥有限公司。
②蕎麥黃酮復合物基質(zhì)液對照:河北聯(lián)合大學藥理學系提供,批號:20111228-30。
1.4 試驗儀器:RB—200智能熱板儀,成都泰盟科技有限公司產(chǎn);動物體重電子天平,型號:YP/0001,上海越平科學儀器有限公司產(chǎn)品;精密電子天平,型號:AL204,梅特勒—托利多儀器有限公司。
2.試驗方法
2.1 劑量與給藥途徑設(shè)計
受試藥:蕎麥黃酮復合物人用劑量為取本品30-50ml用溫開水稀釋成1:10的溶液,清洗或坐浴浸泡均可。也可用本品直接涂擦患處,每日三次,五日為一療程,1ml相當于0.27g生藥。因此動物試驗時采用三個劑量,分別為10倍稀釋、5倍稀釋和原液。給藥途徑為直接局部涂抹,給藥量為每天每只鼠0.5ml, 連續(xù)2次,間隔2h。
2.2.1 對熱板法所致小鼠疼痛的影響
取18-22g雌性昆明小白鼠,首先在22℃室溫適應2h,然后進行痛閾篩選。將小鼠放在溫度為55±0.5℃的熱板儀上(每次1只),記錄小鼠自投入熱板儀至出現(xiàn)舔后足的時間作為小鼠的痛閾值,測定2次(間隔30min),取均值作為給藥前痛閾值。2次中有1次痛閾值<5秒或>30秒者均剔除。最后挑選50只時間在5到30秒的小鼠作為試驗動物。將篩選合格的雌性小鼠50只,根據(jù)其給藥前正常痛閾值大小隨機搭配分成5組,每組10只,分別為:基質(zhì)對照組(空白對照組)、賴氨匹林組、蕎麥黃酮復合物洗液高、中、低劑量組。分別于小鼠雙后肢膝關(guān)節(jié)以下至足底部涂搽基質(zhì)液原液、賴氨匹林液原液和蕎麥黃酮復合物原液、1:5和1:10稀釋液。各藥每次涂抹0.5 ml,連續(xù)給藥2次,中間間隔2h(待上次涂藥干燥后)。于末次給藥后30(擦去足部藥物)、60、90、120、180min,再分別用熱板測痛儀測定各小鼠痛閾值。
2.2.2對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響(扭體法)
雌性小鼠50只, 隨機分為5組,每組10只,分組方法同上(2.2.1),給藥方法為小鼠腹部皮膚涂抹各藥,每次0.5ml,連續(xù)給藥2次,中間間隔2h(待上次涂藥干燥后)。各組小鼠腹部皮膚末次涂藥l小時后,每只小鼠再腹腔注射0.6%的冰醋酸溶液0.2ml,并立即觀察記錄小鼠發(fā)生扭體反應(腹部內(nèi)凹,伸展后肢,臀部抬高)的潛伏期和20分鐘內(nèi)出現(xiàn)扭體反應的次數(shù)。計算鎮(zhèn)痛百分率。
鎮(zhèn)痛百分率=(對照組扭體次數(shù)-給藥組扭體次數(shù))/ 對照組扭體次數(shù)。
3.結(jié)果
3.1 蕎麥黃酮復合物對熱板所致疼痛的影響
表1結(jié)果顯示:蕎麥黃酮復合物洗液對小鼠熱刺激所致的疼痛無明顯抑制作用。