李伊倩, 陳俊榕, 李初俊△, 趙睿穎, 楊惠玲, 朱穎鈺, 蔡清紅, 胡思源

(1中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院，廣東 廣州 510655； 2哥倫比亞大學(xué)生物科學(xué)系, 美國 紐約 10027；3中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院病理生理教研室，廣東 廣州 510080)

結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)是消化道常見的惡性腫瘤，2012年中國腫瘤登記年報(bào)顯示結(jié)直腸癌的發(fā)病率居全國惡性腫瘤的第3位，死亡率居第5位。腺瘤-腺癌惡變途徑[1]是目前公認(rèn)的CRC發(fā)生最重要的途徑,2/3以上的CRC由腺瘤進(jìn)展而來，腺瘤越大、形態(tài)越不規(guī)則、絨毛含量越高、上皮異型增生程度越重，癌變機(jī)會(huì)越大[2]。但目前其癌變途徑和分子機(jī)制尚不明確，結(jié)直腸癌的早期篩查工作開展困難，超過一半的患者在確診時(shí)腫瘤細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移，因此研究腺瘤癌變機(jī)制，為結(jié)直腸癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療提供新方法至關(guān)重要。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)是目前國內(nèi)外關(guān)于細(xì)胞增殖、分化與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后等相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)鍵分子標(biāo)志物，被認(rèn)為是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時(shí)使細(xì)胞程序性凋亡的一種重要的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白[3]，CHOP的促癌作用可能機(jī)制為其選擇性促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并進(jìn)一步啟動(dòng)細(xì)胞再生[3]。細(xì)胞的增殖和凋亡失衡與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。正常生理狀況下，結(jié)直腸黏膜上皮細(xì)胞不斷更新，增殖和凋亡處于相對(duì)平衡狀態(tài)，從而保證機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能正常。一旦增殖和凋亡失衡，將會(huì)影響細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量甚至導(dǎo)致結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。本課題組陳俊榕等[4]已通過檢測多例不同遺傳背景條件下結(jié)直腸腺瘤及腺癌組織中CHOP蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡水平，結(jié)果表明CHOP及細(xì)胞凋亡可能參與結(jié)直腸腺瘤癌變過程。CHOP蛋白可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展與其促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡兩者似乎矛盾。但是我們猜想CHOP在促凋亡的同時(shí)，可能也會(huì)誘發(fā)其靶基因TRB3(Tribbles homolog 3)的反饋調(diào)節(jié)[5]，及受其它多種促生存調(diào)節(jié)信號(hào)的影響，從而促進(jìn)細(xì)胞生存，最終使細(xì)胞增殖和凋亡失衡，腫瘤細(xì)胞失控性生長，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展。因此，深入研究結(jié)直腸腺瘤癌變不同階段組織中細(xì)胞增殖和凋亡的關(guān)系及其調(diào)節(jié)機(jī)制，對(duì)了解結(jié)直腸癌的生物學(xué)行為及發(fā)病機(jī)制有重要的意義。本研究檢測具有相同遺傳背景的多組伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤、伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤、腺癌手術(shù)切除標(biāo)本及對(duì)應(yīng)正常腸黏膜中CHOP表達(dá)水平、細(xì)胞增殖指數(shù)(proliferative index,PI；即Ki-67陽性細(xì)胞率)和細(xì)胞凋亡指數(shù)(apoptotic index,AI)，首次研究相同遺傳背景下結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列CHOP、細(xì)胞增殖/凋亡比率(proliferative/apoptotic ratio,PAR)的變化及兩者之間的關(guān)系，從ERS角度及細(xì)胞增殖及凋亡失衡角度闡明結(jié)直腸腺瘤癌變機(jī)制，尋找CRC早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療的新方法。

材 料 和 方 法

1 材料

收集中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院2009年1月1日至2013年1月1日行電子結(jié)腸鏡下及手術(shù)切除的23例病人的伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤(伴輕、中度異型增生的腺癌)、伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤(包括伴重度異型增生的腺瘤、原位癌和黏膜內(nèi)癌)和腺癌石蠟切片標(biāo)本，及每一例病人的癌旁正常腸黏膜(指結(jié)直腸癌手術(shù)切除標(biāo)本最遠(yuǎn)端的腸黏膜組織，病理確證無癌細(xì)胞浸潤)。其中女性10例，男性13例；年齡35～78歲，平均年齡63.5歲；直腸癌16例，結(jié)腸癌7例；按照腸癌Dukes分期標(biāo)準(zhǔn)，Dukes A期5例，Dukes B期9例，Dukes C期8例，Dukes D期1例；按照WHO新分類標(biāo)準(zhǔn)[6]高分化腺癌9例，中分化腺癌12例，低分化腺癌2例。所有組織標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定、脫水并常規(guī)石蠟包埋；4 μm連續(xù)切片，貼在經(jīng)Poly-Lysine防脫片處理的防脫載玻片上，置60 ℃烤箱烘烤90 min備用；所有切片標(biāo)本均經(jīng)HE染色病理確證。已排除術(shù)前行放療及化療者、家族性腺瘤性息肉病患者。

2 方法

2.1免疫組化SABC法 CHOP多克隆兔Ⅰ抗(F-168)及Ki-67單克隆鼠Ⅰ抗均購自Santa Cruz；SABC免疫組化染色試劑盒(含5%BSA封閉液，兔Ⅱ抗或鼠Ⅱ抗，SABC反應(yīng)液：鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物)購自武漢博士德生物工程有限公司；二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenizidine, DAB)顯色試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。主要實(shí)驗(yàn)步驟如下：(1)烤片，常規(guī)脫蠟及水合；(2)消除內(nèi)源性過氧化物酶：置于3%過氧化氫溶液中反應(yīng)15 min，蒸餾水洗5 min×3次；(3)微波修復(fù)抗原：玻片浸泡于0.01 mol/L枸櫞酸鹽溶液，置于微波爐中微波3 min×4次，并自然冷卻至室溫，蒸餾水洗5 min×3次，免疫組化畫圈筆在組織塊周圍畫圈，PBS洗5 min×3次；(4)血清封閉：5%BSA封閉20 min，甩干；(5)Ⅰ抗孵育：Ⅰ抗稀釋液將Ⅰ抗稀釋至適當(dāng)比例(CHOP 1∶50，Ki-67 1∶50)，滴至組織上將組織覆蓋，置于4 ℃冰箱中過夜，并復(fù)溫20 min，PBS洗5 min×3次；(6)孵育Ⅱ抗；分別滴加兔Ⅱ抗及鼠Ⅱ抗常溫反應(yīng)30 min, PBS洗5 min×3次；(7)SABC級(jí)聯(lián)反應(yīng)：滴加SABC反應(yīng)液常溫反應(yīng)30 min, PBS洗5 min×3次；(8)DAB染色3～5 min, PBS洗5 min×3次；(9)蘇木素復(fù)染20 s,自來水沖洗；(10)1%鹽酸乙醇分化3 s；(11)脫水及透明；(12)常溫自然風(fēng)干、中性樹膠封片、蓋片；(13)光學(xué)顯微鏡觀察。

2.2TUNEL法 根據(jù)南京凱基TUNEL凋亡細(xì)胞檢測試劑盒(FITC標(biāo)記法)說明書進(jìn)行檢測。具體步驟如下：(1)60 ℃烤片1 h，脫蠟及水合；(2)1%Triton X-100 通透液通透5 min；(3)滴加蛋白酶K于 37 ℃反應(yīng)30 min，PBS漂洗10 min；(4)3%H2O2常溫封閉10 min，以阻斷其內(nèi)源酶，PBS漂洗10 min；(5)滴加TdT酶反應(yīng)液，加蓋玻片37 ℃濕潤避光反應(yīng)60 min，PBS漂洗15 min；(6)滴加鏈霉親和素-FITC標(biāo)記工作液，加蓋玻片37 ℃避光濕潤反應(yīng)60 min，PBS漂洗30 min；(7)熒光顯微鏡觀察：激發(fā)波長450～500 nm，發(fā)射波長515～565 nm。

3 結(jié)果判讀

3.1CHOP及Ki-67表達(dá)結(jié)果 采用雙盲法顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。用已知CHOP陽性乳腺癌組織及Ki-67陽性扁桃腺細(xì)胞免疫組化結(jié)果作為陽性對(duì)照，不滴加Ⅰ抗的腸癌組織作為陰性對(duì)照。可見CHOP蛋白表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，呈棕黃色；Ki-67全部表達(dá)于細(xì)胞核中，呈棕褐色。根據(jù)DAB染色結(jié)果，參照Ishida[7]判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定：隨機(jī)選取5個(gè)細(xì)胞富集、染色均勻的200倍視野，分別對(duì)染色陽性細(xì)胞及陰性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，5個(gè)視野陽性細(xì)胞百分率的平均值作為陽性細(xì)胞百分率，Ki-67陽性細(xì)胞百分率為PI。

3.2TUNEL法檢測凋亡結(jié)果 采用雙盲法顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。用DNA酶處理的腸黏膜組織作為陽性對(duì)照，不滴加TdT酶的腸癌組織作為陰性對(duì)照。熒光顯微鏡可見凋亡陽性的細(xì)胞激發(fā)出綠色熒光。連續(xù)觀察5個(gè)200倍視野, 5個(gè)視野陽性細(xì)胞百分率的平均值即AI[7]。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，利用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的方差分析及Bonferroni多重比較方法，利用定量資料的關(guān)聯(lián)分析方法分析CHOP表達(dá)水平和PAR之間的關(guān)系。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 相同遺傳背景結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列CHOP蛋白表達(dá)

腸癌標(biāo)本PBS代替Ⅰ抗者呈陰性表現(xiàn)，正常腸黏膜CHOP蛋白少量表達(dá)于細(xì)胞核和細(xì)胞漿，腺瘤和腺癌組織CHOP表達(dá)明顯增加，分布于細(xì)胞核和細(xì)胞漿，見圖1。正常腸黏膜、伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤、伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤及腺癌CHOP表達(dá)陽性細(xì)胞百分率，見表1；相同遺傳背景腺瘤癌變序列組織中CHOP陽性細(xì)胞百分率差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。CHOP在結(jié)直腸腺癌組織中的陽性細(xì)胞率顯著高于伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤、伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤和正常腸黏膜(P<0.01)；伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤中的陽性細(xì)胞率顯著高于伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤和正常腸黏膜(P<0.01)，伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤中的陽性細(xì)胞率顯著高于正常腸黏膜(P<0.01)。

Figure 1. CHOP expression detected by immunohistochemistry SABC method.A: HE staining(×200); B: negative control (×400); C:normal mucosa (×200); D: adenoma with low-grade intraepithelial neoplasia (×200); E: adenoma with high-grade intraepithelial neoplasia (×200); F:colorectal adenocarcinoma (×200); G: colorectal adenocarcinoma (×400).

2 相同遺傳背景結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列增殖與凋亡比率PAR表達(dá)差異分析

腸癌標(biāo)本PBS代替Ⅰ抗者呈陰性表現(xiàn)，正常腸黏膜Ki-67少量表達(dá)于細(xì)胞核，腺瘤和腺癌組織Ki-67表達(dá)明顯增加，分布于細(xì)胞核，見圖2。用DNA酶處理的正常腸黏膜組織呈明顯陽性表現(xiàn)，不滴加TdT酶的腸癌組織呈陰性表現(xiàn)。熒光顯微鏡可見凋亡陽性的細(xì)胞激發(fā)出綠色熒光，分布于細(xì)胞核，見圖3。正常腸黏膜、伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤、伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變的腺瘤及腺癌PI、AI和PAR見表1；相同遺傳背景腺瘤癌變序列組織PAR差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。PAR在結(jié)直腸腺癌組織顯著高于伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤(P<0.01)、伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤和正常腸黏膜(P<0.01)；伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤顯著高于伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤和正常腸黏膜(P<0.01)，伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤顯著高于正常腸黏膜(P<0.01)。

3 相同遺傳背景結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列CHOP蛋白表達(dá)及PAR關(guān)系分析

CHOP蛋白表達(dá)和PAR關(guān)聯(lián)性分析結(jié)果顯示，在伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變中CHOP蛋白表達(dá)水平和PAR的Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.641(P<0.01)；在高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變中兩者Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.867(P<0.01)；在腺癌組織中兩者Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.930，P<0.01；所以可以認(rèn)為CHOP蛋白表達(dá)水平和PAR在結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列變化過程中呈正相關(guān)關(guān)系。

討 論

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細(xì)胞生物的一種重要的細(xì)胞器，是蛋白質(zhì)合成、折疊和運(yùn)輸以及細(xì)胞內(nèi)Ca2+儲(chǔ)存的主要場所。缺氧、糖剝奪及鈣離子穩(wěn)態(tài)失衡等[8-9]多種病理因素造成未折疊或者異常折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)大量堆積，從而導(dǎo)致ERS。細(xì)胞通過啟動(dòng)未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response，UPR)，降低蛋白合成速度，恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，從而維持細(xì)胞的正常功能。但如果應(yīng)激過于強(qiáng)烈、持久，內(nèi)環(huán)境紊亂無法糾正，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)不能及時(shí)恢復(fù)，則相應(yīng)凋亡機(jī)制被激活以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[10]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)凋亡的通路主要包括caspase-12的活化通路、IRE1-JNK信號(hào)通路、促凋亡編碼基因CHOP通路。CHOP通路是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)凋亡的一個(gè)重要的通路。CHOP屬于C/EBP轉(zhuǎn)錄因子家族成員，也叫生長抑制及DNA損傷誘導(dǎo)蛋白153(growth arrest and DNA damage-inducible protein 153，GADD153)或DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄本3(DNA damage-inducible transcript 3， DDIT3)，與各種細(xì)胞活動(dòng)(如增殖、分化、凋亡及能量代謝)相關(guān)。正常情況下，CHOP表達(dá)水平普遍低下，當(dāng)發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時(shí)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路相關(guān)蛋白PERK和ATF6的活化均可促進(jìn)CHOP的表達(dá)顯著增加[11]，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。CHOP已被證實(shí)與多種非腫瘤性疾病如子癇、阿爾茨海默病和腦缺血發(fā)病相關(guān)，同時(shí)其也與多種腫瘤性疾病如子宮內(nèi)膜癌[12]、黏液樣脂肪肉瘤[13-14]和肝癌[15]的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。目前關(guān)于CHOP與結(jié)直腸癌關(guān)系方面的研究很少，Rask等[16]研究發(fā)現(xiàn)CHOP在結(jié)腸癌組織中表達(dá)升高，與腫瘤的侵襲性相關(guān)。陳俊榕等[4]通過檢測多例結(jié)直腸腺瘤及腺癌組織中CHOP蛋白表達(dá)水平，結(jié)果表明CHOP可能參與結(jié)直腸腺瘤癌變過程[4]。本實(shí)驗(yàn)通過研究相同遺傳背景條件下，正常腸黏膜-伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤-伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變-腸癌序列癌變組織中CHOP蛋白的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)隨著腺瘤癌變的進(jìn)展，CHOP表達(dá)水平逐漸升高，說明了CHOP可能參與了結(jié)直腸腺瘤癌變過程，使其成為具有潛在應(yīng)用價(jià)值的結(jié)直腸癌標(biāo)志物和結(jié)直腸癌治療的新靶點(diǎn)。

Figure 2. Ki-67 expression detected by immunohistochemistry SABC methods.A: HE staining(×200); B: negative control (×400); C:normal mucosa (×200); D: adenoma with low-grade intraepithelial neoplasia (×200); E: adenoma with high-grade intraepithelial neoplasia (×200); F:colorectal adenocarcinoma (×200); G: colorectal adenocarcinoma (×400).

癌基因的激活和(或)抑癌基因的失活使機(jī)體細(xì)胞的增殖和凋亡失衡，從而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生和發(fā)展。已有研究證明增殖和凋亡相關(guān)蛋白如p53、Bcl-2、COX-2、β-catenin、APC、survivin、Bax、EGFR及IGF-1等可以影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展[17]、放化療敏感性[18]及復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)性[19]。對(duì)于增殖、凋亡和結(jié)直腸腫瘤生物學(xué)行為之間的關(guān)系，目前國內(nèi)外研究結(jié)果尚未達(dá)成一致的觀點(diǎn)。Kubbuutat等[20]認(rèn)為Ki-67抗原在結(jié)直腸癌中的表達(dá)水平與腫瘤大小、轉(zhuǎn)移情況及預(yù)后呈正相關(guān)，其可作為判斷結(jié)直腸癌預(yù)后的參考指標(biāo)。Anjomshoaa等[21]研究了73例原發(fā)結(jié)直腸癌和27例肝轉(zhuǎn)移癌的Ki-67的表達(dá)，結(jié)果表明低增殖率是結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移病灶和其原發(fā)病灶的生物學(xué)特征。Kikuchi等[22]檢測了結(jié)直腸腺瘤癌變組織及腺癌組織中Ki-67表達(dá)及凋亡指數(shù)，結(jié)果表明隨著結(jié)直腸腺瘤癌變進(jìn)展Ki-67增殖指數(shù)升高，而凋亡指數(shù)下降。本實(shí)驗(yàn)通過研究同一個(gè)體、相同遺傳背景下的腺瘤-腺癌轉(zhuǎn)變過程中增殖和凋亡情況的變化，發(fā)現(xiàn)隨著腺瘤癌變進(jìn)展，PAR逐漸升高。與Kikuchi等[22]的結(jié)果一致。進(jìn)一步說明腺瘤惡變過程中，細(xì)胞增殖及凋亡失衡，細(xì)胞失控性生長，導(dǎo)致瘤體積增大呈膨脹性生長，此過程可能參與了結(jié)直腸腺瘤的癌變。

表1 結(jié)直腸腺瘤癌變不同階段組織CHOP表達(dá)水平、PI、AI及PAR

*P<0.05vsnormal mucosa;#P<0.05vsadenoma with low-grade intraepithelial neoplasia;?P<0.05vsadenoma with high-grade intraepithelial neoplasia.

腫瘤的增殖或者凋亡，反映的只是腫瘤細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的一個(gè)相對(duì)獨(dú)立指標(biāo)，不能完全反應(yīng)腫瘤的生物學(xué)行為，因此研究結(jié)直腸癌變過程中增殖和凋亡的比率，并結(jié)合具體信號(hào)通路過程更能說明結(jié)直腸腺瘤癌變的發(fā)病機(jī)制。如Aotake等[23]檢測了腺瘤癌變序列組織中細(xì)胞凋亡指數(shù)、Ki-67增殖指數(shù)以及反映細(xì)胞缺氧程度的微血管密度，從血管生成及細(xì)胞增殖、凋亡失衡角度說明增殖增加、凋亡減少及缺氧同時(shí)參與結(jié)直腸腺瘤癌變過程；Valcz等[24]人通過檢測13例正常腸黏膜、伴低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤、伴高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變腺瘤及腺癌中骨橋蛋白(osteopontin，OPN)表達(dá)及PAR，結(jié)果表明結(jié)直腸腺瘤癌變序列組織中OPN及PAR逐漸升高，從OPN及細(xì)胞增殖、凋亡失衡方面說明了結(jié)直腸腺瘤癌變的可能機(jī)制 。本實(shí)驗(yàn)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激角度探討結(jié)直腸腺瘤癌變機(jī)制，表明隨著腺瘤惡變程度的加深，增殖/凋亡比率逐漸升高。提示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路在結(jié)直腸腺瘤癌變進(jìn)展過程中除了發(fā)揮細(xì)胞凋亡的作用外，可能會(huì)通過其它途徑如誘發(fā)其靶基因TRB3的反饋調(diào)節(jié)[5]，從而促進(jìn)細(xì)胞生存，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、生長，改變腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡的平衡狀態(tài)，使細(xì)胞失控性生長，從而促進(jìn)腫瘤惡變。同時(shí)，結(jié)直腸腺瘤在癌變過程中細(xì)胞增殖/凋亡比率逐漸升高，細(xì)胞失控性生長，組織呈膨脹性生長且生長速度加快，可能造成缺氧、糖剝奪等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)，使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激程度進(jìn)一步加深，從而導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激主要蛋白CHOP升高。但具體的機(jī)制及確切通路尚需進(jìn)一步研究

總之，本實(shí)驗(yàn)首次研究相同遺傳背景結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列中CHOP表達(dá)水平、PAR以及兩者之間的關(guān)系。本研究結(jié)果表明相同遺傳背景結(jié)直腸腺瘤-癌組織序列中CHOP蛋白表達(dá)和細(xì)胞增殖/凋亡比率逐漸升高，提示CHOP和細(xì)胞增殖及凋亡異常可能共同參與結(jié)直腸腺瘤癌變過程，為下一步研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與結(jié)直腸腺瘤癌變關(guān)系奠定基礎(chǔ)。

[參 考 文 獻(xiàn)]

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