吳述芬，陳小平

1.廣州市白云區(qū)石井人民醫(yī)院(廣東 廣州 510430)

8-iso-PGF2α、GSH-Px在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)及其臨床意義

吳述芬1，陳小平2

1.廣州市白云區(qū)石井人民醫(yī)院(廣東 廣州 510430)

2.廣東省第二中醫(yī)院(廣東 廣州 510095)

目的 分析子宮內(nèi)膜異位癥患者及健康婦女血清中8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的表達(dá)情況，探討氧化應(yīng)激在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病中的作用及其與臨床分期的相關(guān)性。方法 實(shí)驗(yàn)組按子宮內(nèi)膜異位癥分期(RAFS)將80例子宮內(nèi)膜異位癥患者分為I 期20例、 II期24例﹑III期21例及IV期15例，另選擇20例健康婦女作為對(duì)照組，檢測(cè)兩組病例血清中8-iso-PGF2α及GSH-Px的含量。結(jié)果 (1)實(shí)驗(yàn)組中8-iso-PGF2α的含量較對(duì)照組高(P<0.05),實(shí)驗(yàn)組中GSH-Px的含量較對(duì)照組低(P<0.05)。(2)實(shí)驗(yàn)組的I期﹑II期﹑III期及IV期病例中8-iso-PGF2α表達(dá)依次升高，差異顯著(P<0.05)，但各臨床分期間GSH-Px的表達(dá)無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論 子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生與機(jī)體氧化應(yīng)激異常有關(guān)，8-iso-PGF2α及GSH-Px是反映機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)的敏感指標(biāo)，8-iso-PGF2α表達(dá)的高低還與子宮內(nèi)膜異位癥的臨床分期有明顯相關(guān)性。

8-iso-PGF2α；GSH-Px；子宮內(nèi)膜異位癥

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMs)是正常子宮內(nèi)膜出現(xiàn)在宮腔以外的部位，并出現(xiàn)一系列臨床癥狀的常見婦科疾病。其發(fā)病率約為6%～10%，復(fù)發(fā)率高[1]。氧化應(yīng)激是導(dǎo)致EMs發(fā)生的重要病理因素之一，本研究初步探討機(jī)體脂質(zhì)過氧化特異性產(chǎn)物8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px )在EMs的表達(dá)情況，以及在EMs不同臨床分期中表達(dá)的差異性及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇廣東省第二中醫(yī)院及廣州市白云區(qū)石井人民醫(yī)院2011年10月至2013年6月婦產(chǎn)科就診的EMs患者80 例(試驗(yàn)組)，按RAFS進(jìn)行分期，Ⅰ期 20例、Ⅱ期24例、Ⅲ期21例、Ⅳ期15例，平均年齡 (33±7)歲；同時(shí)選擇這兩所醫(yī)院婦產(chǎn)科門診的健康未孕育齡婦女20例(對(duì)照組)，平均年齡(32±4)歲。兩組患者年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 所有病例術(shù)前3個(gè)月未使用過激素類藥物，無內(nèi)分泌和感染性疾病，無排卵障礙、盆腔結(jié)核、子宮畸形或內(nèi)膜病變引起的不孕等疾病。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本收集 兩組患者均在清晨空腹采集靜脈血5 mL(肝素抗凝)，在室溫下靜置2～3 h， 3 000 r/min離心10 min，取上清液，用小管分裝后存于-80℃冰箱保存待用。

1.2.2 檢測(cè)方法 使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA法)檢測(cè)血清中8-iso-PGF2α含量，由北京方程生物科技有限公司提供試劑盒，主要由純化的羊抗兔 8-iso-PGF2α抗體和HRP標(biāo)記的抗原及其他試劑組成，定量檢測(cè)在酶標(biāo)儀上進(jìn)行。血清GSH-Px含量以雙抗體夾心ABC-ELISA法來測(cè)定，在酶標(biāo)板上加入生物素化的抗大鼠GSH-Px，形成免疫復(fù)合物后測(cè)定OD值，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中GSH-Px濃度，試劑盒由南京建成生物工程公司提供。所有操作均按說明嚴(yán)格執(zhí)行。

2 結(jié)果

2.1 兩組間血清含量比較 試驗(yàn)組中8-iso-PGF2α均值高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。試驗(yàn)組中GSH-Px均值低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 見表1。

表1 兩組患者血漿8-iso-PGF2α、GSH-Px的表達(dá)情況

注：與對(duì)照組比較▽P<0.05。

2.2 實(shí)驗(yàn)組中各臨床分期間比較 實(shí)驗(yàn)組中I期、II期、III期及IV期病例中8-iso-PGF2α均值依次升高，各期間差異顯著 (F=3.176～10.63，q=2.49～7.31，P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組中的GSH-Px均值相比，差異不明顯(F=2.26～3.24，q=2.16～2.45，P>0.05)。見表2。

表2 實(shí)驗(yàn)組血漿8-iso-PGF2α、GSH-Px與其臨床分期的關(guān)系±s)

3 討論

EMs是嚴(yán)重困擾育齡期婦女的一種常見病、多發(fā)病，近年來其發(fā)病率有上升趨勢(shì)?；糆Ms的婦女中不孕癥發(fā)病率高達(dá)25%～67%。近年來大量的研究表明，氧化應(yīng)激反應(yīng)與EMs的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，主要機(jī)理有三方面，第一，子宮內(nèi)膜細(xì)胞氧化酶與抗氧化酶異常表達(dá)，Ota等[2]發(fā)現(xiàn)EMs患者在整個(gè)月經(jīng)周期中，異位內(nèi)膜與在位內(nèi)膜中產(chǎn)生活性氧化物的黃嘌呤氧化酶持續(xù)高水平表達(dá)；第二，氧化低密度脂蛋白的異常增加，Murphy等[3]觀察到EMs患者低密度脂蛋白(LDL)的氧化作用增加，其腹腔液中氧化的LDL濃度也增加；第三，EMs患者維生素E的水平明顯降低，可能是由于腹腔液中的抗氧化劑在氧化反應(yīng)過程中消耗所致。而8-iso-PGF2α是近年來新發(fā)現(xiàn)具有生物活性的擬前列腺物質(zhì)，它能靈敏地反映體內(nèi)氧化應(yīng)激水平[4-5]；GSH-Px是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶，可特異地催化GSH對(duì)過氧化物的還原反應(yīng)，檢測(cè)體內(nèi)血清GSH-Px水平可客觀反映機(jī)體抗氧化能力。聯(lián)合檢測(cè)EMs患者8-iso-PGF2α及GSH-Px含量，可綜合評(píng)估機(jī)體的氧化應(yīng)激水平及抗氧化能力，為EMs引起的不孕癥患者提供臨床解決思路。

本研究發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組中8-iso-PGF2α的含量較對(duì)照組明顯升高，這說明EMs發(fā)生與機(jī)體的氧化應(yīng)激異常密切相關(guān)；隨著EMs臨床分期級(jí)別越高，血清中8-iso-PGF2α表達(dá)越高，這說明8-iso-PGF2α可敏感地反映子宮內(nèi)膜病變的嚴(yán)重程度。同樣GSH-Px也能反映機(jī)體內(nèi)氧化系統(tǒng)的平衡情況，也是評(píng)價(jià)氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的重要生物指標(biāo)，但在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組中GSH-Px的表達(dá)與其臨床分期之間并無明顯相關(guān)性，其機(jī)理有待進(jìn)一步探討。

總之，隨著蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展，多種技術(shù)可以聯(lián)合應(yīng)用于EMs研究，高通量、高靈敏度和高精確度地篩查相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)圖譜，對(duì)于探索EMs發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制，尋找早期診斷的標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)都具有重要意義。

[1] 趙玉,黃向華.子宮內(nèi)膜異位癥治療進(jìn)展[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,27(5):503-505.

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[5] Syslová K, Kuzma M, Najmanová V.Rapid and easymethod for monitoring oxidative stressmarkers in body fluids of patients with asbestos or silica-induced lung diseases[J].Chromatogr B Analyt TechnolBiomed Life Sci,2009,877(24):2 477.

8-iso-PGF2α，GSH-Px Expression and Its Clinical Significance in Endometriosis

WU Shu-fen1,CHEN Xiao-ping2

(1.ShijingPeople′sHospital,Guangzhou510430,China;2.theSecondTraditionalChineseMedicineHospitalofGuangdongProvince,Guangzhou510095,China)

Objective To analyze the expression of 8-iso-PGF2α and glutathione peroxidase (GSH-Px) in serum of patients with endometriosis and healthy women so as to explore the role of oxidative stress in the pathogenesis of endometriosis and its correlation with clinical stage.Methods According to RAFS, 80 patients with endometriosis were divided into 4 stages: 20 patients at stage I, 24 patients at stage II, 21 patients at stage III, and 15 patients at stage IV. In contrast, 20 healthy women were chosen as the control group, then 8-iso-PGF2α and GSH-Px levels in serum were detected in the two groups. Results (1) the content of 8-iso-PGF2α in the experiment group was relatively higher than that in the control group (P<0.05), while the content of GSH-Px in the experimental group was lower (P<0.05).(2)8-iso-PGF2α expression means at the four stages in the experiment group increase successively, and showed significant difference (P<0.05), but there was no such difference in GSH-Px expression in the experimental group (P>0.05).Conclusion The occurrence of endometriosis was associated with anomaly oxidative stress of body,8-iso-PGF2α and GSH-Px are sensitive indicators reflecting body oxidative stress status,and the expression of 8-iso-PGF2α has obvious correlation with endometriosis clinical staging.

8-iso-PGF2α；GSH-Px；endometriosis

廣東省人口和計(jì)劃生育委員會(huì)科研資助項(xiàng)目(2012335)。

吳述芬(1972- )，女，湖北恩施人，副主任醫(yī)師，碩士，研究方向：子宮內(nèi)膜病變。

R711.71

A

1008-8164(2014)01-0004-02

2013-09-10]