馬宇亮

(黑龍江工業(yè)學院，黑龍江 雞西 158100)

1 實驗原理

在一定范圍內，碳顆粒的清除速率即吞噬速度與血碳濃度成正比，而與已吞噬的碳粒量成反比。也就是說在一定范圍內，碳顆粒的清除速率與其劑量呈指函數關系。

以前后時間差為橫座標，對應時間點的血碳濃度對數差值為縱座標，做線性方程。此直線斜率為K(公式1)，可表示吞噬速率，亦可稱為未經校正的吞噬指數。因為K值的大小受很多因素的影響，比如動物肝脾的重量不等，K值不同等。所以，一般用a(公式2)表示校正過的吞噬指數。公式如下：

公式1

公式2

其中，a反映了每單位組織重量的吞噬活性。

2 實驗儀器和試劑

分光光度計(上海將來實驗設備有限公司)

計時器(廣州?？俗詣踊O備有限公司)

血色素吸管(江蘇省姜堰市瑞康醫(yī)療器械有限公司)

注射器(黑龍江省哈泉醫(yī)療器械制品有限公司

墨汁(市售)

黃芪水溶性粉(自制)

樺木水溶性粉 (自制)

Na2CO3(中國藥品生物制品檢定所)

3 實驗動物

清潔級小鼠，體重30g-35g。

4 實驗步驟

4.1 分組給藥。

用黃芪水溶性粉和樺木水溶性粉配制濃度分別為0.5mg/ml、1mg/ml和1.5mg/ml的低、中、高劑量藥液。將小鼠分為7組，分別為空白組,正常給食。黃芪[1]低劑量組，黃芪中劑量組，黃芪高劑量組，樺木[2]低劑量組，樺木中劑量組，樺木高劑量組，每組7只，一天灌胃一次，一次0.5ml，共30天。

4.2 溶液配制。

注射用墨汁的配制：將市售墨汁用0.9%NaCl溶液稀釋3～4倍

Na2CO3溶液的配制：準確稱量Na2CO3固體0.1g，加蒸餾水，用100ml容量瓶定容。

4.3 注射。

準確稱量每只實驗小鼠的體重，重復3-5次取平均。然后按每10g體重0.1ml 計量計算給小鼠尾靜脈注射配制好的墨水。注入后馬上開始記時。

4.4 數據的測定。

記時2min，從內眥靜脈叢取血20μL，將取出的血液立即加到 2ml 配制好的Na2CO3溶液中，充分混合，以配制好的Na2CO3溶液作空白，然后用分光光度計在600nm波長處測所得樣品的OD值。

然后解剖小鼠，分別取出肝和脾，用濾紙吸干表面血污，然后分別準確稱出肝和脾的重量，記錄數據。

5 實驗數據及結論

結果判斷以計算出的樣品的吞噬指數與空白組吞噬指數的差值為依據，大于零的為陽性，說明吞噬活性更好，免疫力更強；反之為陰性。每組3只小鼠求平均。

表1 小鼠體重、肝重、脾重數據

表2 測得的樣品OD值及對應的對數值

表3 計算得出相應的K值、a值及平均值

由以上表中數據計算出空白組吞噬指數的平均值為4.98，黃芪低劑量組的平均吞噬指數為5.57，黃芪中劑量組的平均吞噬指數為5.50，黃芪高劑量組的平均吞噬指數為5.17，樺木低劑量組的平均吞噬指數為4.40，樺木中劑量組的平均吞噬指數為4.29，樺木高劑量組的平均吞噬指數為4.49。

由數據可以看出，樣品黃芪組與空白組吞噬指數的差值大于零，陽性；樣品樺木組與空白組吞噬指數的差值小于零，陰性。結果說明黃芪組小鼠的吞噬活性更好，免疫力更強。

[1]羅千古, 周玖瑤，等. 黃芪丹參提取液對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導報, 2011,08 (2).

[2]易金娥, 袁莉蕓，等. 樺木酸對小鼠淋巴細胞及巨噬細胞的影響分析[J].畜牧獸醫(yī)學報, 2011,42 (1).