吳延誨 梁慧芳

【摘 要】 目的 探討濫用抗生素導(dǎo)致的腸道菌群失調(diào)與肝細(xì)胞癌發(fā)生的相關(guān)性。方法 60例肝癌患者根據(jù)有無濫用抗生素分為兩組，再結(jié)合其臨床病理參數(shù)進(jìn)行比較。結(jié)果 濫用抗生素組較規(guī)范用藥組在腫瘤大小和T分期上均有明顯不同。結(jié)論 濫用以抑制革蘭氏陽性菌為主的抗生素可能與肝細(xì)胞癌發(fā)生有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 原發(fā)性肝癌；濫用抗生素；TL受體；革蘭氏陰性菌

【中圖分類號】 R735.7 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A

肝細(xì)胞癌（HCC），因?yàn)閷Ψ呕煵幻舾?，及對人體新陳代謝的影響，一直位于世界致死率最高癌癥前列[1]。而對肝癌預(yù)防的研究進(jìn)展緩慢。中國濫用抗生素普遍，造成腸道菌群失調(diào)，引起各種并發(fā)癥。研究發(fā)現(xiàn)腸道細(xì)菌的移位以及失調(diào)引起TL受體變化，可引發(fā)肝癌。對肝癌發(fā)生前抗生素使用情況與發(fā)病后臨床病理參數(shù)分析，結(jié)合腸道細(xì)菌定性定量檢查結(jié)果，驗(yàn)證兩者相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 研究對象 收集同濟(jì)醫(yī)院2006年1月到2012年6月經(jīng)CT及B超確診的60例肝癌患者。男性32例，女性28例，依據(jù)UICC和AJCC聯(lián)合分類標(biāo)準(zhǔn)分類。

1.2 方法 資料采集：對患者發(fā)病前既往用藥史進(jìn)行采集，分兩組，標(biāo)準(zhǔn)是每年服用抗生素總時間超過60天或連續(xù)應(yīng)用超過2周，在此基礎(chǔ)上出現(xiàn)腹瀉、便秘癥狀者。結(jié)合病理學(xué)參數(shù)分析。菌群定性分析：主要對革蘭氏陰性桿菌、陽性菌及真菌進(jìn)行研究。采集患者糞便行厭氧、需氧菌檢查。用其結(jié)腸材料涂片檢查白色念珠菌。定量檢查：糞質(zhì)均質(zhì)培養(yǎng)后計(jì)算細(xì)菌數(shù)。HB8643 革蘭氏陰性菌選擇性培養(yǎng)基，HB7035 PEA瓊脂培養(yǎng)基針對革蘭氏陽性菌，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基針對真菌分別培養(yǎng)。放入37度恒溫箱，置于搖床250轉(zhuǎn)/分鐘搖動。培養(yǎng)48小時候在倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料X2檢驗(yàn)進(jìn)行比較，計(jì)量資料以Two-way Anova檢驗(yàn)比較。使用SPSS16.0軟件分析，P<0.05有意義。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)病前濫用抗生素 患者較對照組在腫瘤分期及腫瘤大小上有差異濫用抗生素史的患者腫瘤大小、T分期均較對照組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（表1）。抑制革蘭氏陽性菌為主抗生素的患者與抑制革蘭氏陰性菌的患者間也有明顯差異（表2）。

2.2 濫用抗生素患者腸道細(xì)菌分布與所用抗生素相互對應(yīng)糞檢以革蘭氏陰性細(xì)菌為主患者（均為明顯陽性）以用抗革蘭氏陽性菌抗生素為主，反之也如此。兩組之間有明顯對應(yīng)關(guān)系（表3）。

2.3 繼續(xù)行定量分析發(fā)現(xiàn)細(xì)菌菌落數(shù)與所用藥物相對應(yīng)濫用抗革蘭氏陽性菌抗生素患者的革蘭氏陰性菌的菌落計(jì)數(shù)明顯高于革蘭氏陽性菌及真菌。另一組患者細(xì)菌定量結(jié)果也有相同趨勢。

3 討論

肝癌發(fā)生發(fā)展是一個涉及多通路、多因素、多步驟的過程，作為人體炎癥反應(yīng)通路重要因子的TL受體[2]，進(jìn)一步把炎癥與腫瘤聯(lián)系在一起。

近期研究發(fā)現(xiàn)[3]，TL受體敲除的小鼠在肝癌誘導(dǎo)劑CCL4的作用下所生長的腫瘤大小和數(shù)量均與未敲除小鼠有區(qū)別，TL受體[4]也通過影響IFN-a，IFN-c，IL-12 和TNF-a等促炎因子表達(dá)起重要作用。TL受體主要在腫瘤形成前最后4個月發(fā)生作用。

通過研究，我們發(fā)現(xiàn)濫用抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)，可能也通過TL受體產(chǎn)生作用。濫用抗生素組患者肝癌在腫瘤大小和TNM分期上均與對照組有明顯差異（P<0.05）。通過進(jìn)一步研究，長期服用以抑制革蘭氏陽性菌為主抗生素的患者腫瘤大小和T分期與對比組患者有明顯不同（P<0.05）。定量（圖1）研究患者腸道菌群表達(dá)譜，革蘭氏陰性菌菌落數(shù)與腫瘤大小和T分期正相關(guān)。由此認(rèn)為濫用抗生素通過TL受體引起肝癌發(fā)生。革蘭氏陰性菌更易引發(fā)癌癥，可能是內(nèi)毒素通過TL受體，造成肝臟炎癥反應(yīng)引發(fā)肝硬化的同時引起肝癌發(fā)生。除了與內(nèi)毒素入血有關(guān)外，還有可能通過NFkB移位影響細(xì)胞生物學(xué)特性。其具體機(jī)制，待進(jìn)一步研究。

雖然樣本量較少，受實(shí)驗(yàn)技術(shù)和條件影響，研究還不夠充分和深入。但這是國內(nèi)首次報道濫用抗生素與肝癌發(fā)生的相關(guān)性，部分解釋了無乙肝史肝癌患者發(fā)病的原因。

參考文獻(xiàn)

[1] P.A.Farazi，R.A.DePinho，HePatocellular carcinoma Pathogenesis：from genes to environment.Nature reviews[J].Cancer，2006，6（2006）：674-687.

[2] Alderton，G.K.（2012）.Inflammation：“The gut takes a toll on liver cancer.”[J].Nat Rev Cancer，2012，12（6）：379.

[3] Crane MJ，Gaddi PJ，Salazar-Mather TP.UNC93B1 Mediates Innate Inflammation and Antiviral Defense in the Liver during Acute Murine Cytomegalovirus Infection[J].PLoS One，2012，7（6）：39161.