何 靜，蔣 斌，梅志剛

耳鳴是指無外界相應(yīng)聲源或電刺激情況下耳內(nèi)有響聲的一種主觀感覺。據(jù)統(tǒng)計(jì)，人群中有10%在生活中能感知到短期的耳鳴，約有5%的成年人有長(zhǎng)期的頑固性耳鳴癥狀，并已經(jīng)嚴(yán)重妨礙其日常生活[1]。目前，耳鳴的發(fā)生機(jī)制尚不明確，主要存在兩種假說：一是認(rèn)為耳鳴與外周聽覺系統(tǒng)損傷有關(guān)：二是認(rèn)為耳鳴與聽覺中樞可塑性有關(guān)。本文從神經(jīng)電生理、神經(jīng)遞質(zhì)及與耳鳴相關(guān)的中樞神經(jīng)可塑性變化方面進(jìn)行綜述，探討耳鳴發(fā)生的潛在機(jī)制，以期為今后深入研究耳鳴提供借鑒，并為臨床治療耳鳴提供理論指導(dǎo)。

1 耳鳴過程中聽覺傳導(dǎo)通路的電生理可塑性變化

機(jī)體所能感知的聲音是外界的聲信號(hào)在耳內(nèi)編譯成的電信號(hào)。異常狀態(tài)下，如強(qiáng)聲或損傷刺激聽覺傳導(dǎo)通路，會(huì)使其產(chǎn)生異常的自發(fā)放電現(xiàn)象，即發(fā)生了可塑性的調(diào)節(jié)。哺乳動(dòng)物大腦的周圍神經(jīng)系統(tǒng)和聽覺系統(tǒng)在損傷后會(huì)發(fā)生可塑性的變化，造成耳蝸的靈敏度降低，聽覺系統(tǒng)中的自放電水平提高，現(xiàn)在認(rèn)為這種神經(jīng)系統(tǒng)過度活動(dòng)是由于信號(hào)輸入的改變?cè)斐傻?。?qiáng)聲暴露(持續(xù)1 h，頻率10 kHz，124 dB)后會(huì)產(chǎn)生一個(gè)強(qiáng)度弱但是持久的聽閾損失(最少需要6周才能恢復(fù))，這可能與下丘腦的過度興奮活動(dòng)相關(guān)，并且與耳蝸核的閾值損失有關(guān)聯(lián)[2]，分析原因是由于強(qiáng)聲暴露使內(nèi)耳失去了正常的刺激輸入，并使得中樞神經(jīng)元發(fā)生一系列的可塑性調(diào)整，導(dǎo)致其活動(dòng)性增強(qiáng)、異常釋放增多以及神經(jīng)同步活動(dòng)增加等[3]。黃治物等[4]在實(shí)驗(yàn)性研究中以耳蝸神經(jīng)活動(dòng)的平均譜(ASECA)為指標(biāo)觀察不同聲刺激條件下耳蝸神經(jīng)相應(yīng)的電活動(dòng)，結(jié)果顯示ASECA上升可能是蝸神經(jīng)纖維同步性自發(fā)放電活動(dòng)增強(qiáng)所致。另有研究對(duì)噪聲性耳蝸損傷后的豚鼠進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)下丘神經(jīng)元γ-氨基丁酸受體(GABAR)含量隨噪聲暴露后時(shí)間的延長(zhǎng)而變化的規(guī)律與其電生理變化的規(guī)律一致，噪聲暴露耳蝸損傷后，豚鼠下丘神經(jīng)元對(duì)純音刺激編碼機(jī)制發(fā)生改變，并隨噪聲暴露后時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生變化[5]。此外，趙久晗等[6]用水楊酸鈉(350 mg/kg)誘導(dǎo)建立大鼠耳鳴動(dòng)物模型，并采用玻璃微電極單細(xì)胞內(nèi)方式記錄聽覺皮層神經(jīng)元的電生理變化，結(jié)果顯示水楊酸鈉耳鳴模型組動(dòng)物的皮質(zhì)中約1/3聽覺皮質(zhì)神經(jīng)元對(duì)聲音刺激表現(xiàn)為持續(xù)性反應(yīng)，有1/3神經(jīng)元表現(xiàn)為陣發(fā)性反應(yīng)，另1/3的神經(jīng)元表現(xiàn)為間歇性反應(yīng)，也說明了水楊酸鈉誘導(dǎo)耳鳴大鼠聽覺皮質(zhì)中的持續(xù)性反應(yīng)神經(jīng)元的電生理變化可能與耳鳴相關(guān)。Mahlke等[7]則發(fā)現(xiàn)在聽覺系統(tǒng)的丘腦皮質(zhì)回路內(nèi)，耳鳴相關(guān)活動(dòng)的增加是由于中樞神經(jīng)系統(tǒng)代償外周神經(jīng)輸入的減少，最終導(dǎo)致聽覺皮質(zhì)的自發(fā)放電活動(dòng)增加，進(jìn)而引起耳鳴感知。

長(zhǎng)期使用水楊酸鈉會(huì)永久性地降低機(jī)體耳蝸復(fù)合動(dòng)作電位的幅度，其電位損失主要是在低頻區(qū)和高頻區(qū)，而中間頻率區(qū)(10～20 kHz)的損失最少[8]，另有研究記錄大鼠的外側(cè)杏仁核以及聽覺皮質(zhì)在水楊酸鹽處理前后的功能變化，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元的活動(dòng)在低于10 kHz或高于20 kHz的頻帶停留在低強(qiáng)度，但是在中間頻帶(10～20 kHz)的活動(dòng)卻極大增強(qiáng)，而中間頻帶與耳鳴音調(diào)相關(guān)[9]；并且這些頻率相關(guān)的變化導(dǎo)致來自很多外側(cè)杏仁核神經(jīng)元的頻率感受區(qū)頻率響應(yīng)函數(shù)(FRF)向10～20 kHz頻帶遷移，因此放大了這一區(qū)域的活動(dòng)。當(dāng)用微量注射器向杏仁核注射水楊酸鹽時(shí)，在明顯增加聽皮質(zhì)(AC)局部電位幅度的同時(shí)選擇性地增強(qiáng)了AC神經(jīng)元在中間頻帶的活動(dòng)性。上述研究表明，系統(tǒng)性運(yùn)用水楊酸鹽能夠誘導(dǎo)杏仁核中的過度神經(jīng)活動(dòng)以及音質(zhì)轉(zhuǎn)變，向杏仁核中注入水楊酸鹽能明顯提高AC的發(fā)聲活動(dòng)，這種改變可能增加耳鳴的感知力。水楊酸鈉誘導(dǎo)的AC過度活動(dòng)起源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，杏仁核會(huì)加強(qiáng)這些作用。水楊酸鈉能誘導(dǎo)AC的音質(zhì)變化，推測(cè)與神經(jīng)相關(guān)的耳鳴是由特定頻率決定的耳蝸功能損失以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的過度活動(dòng)造成的。

畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(distortion production otoacoustic emissions，DPOAE)有良好的頻率特性，可反映聽毛細(xì)胞在相關(guān)頻率上的功能狀態(tài)，是評(píng)估耳鳴程度(無聽力障礙)的一個(gè)較好的工具[10]。DPOAE的測(cè)試對(duì)反映聽力損失的頻率成分有臨床意義。有學(xué)者對(duì)160例聽力正常伴耳鳴的患者進(jìn)行DPOAE測(cè)試，以120例聽力正常且無耳鳴的健康者為對(duì)照組。耳鳴組中，DPOAE測(cè)試在各頻率點(diǎn)的檢出率均顯著低于對(duì)照組[11]。耳鳴組經(jīng)過治療后，耳聲發(fā)射在高頻段的反應(yīng)幅度明顯提高，由此得出結(jié)論：耳鳴的產(chǎn)生可能與耳蝸外毛細(xì)胞早期損傷導(dǎo)致的高頻聽力損失相關(guān)[11]，DPOAE檢測(cè)可反映早期耳蝸病變并可作為耳鳴患者的一種客觀檢查方法。

臨床研究表明聽覺皮質(zhì)電刺激(ACES)在抑制患者耳鳴方面有良好的應(yīng)用前景，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明對(duì)聽覺皮質(zhì)的刺激明顯抑制了耳鳴現(xiàn)象，但ACES并不能在沒有發(fā)生耳鳴現(xiàn)象的動(dòng)物模型中起到改變作用[12]，這些結(jié)論表明耳鳴可能更多的與聽力中樞的相關(guān)進(jìn)程相聯(lián)系而不僅是外圍水平的聽力損失，電刺激對(duì)耳鳴的作用可能與恢復(fù)耳鳴造成的聽覺系統(tǒng)異常改變相關(guān)。

2 耳鳴相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)的研究進(jìn)展

2.1 興奮性及抑制性氨基酸的可塑性漸變 眾所周知，聽覺通路中神經(jīng)元活動(dòng)是通過興奮和抑制傳入來調(diào)節(jié)的，興奮和抑制的失平衡可能是導(dǎo)致耳鳴的主要原因。谷氨酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最重要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在聽覺系統(tǒng)有廣泛分布。Potashner等[13]發(fā)現(xiàn)單側(cè)耳蝸損毀后，耳蝸核、橄欖耳蝸束以及中腦等組織中谷氨酸能神經(jīng)遞質(zhì)釋放增加，認(rèn)為活躍的谷氨酸能神經(jīng)活動(dòng)與聽力損失和耳鳴有關(guān)。谷氨酸受體分為兩類：一類為離子型受體〔主要是N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)〕，其與離子通道偶聯(lián)，形成受體通道復(fù)合物，介導(dǎo)快信號(hào)傳遞。Sahley等[14]發(fā)現(xiàn)在高壓力時(shí)期耳蝸Ⅰ類聽覺樹突內(nèi)生強(qiáng)啡肽介導(dǎo)的谷氨酸興奮性中毒，將會(huì)使慢性的主觀神經(jīng)性耳鳴惡化，推測(cè)其可能機(jī)制為水楊酸鈉通過增強(qiáng)谷氨酸對(duì)耳蝸的NMDAR的作用引起的一種急性的興奮性中毒，導(dǎo)致耳蝸Ⅰ類聽覺神經(jīng)中樞性耳鳴；其次，強(qiáng)啡肽本身也可參與NMDAR介導(dǎo)的興奮性中毒。后來的研究證實(shí)了上述觀點(diǎn)：水楊酸鹽能抑制耳蝸環(huán)氧酶，從而導(dǎo)致花生四烯酸的水平提高，而花生四烯酸作用于NMDAR可以增強(qiáng)NMDAR對(duì)谷氨酸的應(yīng)答。另一類谷氨酸受體屬于代謝型受體(mGluRs)，其與膜內(nèi)G-蛋白偶聯(lián)。這些受體被激活后通過G-蛋白效應(yīng)酶、腦內(nèi)第二信使等組成的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)起作用，產(chǎn)生較緩慢的生理反應(yīng)[15-16]。目前，聲音誘發(fā)的聽覺系統(tǒng)中神經(jīng)元點(diǎn)燃抑制機(jī)制尚不明確，但這種抑制可能與在適當(dāng)?shù)穆曇粞诒蜗聹p弱或消除耳鳴的現(xiàn)象有關(guān)。Voytenko等[17]研究發(fā)現(xiàn)聲刺激能引起70%下丘神經(jīng)元自發(fā)點(diǎn)燃被抑制，但這種抑制可以被Ⅰ型mGluRs拮抗劑逆轉(zhuǎn)。因而Ⅰ型mGluR有望成為治療耳鳴的新靶點(diǎn)。Farazifard等[18]研究表明，應(yīng)用Ⅱ型mGluRs激動(dòng)劑可以同時(shí)阻斷α-氨基-3羥基-5甲基-4異惡唑受體(AMPAR)介導(dǎo)的興奮性突觸后電位(EPSCs)和γ-氨基丁酸A受體(GABAAR)介導(dǎo)的抑制性突觸后電位(IPSCs)，且這種現(xiàn)象可被Ⅱ型mGluRs拮抗劑逆轉(zhuǎn)，其研究還表明下丘Ⅱ型mGluRs可能通過突觸前抑制減少遞質(zhì)的釋放，而同時(shí)調(diào)節(jié)谷氨酸能和氨基丁酸能的突觸傳遞。另外，研究還發(fā)現(xiàn)Ⅱ型mGluRs激動(dòng)劑對(duì)神經(jīng)元點(diǎn)燃沒有作用，相反其拮抗劑能夠提高48%下丘神經(jīng)元的激活，表明Ⅱ型mGluRs在調(diào)節(jié)下丘神經(jīng)元的興奮性方面發(fā)揮著重要作用[17]。此外，Ⅲ型mGluRs則主要是維持興奮性突觸作用于下丘分泌素神經(jīng)元的緊張性抑制作用，而下丘分泌素神經(jīng)元在調(diào)節(jié)下丘興奮中發(fā)揮著重要作用[19]。

為了代償外周傳入信號(hào)的減少，中樞神經(jīng)系統(tǒng)除了正調(diào)節(jié)興奮性神經(jīng)遞質(zhì)及其受體的含量外，還會(huì)負(fù)調(diào)節(jié)抑制神經(jīng)遞質(zhì)以及其受體的含量，這種代償導(dǎo)致的可塑性改變無疑也與耳鳴產(chǎn)生有關(guān)。γ-氨基丁酸(GABA)和甘氨酸是主要的中樞性抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。GABA主要存在于聽覺通路中的耳蝸、耳蝸核、下丘和聽覺皮質(zhì)。王豐等[5]應(yīng)用噪聲暴露導(dǎo)致豚鼠耳蝸損傷，噪聲暴露后1、11、21 d組中，GABA和GABAAR的含量明顯減少。Argence等[20]發(fā)現(xiàn)在進(jìn)行單側(cè)聽力剝奪實(shí)驗(yàn)中，對(duì)側(cè)下丘谷氨酸脫羧酶67(GAD67)表達(dá)明顯下降，而谷氨酸脫羧酶能催化谷氨酸脫羧形成GABA，這可以間接表明在對(duì)側(cè)下丘發(fā)生了GABA的下調(diào)。Sun等[21]發(fā)現(xiàn)在聽覺皮質(zhì)應(yīng)用GABAAR拮抗劑后，聽覺皮質(zhì)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)幅度顯著升高，單神經(jīng)纖維自發(fā)的和誘發(fā)的放電活動(dòng)也明顯增加。而在耳蝸損傷后，于動(dòng)物聽覺皮質(zhì)再用GABAAR拮抗劑，LFP很少或幾乎無變化，也表明耳蝸損傷能降低GABA介導(dǎo)的抑制作用。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果反映了機(jī)體通過下調(diào)GABA神經(jīng)遞質(zhì)及其受體以代償耳蝸切除后傳入信號(hào)的減少。而與上述現(xiàn)象相符合的是在水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴大鼠實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，水楊酸鈉可以下調(diào)大鼠耳蝸神經(jīng)節(jié)谷氨酸脫羧酶的產(chǎn)生[22]，并使聽覺通路上各級(jí)神經(jīng)元GABAAR結(jié)合位點(diǎn)數(shù)量顯著降低[23]。

腦干聽覺傳導(dǎo)通路的有關(guān)核團(tuán)中，抑制性的甘氨酸能突觸在聽覺信息的處理中有重要作用。番木鱉堿(strychnine)能和甘氨酸受體特異性結(jié)合，定量分析番木鱉堿可以檢測(cè)甘氨酸受體的活性和表達(dá)，Suneja等[24]應(yīng)用此法來檢測(cè)甘氨酸的含量，發(fā)現(xiàn)在單側(cè)耳蝸損毀后再損傷同側(cè)的腹側(cè)耳蝸核和上橄欖，甘氨酸受體的含量下降，在同側(cè)的耳蝸背核和對(duì)側(cè)腹側(cè)耳蝸核前部，該受體與番木鱉堿的結(jié)合也表現(xiàn)不足。后來Yan等[25]研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)加入蛋白激酶C(PKC)激動(dòng)劑、蛋白激酶A(PKA)激動(dòng)劑、鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ(calciumcalmodulin-dependent protein kinase，CaMKⅡ)抑制劑后能夠使甘氨酸受體恢復(fù)表達(dá)。Zhang等[26]發(fā)現(xiàn)當(dāng)單側(cè)耳蝸損毀后，耳蝸背核內(nèi)的甘氨酸和內(nèi)側(cè)核的梯形體內(nèi)的GABA含量下降，但當(dāng)使用PKC抑制劑后可以逆轉(zhuǎn)這種變化，這表明在這些核團(tuán)中一些突觸PKC起負(fù)調(diào)節(jié)甘氨酸和GABA的作用，可以通過限制PKC的活性來改善耳鳴癥狀。

2.2 乙酰膽堿及其受體變化與聽覺中樞可塑性 乙酰膽堿是一種在中樞可塑性方面扮演重要角色的神經(jīng)遞質(zhì)。聽覺皮質(zhì)接受來自基地前腦的膽堿能神經(jīng)支配，耳蝸接受來自上橄欖復(fù)合體膽堿能神經(jīng)纖維的支配，而大部分剩余的聽覺通路則接受腦橋中腦被蓋區(qū)的核團(tuán)支配。乙酰膽堿受體主要有N受體和M受體兩類。乙酰膽堿N受體在聽覺傳出系統(tǒng)和橄欖-耳蝸束通路上發(fā)揮著重要作用，而聽覺傳出系統(tǒng)和橄欖-耳蝸束的功能是調(diào)節(jié)外毛細(xì)胞對(duì)寬頻聲音和噪聲環(huán)境下聲音感覺的處理。已經(jīng)有研究表明，乙酰膽堿N受體(主要是α9和α10)通過突觸中的鈣庫(kù)、第二信使信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)等作用來調(diào)控聽覺傳出系統(tǒng)的功能；且外毛細(xì)胞的替代和補(bǔ)充機(jī)制也由α9和α10受體通過突觸的鈣庫(kù)、第二信使傳導(dǎo)系統(tǒng)和直接蛋白-蛋白相互作用來介導(dǎo)，這種蛋白-蛋白相互作用中的一種鞘脂激活蛋白原是皂苷的前體，而皂苷可以參與細(xì)胞死亡的預(yù)防，這提示α9和α10受體可能成為治療各種耳疾的潛在靶點(diǎn)。除了α9和α10受體外，α7受體在聽覺系統(tǒng)中的表達(dá)及功能研究也越來越受關(guān)注[27]。Morley等[28]發(fā)現(xiàn)α7受體的mRNA和蛋白在耳蝸核、下丘、內(nèi)側(cè)上橄欖核、外側(cè)上橄欖、外側(cè)丘系腹核及上橄欖旁核的特定區(qū)域都有表達(dá)，認(rèn)為乙酰膽堿N受體在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞內(nèi)鈣離子的調(diào)控方面發(fā)揮著重要作用，而α7受體則能同步突觸活動(dòng)和穩(wěn)定突觸，這使其在聽覺系統(tǒng)可塑性平衡調(diào)節(jié)中發(fā)揮主要作用。Rogers等[29]研究還發(fā)現(xiàn)在小鼠聽覺系統(tǒng)發(fā)育過程中α7受體在神經(jīng)細(xì)胞和非神經(jīng)細(xì)胞都有表達(dá)，認(rèn)為α7受體可能通過多種途徑影響聽覺功能。較多研究均證明，α7受體分別在神經(jīng)細(xì)胞和非神經(jīng)細(xì)胞上均有表達(dá)，特別是在神經(jīng)生長(zhǎng)發(fā)育、信號(hào)傳遞和炎性反應(yīng)等多個(gè)方面具有調(diào)節(jié)作用，如在動(dòng)物模型中α7受體激動(dòng)劑能改善感覺門控和提高認(rèn)知能力，現(xiàn)已是治療癲癇、精神分裂癥、帕金森綜合征的研究熱點(diǎn)[30-32]，目前已知，α7受體功能與快速去敏化(desensitize rapidly)和升高Ca2+∶Na+滲透比有關(guān)[32]。Martin等[33]研究證實(shí)α7受體激活劑能提高精神分裂癥患者P50聽閾和認(rèn)知度，并認(rèn)為其可能與提高GABA的釋放有關(guān)，推測(cè)α7受體可能對(duì)耳鳴具有治療作用。

耳蝸核突觸乙酰膽堿M受體參與調(diào)控神經(jīng)元自發(fā)放電。Jin等[34]用非選擇性毒蕈堿的受體拮抗劑1—[N-甲基-3H]東莨菪堿來驗(yàn)證耳蝸損毀對(duì)M受體的影響，發(fā)現(xiàn)在正常小鼠組，拮抗劑在耳蝸背核的顆粒區(qū)結(jié)合最強(qiáng)，隨后是在梭形細(xì)胞，耳蝸背核的深層，但是在耳蝸核的前腹側(cè)和后腹部結(jié)合的很少；然而，在進(jìn)行單側(cè)耳蝸損毀以后，在耳蝸神經(jīng)核的前腹側(cè)和耳蝸后腹部，以及與其有聯(lián)系的損傷側(cè)顆粒區(qū)與拮抗劑結(jié)合的受體逐漸增多。以上結(jié)果表明耳蝸損傷后，耳蝸核乙酰膽堿M受體發(fā)生了可塑性變化。另外Godfrey等[35]研究發(fā)現(xiàn)，噪聲暴露導(dǎo)致耳鳴的倉(cāng)鼠的耳蝸核的顆粒區(qū)，上橄欖的背側(cè)區(qū)和聽覺皮質(zhì)，乙酰轉(zhuǎn)移酶的活性明顯增強(qiáng)。乙酰轉(zhuǎn)移酶能催化膽堿轉(zhuǎn)化為乙酰膽堿，說明在這些區(qū)域發(fā)生了乙酰膽堿的上調(diào)。Miko等[36]最近得出結(jié)論，乙酰膽堿還能通過對(duì)氨基丁酸能的下丘細(xì)胞作用或通過影響下丘突觸而影響下丘的興奮性。

2.3 五羥色胺(5-HT)及其受體與中樞神經(jīng)可塑性變化 5-HT能神經(jīng)元的胞體通常位于聽覺系統(tǒng)以外，但5-HT能神經(jīng)纖維末梢廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的大多數(shù)聽覺核團(tuán)如耳蝸核、下丘、外側(cè)丘系核和上橄欖復(fù)合體，故5-HT能神經(jīng)纖維的主要作用是對(duì)聲音覺察并進(jìn)行調(diào)控。在水楊酸鹽誘導(dǎo)的沙鼠耳鳴模型中，中縫背核的神經(jīng)元被激活，這些神經(jīng)元中有一半是血清素能神經(jīng)元，表明5-HT在中樞性耳鳴形成機(jī)制中起重要作用。Caperton等[37]發(fā)現(xiàn)水楊酸鹽誘導(dǎo)的耳鳴能激活血清素能神經(jīng)元中的有喙血清素細(xì)胞群，包括中縫背核細(xì)胞群。認(rèn)為這些神經(jīng)元的激活不直接影響耳蝸的功能，而是影響與耳鳴相關(guān)的聽覺區(qū)域或非聽覺區(qū)來產(chǎn)生耳鳴感覺，如：激活的有喙血清素能神經(jīng)元，通過對(duì)邊緣系統(tǒng)的信號(hào)輸出導(dǎo)致產(chǎn)生耳鳴感覺，同時(shí)也導(dǎo)致耳蝸背核、下丘和聽覺皮質(zhì)極度活躍。另外Wang等[38]研究表明，5-HT能顯著升高大鼠下丘GABA能自發(fā)神經(jīng)突觸后電流(sIPSCs)，而水楊酸鈉能夠通過壓抑突觸前GABA神經(jīng)元的自發(fā)放電而抑制GABA能自發(fā)抑制性突觸后電流。Miko等[36]隨后發(fā)現(xiàn)用相應(yīng)的拮抗物阻斷mGluRs，乙酰膽堿，GABAAR和甘氨酸受體會(huì)導(dǎo)致下丘動(dòng)作電位增益提高，然而，當(dāng)用拮抗劑阻斷離子型血清素3受體〔5-HT(3)R〕時(shí)，該動(dòng)作電位增益會(huì)被阻斷。這些結(jié)果表明5-HT受體在調(diào)節(jié)神經(jīng)元的興奮性和抑制性中起重要作用。

5-HT對(duì)不同類型的神經(jīng)元作用不同，或興奮或抑制，這可能與不同類型受體分布不同有關(guān)系，趙德安等[39]應(yīng)用免疫組化方法發(fā)現(xiàn)，水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴大鼠組的5-HT1B受體表達(dá)低于空白對(duì)照組和0.9%氯化鈉溶液組；而耳鳴組5-HT2C受體的表達(dá)顯著高于空白對(duì)照組和0.9%氯化鈉溶液組。這表明5-HT1B受體與5-HT2C受體可能是一對(duì)作用相反的受體。此外，Hurley等[40]認(rèn)為下丘神經(jīng)元中突觸前5-HT1B受體能下調(diào)GABAAR介導(dǎo)的抑制作用，導(dǎo)致一些神經(jīng)元誘發(fā)活動(dòng)水平的提高。臨床上許多被用于預(yù)防和急性治療偏頭痛的5-HT1B受體興奮劑對(duì)耳鳴也具有治療作用，其藥理作用可能是通過作用于5-HT1B受體自身受體強(qiáng)烈地抑制5-HT的釋放。另Yu等[41]應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)檢測(cè)小鼠耳蝸神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的對(duì)外鉀電流變化，發(fā)現(xiàn)當(dāng)應(yīng)用了5-HT后對(duì)外鉀電流瞬間增高，但當(dāng)使用5-HTR1A阻斷劑后，則抵消了5-HT的增強(qiáng)作用，這說明5-HTR1A在聽覺傳導(dǎo)通路中也發(fā)揮重要作用。可以推論，水楊酸鈉誘導(dǎo)耳鳴大鼠的5-HT發(fā)生變化時(shí)，還可通過下調(diào)受體5-HTR1B和5-HTR1A水平，上調(diào)受體5-HTR2C水平等對(duì)大鼠聽覺通路5-HT系統(tǒng)產(chǎn)生影響，從而導(dǎo)致耳鳴產(chǎn)生。

3 與中樞神經(jīng)可塑性變化相關(guān)的基因表達(dá)情況

研究表明，由于聽力損失而導(dǎo)致聽覺中樞功能改變時(shí)，聽覺中樞的相關(guān)基因發(fā)生了可塑性的變化。早期即刻反應(yīng)基因c-fos能夠反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能活動(dòng)的變化，被普遍認(rèn)為與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能可塑性有關(guān)。王元坦等[42]認(rèn)為c-fos能夠反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能活動(dòng)的變化。賈明輝等[43]通過檢測(cè)神經(jīng)元功能可塑性標(biāo)記物即刻反應(yīng)基因c-fos，發(fā)現(xiàn)耳鳴大鼠聽覺皮質(zhì)中c-fos表達(dá)明顯增多，提示耳鳴大鼠聽覺皮質(zhì)中發(fā)生了功能可塑性改變，這種改變可能在耳鳴的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。Mahlke等[7]研究發(fā)現(xiàn)c-fos和活性調(diào)節(jié)的細(xì)胞骨架蛋白Arg3.1免疫反應(yīng)性神經(jīng)元(immunoreactive neurons，IRN)在由水楊酸鈉誘導(dǎo)耳鳴模型后的杏仁核中的含量相比聲音刺激或者0.9%氯化鈉溶液注射有大幅度的增加，而在下丘c-fos IRN的數(shù)量在注射水楊酸鈉后明顯降低。在耳蝸腹側(cè)核c-fos IRN經(jīng)常在聽覺刺激后或者注射0.9%氯化鈉溶液之后出現(xiàn)，然而，在注射水楊酸鈉以后均不表達(dá)。由此推測(cè)c-fos和c-fos IRN在耳鳴誘導(dǎo)處理后的特異性出現(xiàn)，以及在聽覺皮質(zhì)以及杏仁核中的共同表現(xiàn)可能是耳鳴相關(guān)的一個(gè)重要的特征。Tan等[44]監(jiān)測(cè)了創(chuàng)傷后中樞神經(jīng)系統(tǒng)中可塑性變化在分子水平的變化，結(jié)果c-fos和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)基因在螺旋神經(jīng)節(jié)表達(dá)增加，Arg3.1/arc和BDNF(稍后)在聽覺皮質(zhì)表達(dá)下降。下丘層面自發(fā)性地出現(xiàn)電脈沖活動(dòng)，同時(shí)在下丘可以發(fā)現(xiàn)大量增加的BDNF和GABA興奮性神經(jīng)元，這些數(shù)據(jù)清楚地表明Arg3.1/arc和BDNF在調(diào)節(jié)創(chuàng)傷性誘導(dǎo)的聽覺系統(tǒng)功能活動(dòng)改變以及與神經(jīng)系統(tǒng)功能可塑性反應(yīng)方面有重要的作用。

同樣作為早期即刻反應(yīng)基因家族成員的活性調(diào)節(jié)的細(xì)胞骨架蛋白Arg3.1在中樞可塑性變化中也起到了很大作用。Panford-Walsh等[45]使用反轉(zhuǎn)錄酶連鎖反應(yīng)，原位雜交以及免疫組化等技術(shù)檢測(cè)耳蝸核局部以及系統(tǒng)性應(yīng)用水楊酸鈉后，得到了一個(gè)明確的現(xiàn)象，即BDNF mRNA在耳蝸神經(jīng)節(jié)表達(dá)增加，而Arg3.1在聽覺皮質(zhì)的表達(dá)則明顯降低。而在局部使用GABAAR調(diào)節(jié)物質(zhì)咪達(dá)唑侖不僅逆轉(zhuǎn)了BDNF在耳蝸核的表達(dá)，同時(shí)也減少了Arg3.1在皮質(zhì)的表達(dá)，表明在耳蝸核中BDNF表達(dá)的同時(shí)也觸發(fā)了Arg3.1在聽覺皮質(zhì)表達(dá)的減少。不僅如此，局部咪達(dá)唑侖的使用在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中成功地減少了耳鳴的感覺，這些發(fā)現(xiàn)也作為了Arg3.1和BDNF是聽覺系統(tǒng)中活性變化的標(biāo)志物的有力證據(jù)。有學(xué)者對(duì)耳鳴患者血漿中BDNF的水平做了一個(gè)評(píng)估[46]，該評(píng)估在43名耳鳴患者和30名健康人之間進(jìn)行，耳鳴的嚴(yán)重程度以及情緒變化通過耳鳴殘疾評(píng)估量表和醫(yī)院焦慮和抑郁量表來評(píng)估，發(fā)現(xiàn)血漿中BDNF水平隨著耳鳴的嚴(yán)重程度變化，這也說明了血漿中BDNF水平可作為客觀評(píng)價(jià)耳鳴的一項(xiàng)指標(biāo)。

胡守森等[47]通過觀察水楊酸鹽誘導(dǎo)的慢性大鼠耳鳴模型聽覺皮質(zhì)早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因-1(early growth response gene-1，Egr-1)的表達(dá)，結(jié)果慢性注射3、7、14 d組大鼠聽覺皮質(zhì)的Egr-1 mRNA及其蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照組低；急性注射2 h組、停藥后恢復(fù)14 d組、恢復(fù)28 d組大鼠聽覺皮質(zhì)Egr-1 mRNA及其蛋白表達(dá)水平與正常對(duì)照組間無明顯差異，表明長(zhǎng)期注射水楊酸鹽導(dǎo)致耳鳴的大鼠聽覺皮質(zhì)中與中樞神經(jīng)可塑性密切相關(guān)的Egr-1基因表達(dá)可逆性下調(diào)，聽覺皮質(zhì)神經(jīng)元發(fā)生了可塑性改變，據(jù)此推測(cè)聽覺皮質(zhì)神經(jīng)元可塑性改變可能參與了耳鳴的形成和發(fā)展。Oh等[48]切除雙側(cè)耳蝸后，發(fā)現(xiàn)聽覺皮質(zhì)內(nèi)早期即刻反應(yīng)基因(Egr-1、2、3、4、c-fos等)和神經(jīng)可塑性相關(guān)基因(活性調(diào)節(jié)的細(xì)胞骨架蛋白Arc、突觸回蛋白1、BDNF等)在2周的時(shí)候表達(dá)下降，然后在第4周又上升，神經(jīng)傳遞相關(guān)性基因(Gabra5、Chrnb3、Chrne等)在12周時(shí)表達(dá)下降。這些基因表達(dá)的上升和下降正好和耳鳴的發(fā)生過程相符合，故可認(rèn)為耳鳴的發(fā)生與基因表達(dá)的可塑性可能有較大關(guān)聯(lián)。

綜上所述，中樞神經(jīng)可塑性變化可能是耳鳴發(fā)生的重要機(jī)制之一，現(xiàn)有研究均提示，在耳鳴情況下聽覺通路的電生理，遞質(zhì)以及相關(guān)基因表達(dá)均發(fā)生了可塑性改變。因此，深入了解耳鳴的發(fā)生機(jī)制有望為臨床耳鳴治療提供新的作用靶點(diǎn)和尋求新的干預(yù)策略。

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