馬 懿 吳賽珠 龔 勛 彭文杰 湯 敏 鐘元林 湯 展

(南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院心內(nèi)科，廣東 廣州 510515)

自噬是由細(xì)胞質(zhì)起源的自噬體與溶酶體融合降解胞內(nèi)異常分子和長壽命蛋白的過程，是一種特殊分解代謝途徑。它在細(xì)胞代謝、存活與分化等方面都具有重要作用。當(dāng)前社會正朝向老齡化社會演變，關(guān)注老齡化相關(guān)疾病的研究顯得格外重要。隨著細(xì)胞生物科學(xué)與老年醫(yī)學(xué)的相互交叉發(fā)展，自噬在老年性心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、臟器衰老等方面的研究中取得進展。研究已發(fā)現(xiàn)通過對自噬調(diào)控能夠?qū)ρ芙M成細(xì)胞的增殖、分化和轉(zhuǎn)歸起到重要的調(diào)控作用。本文對自噬與血管衰老方面的研究進展進行綜述。

1 自噬概述

1.1自噬的概念和類型 自噬是一種高度保守的細(xì)胞機制，主要針對長壽蛋白和損傷細(xì)胞器的降解與循環(huán)利用〔1〕。它屬于分解代謝過程，通過循環(huán)利用細(xì)胞內(nèi)成分如蛋白、核糖體、脂質(zhì)甚至整個細(xì)胞器來應(yīng)對各種應(yīng)激反應(yīng)。在整個營養(yǎng)供應(yīng)中，合成代謝占據(jù)了優(yōu)勢，自噬則維持較低水平，以保證正常的細(xì)胞代謝平衡與生存。在饑餓過程中，既可通過不足的營養(yǎng)供應(yīng)，也可通過有缺陷的生長因子信號通路，快速誘導(dǎo)自噬激活。自噬降解后的產(chǎn)物主要有兩種作用：提供生物合成所必需的基質(zhì)、底物與補充細(xì)胞內(nèi)能量，而后者的主要貢獻(xiàn)來源于氨基酸、脂肪酸的降解。目前自噬有三種類型：小自噬、分子伴侶調(diào)控自噬和大自噬。小自噬是溶酶體膜自動包裹長壽命蛋白等分子物質(zhì)進行降解。在分子伴侶自噬中，錯誤折疊蛋白通過熱休克蛋白Hsp70轉(zhuǎn)位到溶酶體進行清除。大自噬是起源于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜，經(jīng)延展后包裹待降解蛋白形成自噬體，與溶酶體融合后進行降解。

1.2自噬相關(guān)蛋白與分子構(gòu)成 自噬過程本身十分復(fù)雜，包括了膜體啟動、囊泡轉(zhuǎn)換和載體降解。而整個自噬過程受到了自噬相關(guān)基因(ATG)的調(diào)控。這些ATG基因在自噬過程的不同階段均發(fā)揮著重要作用。自噬途徑的分子構(gòu)造包括了以下四個亞組：①Atg1激酶復(fù)合體：這個信號復(fù)合物控制了自噬體形成的早期階段，最近有研究發(fā)現(xiàn)Atg1在自噬晚期階段也發(fā)揮重要的作用〔2〕。ULK1/2是酵母Atg1的哺乳動物同系物。哺乳動物細(xì)胞在營養(yǎng)富足的條件下，mTOR能磷酸化和滅活ULKs。通過饑餓或者雷帕霉素干預(yù)，可激活ULK1和ULK2，磷酸化Atg13和FIP200，它們在自噬流中起關(guān)鍵作用。②mAtg9信號通路：通過在前自噬體結(jié)構(gòu)(PAS)中添加新的膜材料對自噬體雙層膜結(jié)構(gòu)進行組裝。Atg11、Atg23和Atg27能控制Atg9到達(dá)PAS的順勢運動；反之，Atg1-Atg13、Atg2-Atg18和Atg14是參與Atg9的逆向運動返回外圍靶點〔3〕。③磷脂酰肌醇3-羥激酶 (PI3K)/Vps34復(fù)合體：多樣化的Atg蛋白被募集到吞噬泡中，通過結(jié)合到由Vps34 (在哺乳動物細(xì)胞中的PI3K)生成的PIP，參與自噬體的構(gòu)成。這其中包括Atg18、Atg20、Atg21和Atg24。Vps34構(gòu)成了兩種不同的PI3K復(fù)合物：復(fù)合物1(Vps34，Vps15/p150，Atg6/beclin 1和mAtg14)和復(fù)合物2(Vps34，Vps15，Atg6和Vps38)〔4〕。④兩種泛素樣蛋白共軛系統(tǒng)：兩種與泛素共軛級聯(lián)相似的級聯(lián)特征有助于吞噬泡的延長與自噬體的形成。Atg12被一種泛素樣E1酶Atg7激活，隨后轉(zhuǎn)移到泛素樣E2酶Atg10上。在其他泛素樣級聯(lián)中，LC3作為Atg8的哺乳動物同系物在Atg4暴露于羧基末端的甘氨酸位點進行裂解〔5〕。

2 血管衰老

2.1衰老與自噬 衰老是一種復(fù)雜的病理生理過程，生物體內(nèi)損傷的分子、細(xì)胞、組織不斷進行積累造成生物體功能的持續(xù)衰退、疾病易感性增加、最終導(dǎo)致死亡。目前有很多報道證實了自噬在延緩衰老中發(fā)揮作用的依據(jù)。整個衰老過程中，自噬相關(guān)蛋白的豐度與自噬活性都有不同程度的下降。生物體的衰老會減少不同組織自噬體的構(gòu)成和功能，這包括了自噬在內(nèi)的蛋白水解能力以及介導(dǎo)自噬活性的能力。能量限制可以調(diào)節(jié)六月齡小鼠肝臟中的蛋白水解率達(dá)到峰值，而隨著鼠齡的增長逐漸降低。氧化應(yīng)激通過胰島素受體信號通路，使衰老器官的自噬活性逐漸下降〔6〕。也就是說氧化應(yīng)激誘導(dǎo)激活胰島素受體信號通路，而后者抑制了自噬活性。

在很多生物體內(nèi)，運用基因或者藥物性手段延長壽命需要自噬的參與，而缺乏長壽調(diào)控基因的誘導(dǎo)會使大多數(shù)基因表型存在明顯缺陷，而降低或抑制自噬活性〔7〕。目前認(rèn)為，衰老期間大自噬與分子伴侶自噬活性均下降。在轉(zhuǎn)基因小鼠中阻止衰老相關(guān)LAMP-2A蛋白下降，能維持具有功能的分子伴侶自噬，延緩衰老。LAMP-2A在衰老期溶酶體內(nèi)下降的機制被認(rèn)為是發(fā)生在轉(zhuǎn)錄以后，因為衰老并沒有影響LAMP-2A的轉(zhuǎn)錄效率，但是研究發(fā)現(xiàn)了衰老大鼠肝臟中HSP90表達(dá)水平下降〔8〕，因此認(rèn)為熱休克蛋白HSP90在LAMP-2A復(fù)合體的裝配環(huán)節(jié)可能充當(dāng)一個重要的組件?；谶@些，HSP90蛋白也可能是蛋白酶體系統(tǒng)降解的重要調(diào)節(jié)器，分子伴侶自噬通過它們維持蛋白水解通路功能的能力影響了衰老和長壽〔9〕。除了分子伴侶自噬外，大自噬的功能在哺乳動物的衰老組織也會被抑制，特別是依賴于大自噬對存在缺陷的線粒體降解的能力。

2.2血管衰老與自噬干預(yù) 人類的衰老現(xiàn)象被認(rèn)為是一種嚴(yán)重的心血管危險因素。血管結(jié)構(gòu)與細(xì)胞表型功能的衰老變化導(dǎo)致老年人群患粥樣硬化心血管疾病的高危性。對人體動脈粥樣硬化損傷的組織學(xué)研究表明，血管內(nèi)皮細(xì)胞確實存在衰老的形態(tài)學(xué)特征〔10〕。內(nèi)皮細(xì)胞的衰老包含了內(nèi)皮功能失調(diào)、粥樣硬化、內(nèi)皮細(xì)胞抗血栓下降等特征。根據(jù)自由基理論，活性氧簇(ROS)對血管失調(diào)和動脈粥樣硬化有著潛在的連帶責(zé)任。而血管內(nèi)皮一氧化氮(NO)能抵制氧化應(yīng)激狀態(tài)，內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)激活以及后面的NO產(chǎn)物延緩了內(nèi)皮細(xì)胞的衰老〔11〕。

有研究已證實蛋白降解的溶酶體途徑與很多心血管疾病關(guān)系密切。關(guān)注自噬機制的分子解剖學(xué)，就有可能弄清楚自噬在很多心血管疾病發(fā)病過程中的作用〔12〕。血管功能和存活主要依賴于基礎(chǔ)水平的自噬存在。不同方式的能量限制能延長生物體壽命和改善血管壁的舒張功能，這可能和參與自噬誘導(dǎo)胰島素/PI3K信號下降的機制有關(guān)〔13〕。目前明確的應(yīng)激狀態(tài)如營養(yǎng)缺乏和缺氧，均會誘導(dǎo)自噬流的大幅度增加〔14〕，這樣能起到清除缺陷細(xì)胞器、錯誤折疊蛋白和補充營養(yǎng)的作用。在血管細(xì)胞生長過程中，合成代謝與分解代謝過程都被激活，在初期前者占據(jù)主導(dǎo)使得細(xì)胞生長，然而當(dāng)一種新的穩(wěn)態(tài)出現(xiàn)，自噬流增高，使得依賴于生長刺激物質(zhì)的信號通路上下聯(lián)系，自噬會被抑制或者部分抑制。

3 血管組成細(xì)胞衰老與自噬

3.1血管內(nèi)皮細(xì)胞 既往研究證實人類的心血管疾病比如動脈粥樣硬化損傷由氧化應(yīng)激的參與，過多活性氧蔟ROS的產(chǎn)生會導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)出衰老的特征。在動脈粥樣硬化導(dǎo)致的缺血性內(nèi)皮細(xì)胞損傷中，自噬的適度上調(diào)會延遲凋亡和壞死，而未控制的自噬由于過度降解細(xì)胞組成部分而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。最近在體外實驗中已經(jīng)證實了內(nèi)皮細(xì)胞的自噬促進了血管生成〔15〕。在人類冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞中，運用促自噬活性藥物激活沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)進行高表達(dá)的措施可以改善線粒體的功能，減少ROS產(chǎn)物和細(xì)胞內(nèi)的過氧化氫水平，抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的內(nèi)皮衰老〔16〕。在一些病理狀態(tài)下，內(nèi)皮細(xì)胞激活能導(dǎo)致收縮性因子的產(chǎn)生和釋放，包括環(huán)氧化酶來源的縮血管因子(EDCFs)，它們會對抗NO的舒張活動，而ROS通過減少NO來損傷內(nèi)皮細(xì)胞功能。雌激素不足帶來的內(nèi)皮功能失調(diào)是由于NO活性降低的緣故。氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的環(huán)氧化酶依賴性產(chǎn)物可能提示內(nèi)源性雌激素作為抗氧化劑的作用。激素通過抑制ROS產(chǎn)物保存內(nèi)皮依賴的血管舒張〔17〕。內(nèi)源性雌激素的保護作用能穩(wěn)定NO活性，通過誘導(dǎo)自噬激活L-賴氨酸-NO通路阻斷氧化應(yīng)激。

很多心血管疾病會誘導(dǎo)應(yīng)激反應(yīng)，激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信號通路，激酶活化對血管內(nèi)皮產(chǎn)生直接與間接的調(diào)控作用。內(nèi)皮失調(diào)和炎癥細(xì)胞黏附是動脈粥樣硬化的一種早期事件，AMPK參與到了這些事件中〔18〕。在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)中，AMPK的激活減少了炎癥細(xì)胞黏附和轉(zhuǎn)移。有研究表明盡管在血管內(nèi)皮細(xì)胞中AMPKα1亞基表達(dá)較AMPKα2更為廣泛，然而AMPKα2也有很重要的生理效應(yīng)，比如促血管生成和在缺氧條件下調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞分化〔19〕。激活內(nèi)皮細(xì)胞的AMPK在Thr172位點磷酸化eNOS，導(dǎo)致NO產(chǎn)生。這個可能是通過了磷酸化eNOS和HSP90的相互聯(lián)系。除了直接激活A(yù)MPK的基因外，通過磷酸二酯酶抑制劑西諾他唑改變AMP：ATP比率都能增加NO的產(chǎn)生，修復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞功能。除了通過誘導(dǎo)自噬修復(fù)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)損傷的內(nèi)皮細(xì)胞之外，ROS產(chǎn)物和AMPK激活也參與自噬介導(dǎo)血管生成。在體內(nèi)實驗中，趨化素能促進內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和管腔形成〔20〕。AMPKα參與了趨化素誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞自噬中，并呈時間依賴方式調(diào)控下游通路ACC的磷酸化，這些都提示了ROS在誘導(dǎo)自噬發(fā)生對血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生著復(fù)雜而又密切的生物效應(yīng)，這包括了血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、管腔形成到修復(fù)細(xì)胞衰老等。

3.2血管平滑肌細(xì)胞 動脈粥樣硬化作為動脈管壁內(nèi)膜的一種慢性炎癥疾病，其發(fā)展是以動脈粥樣硬化斑塊形成為特征。大量證據(jù)表明，細(xì)胞死亡是動脈粥樣硬化的主要調(diào)節(jié)因素。細(xì)胞死亡的結(jié)果主要取決于斑塊形成階段和所累積細(xì)胞類型。由于動脈粥樣硬化斑塊中纖維帽的抗張強度主要依賴平滑肌細(xì)胞數(shù)量與其合成膠原蛋白的結(jié)構(gòu)特征，平滑肌細(xì)胞的死亡或者喪失可能是導(dǎo)致斑塊去穩(wěn)定或破裂的主要因素〔21〕。在實驗動物的血管粥樣斑塊纖維帽內(nèi)，變性的平滑肌細(xì)胞具有自噬的特征結(jié)構(gòu)，在運用氧化應(yīng)激方法處理的平滑肌細(xì)胞中常觀察到這些的特征〔22〕。平滑肌細(xì)胞可通過自噬清除變性蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞內(nèi)大分子物質(zhì)或者細(xì)胞器，對于維持自身內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定發(fā)揮重要作用。

在血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)中AMPK激活發(fā)揮血管舒張的作用。在大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞，自噬通過5-氨基-4-甲酰胺咪唑核苷酸(AICAR)誘導(dǎo)的AMPK活化來介導(dǎo)了不依賴內(nèi)皮細(xì)胞和NO形式的舒張狀態(tài)，增加促血管舒張的前列環(huán)素合成。AMPK激活和增加環(huán)氧合酶-2(COX-2)蛋白表達(dá)有關(guān)系，似乎TAK1磷酸化和p38絲裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)激酶通路的下游激活了這種效應(yīng)。增加COX-2表達(dá)代表一種促炎癥反應(yīng)，這樣可能會抵消AMPK激活所產(chǎn)生的一些血管保護作用〔23〕。在VSMCs中AMPK可能通過IP3R調(diào)控鈣離子釋放來調(diào)控細(xì)胞內(nèi)鈣，這可能是AMPK直接血管舒張效應(yīng)的基礎(chǔ)。通過跨膜磷蛋白機制，AMPK可以減少血管收縮性功能障礙。這些都證實了AMPK調(diào)控平滑肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)鈣離子泵(SERCA)應(yīng)激和內(nèi)皮失調(diào)中的作用〔24〕。

除了在AMPK信號通路的認(rèn)識加強，細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換是很多疾病的誘導(dǎo)劑。理解如何調(diào)控VSMC表型和功能的機制對于研發(fā)治療血管衰老的方法很重要，而自噬的重要性也僅在最近才被認(rèn)識〔25〕。在動脈粥樣硬化和血管狹窄階段，VSMCs從收縮型向分泌型轉(zhuǎn)變，則對于血管的功能與穩(wěn)定具有重要作用，分泌型細(xì)胞能起到阻斷細(xì)胞因氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的衰老作用。

4 對老年醫(yī)學(xué)的影響

通過干預(yù)衰老進程可延緩很多衰老相關(guān)疾病，這個被稱之為“長壽紅利”。血管衰老是一種錯綜復(fù)雜的臨床綜合征，它與細(xì)胞內(nèi)生物能效學(xué)的進展性失調(diào)有密切關(guān)系。SIRT1的活性改變在很多衰老相關(guān)疾病中都發(fā)揮作用，因此它可能被利用于延緩衰老、功能減退的老年相關(guān)疾病中。通過誘導(dǎo)自噬對SIRT1的激活看起來有機會實現(xiàn)人類的長壽紅利。研究發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇雖不能增加受試動物模型的壽命，但在血管衰老改變中的有利效應(yīng)值得關(guān)注。白藜蘆醇和SRT1720(一種選擇性的SIRT1激活劑)可以逆轉(zhuǎn)高熱量飲食的老年鼠肝臟脂肪變性〔26〕。在人類的臨床實驗中不可能將長壽作為最初的主要觀察結(jié)果，擁有一些替代指標(biāo)和衰老生物標(biāo)志物是非常必要的，而血管衰老是合理的研究選擇。目前干預(yù)血管衰老的自噬誘導(dǎo)性藥物在該領(lǐng)域具有潛在而可觀的前景。

5 結(jié)束語

研究證明自噬的適度激活能為人們的健康帶來有益的效應(yīng)。目前我們僅僅開始研究Sirtuins的生物效應(yīng)，白藜蘆醇相關(guān)多酚類藥物和他汀類降脂藥物等的自噬誘導(dǎo)特性，但也取得了一定的研究成果。比如：SIRT3干預(yù)調(diào)控血管平滑肌異常代謝與衰老的關(guān)系〔27〕；自噬誘導(dǎo)SIRT1與eNOS-NO軸對血管內(nèi)皮舒張抗老化的密切相關(guān)性〔28〕。由于西方崇尚高熱量消耗和缺乏體育鍛煉的生活方式使得老年群體忽略了權(quán)威健康機構(gòu)的溫馨警示。目前還沒有任何干預(yù)措施能完全延緩人類的衰老。發(fā)達(dá)國家設(shè)立老年人群的健康機構(gòu)開始關(guān)注這方面的進展，相信研究者們會繼續(xù)闡明血管衰老機制和分子機制，使針對血管衰老的干預(yù)靶點不斷增加，為進一步研發(fā)延緩衰老的治療方法帶來希望。

6 參考文獻(xiàn)

1Boya P，Reggiori F，Codogno P.Emerging regulation and functions of autophagy〔J〕.Nat Cell Biol，2013；15(7)：713-20.

2Kijanska M，Peter M.Atg1 kinase regulates early and late steps during autophagy〔J〕.Autophagy，2013；9(2)：249-51.

3Takahashi Y，Meyerkord CL，Hori T，etal.Bif-1 regulates Atg9 trafficking by mediating the fission of Golgi membranes during autophagy〔J〕.Autophagy，2011；7(1)：61-73.

4Jaber N，Zong WX.Class Ⅲ PI3K Vps34：essential roles in autophagy，endocytosis，and heart and liver function〔J〕.Ann N Y Acad Sci，2013；1280：48-51.

5Shaid S，Brandts CH，Serve H，etal.Ubiquitination and selective autophagy〔J〕.Cell Death Differ，2013；20(1)：21-30.

6Gonzalez CD，Lee MS，Marchetti P，etal.The emerging role of autophagy in the pathophysiology of diabetes mellitus〔J〕.Autophagy，2011；7(1)：2-11.

7Chong A，Wehrly TD，Child R，etal.Cytosolic clearance of replication-deficient mutants reveals Francisella tularensis interactions with the autophagic pathway〔J〕.Autophagy，2012；8(9)：1342-56.

8Terro F，Magnaudeix A，Crochetet M，etal.GSM-900MHz at low dose temperature-dependently downregulates α-synuclein in cultured cerebral cells independently of chaperone-mediated-autophagy〔J〕.Toxicology，2012；292(2-3)：136-44.

9Rodriguez-Navarro JA，Cuervo AM.Dietary lipids and agingcompromise chaperone-mediated autophagy by similar mechanisms〔J〕.Autophagy，2012；8(7)：1152-4.

10Stancu CS，Toma L，Sima AV.Dual role of lipoproteins in endothelial cell dysfunction in atherosclerosis〔J〕.Cell Tissue Res，2012；349(2)：433-46.

11Shafique E，Choy WC，Liu Y，etal.Oxidative stress improves coronary endothelial function through activation of the pro-survival kinase AMPK〔J〕.Aging (Albany NY)，2013；5(7)：515-30.

12Salabei JK，Conklin DJ.Cardiovascular autophagy：crossroads of pathology，pharmacology and toxicology〔J〕.Cardiovasc Toxicol，2013；13(3)：220-9.

13Tomada I，Tomada N，Almeida H，etal.Energy restriction and exercise modulate angiopoietins and vascular endothelial growth factor expression in the cavernous tissue of high-fat diet-fed rats〔J〕.Asian J Androl，2012；14(4)：635-42.

14Zhang XJ，Chen S，Huang KX，etal.Why should autophagic flux beassessed〔J〕? Acta Pharmacol Sin，2013；34(5)：595-9.

15Kim KW，Paul P，Qiao J，etal.Autophagy mediates paracrine regulation of vascular endothelial cells〔J〕.Lab Invest，2013；93(6)：639-45.

16Ota H，Eto M，Kano MR，etal.Induction of endothelial nitric oxide synthase，SIRT1，and catalase by statins inhibits endothelial senescence through the Akt pathway〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2010；30(11)：2205-11.

17Virdis A，Taddei S.Endothelial aging and gender〔J〕.Maturitas，2012；71(4)：326-30.

18Zhang M，F(xiàn)ang WY，Qu XK，etal.AMPK activity is down-regulated in endothelial cells of GHS-R(-/-)mice〔J〕.Int J Clin Exp Pathol，2013；6(9)：1770-80.

19Nagata D，Hirata Y.The role of AMP-activated protein kinase in the cardiovascular system〔J〕.Hypertens Res，2010；33(1)：22-8.

20Shen W，Tian C，Chen H，etal.Oxidative stress mediates chemerin-induced autophagy in endothelial cells〔J〕.Free Radic Biol Med，2013；55：73-82.

21von der Thüsen JH，Borensztajn KS，Moimas S，etal.IGF-1 has plaque-stabilizing effects in atherosclerosis by altering vascular smooth muscle cell phenotype〔J〕.Am J Pathol，2011；178(2)：924-34.

22Ryter SW，Lee SJ，Smith A，etal.Autophagy in vascular disease〔J〕.Proc Am Thorac Soc，2010；7(1)：40-7.

23Kim SA，Choi HC.Metformin inhibits inflammatory response via AMPK-PTEN pathway in vascular smooth muscle cells〔J〕.Biochem Biophys Res Comm，2012；425(4)：866-72.

24Eid AA，Lee DY，Roman LJ，etal.Sestrin 2 and AMPK connect hyperglycemia to Nox4-dependent endothelial nitric oxide synthase uncoupling and matrix protein expression〔J〕.Mol Cell Biol，2013；33(17)：3439-60.

25Salabei JK，Hill BG.Implications of autophagy for vascular smooth muscle cell function and plasticity〔J〕.Free Radic Biol Med，2013；65C：693-703.

26Tauriainen E，Luostarinen M，Martonen E，etal.Distinct effects of calorie restriction and resveratrol on diet-induced obesity and Fatty liver formation〔J〕.J Nutr Metab，2011；2011：525094.

27Toniolo A，Warden EA，Nassi A，etal.Regulation of SIRT1 in vascular smooth muscle cells from streptozotocin-diabetic rats〔J〕.PLoS One，2013；8(5)：e65666.

28Takizawa Y，Kosuge Y，Awaji H，etal.Up-regulation of endothelial nitric oxide synthase (eNOS)，silent mating type information regulation 2 homologue 1 (SIRT1) and autophagy-related genes by repeated treatments with resveratrol in human umbilical vein endothelial cells〔J〕.Br J Nutr，2013；11：1-6.