袁學軍,陳忠蔭,陳光宙,陳永敢,范平杰
(瓊州學院生物科學與技術學院,海南 三亞 572000)
靈芝素有“仙草”之譽。靈芝的藥理成分非常豐富,其中有效成分主要包括靈芝多糖、靈芝多肽、三萜類、16種氨基酸、蛋白質(zhì)、甘露酣、香豆精苷、生物堿、有機酸微量元素等。現(xiàn)代藥理與臨床實踐進一步證實靈芝多糖是靈芝扶正固本,滋補強壯,延年益壽的主要成分,對人體具有雙向調(diào)節(jié)作用,所治病種,涉及心腦血管、神經(jīng)、內(nèi)分泌等各個系統(tǒng),尤其對腫瘤、肝臟病變、失眠以及衰老防治作用十分顯著,且無毒副作用[1-4]。目前,國內(nèi)外學者已經(jīng)對藥用靈芝中活性成分進行不同的研究,包括靈芝活性蛋白[5-8]、靈芝多糖[9-11]、靈芝三萜[12-14]和靈芝酸[15-17]等,栽培條件對靈芝活性成分的影響也有部分報道[18-21]。到目前為止靈芝的不同部位和破碎后不同顆粒大小對靈芝活性成分的影響鮮有報道。
1.1.1 材料準備
7號靈芝采收后及時將污物清理干凈,60℃條件下,在干燥箱內(nèi)干燥24 h,選擇15個完整的子實體,粉碎,用篩孔直徑分別為0.075 mm、0.1 mm、0.25 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm過篩,均取3 g,最后用帶拉鏈的塑料帶密封備用。
1.1.2 藥品
葡萄糖由廣州化學試劑廠提供;熊果酸和香草醛由上海晶純試劑有限公司提供;牛白蛋白和考馬斯亮藍G250由國藥集團化學試劑有限公司提供;活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化鈉、硫酸銨、碳酸氫鈉、鹽酸、氫氧化鈉、無水乙醇、硫酸和高氯酸均為分析純。
1.2.1 測定方法
靈芝多糖的測定參考蒽酮-硫酸法[22],用葡萄糖做的標準曲線為:y=0.7622x+0.0122,R2=0.998。
靈芝蛋白的測定參考考馬斯亮藍G-250法[22],用牛血清白蛋白做的標準曲線為:y=0.6643x+0.0009,R2=0.999。
靈芝三萜的測定參考直接光度法測定法[23],用熊果酸做的標準曲線為:y=0.4144x-0.01,R2=0.9934。
1.2.2 統(tǒng)計分析
用南京農(nóng)業(yè)大學王韶華教授發(fā)明的Stst軟件進行統(tǒng)計分析。
靈芝不同部位對靈芝藥用活性成分的影響見表1。
表1 不同部位對靈芝活性成分的影響
結(jié)果顯示,多糖的含量3個處理相比差異極顯著,菌柄多糖含量顯著高于菌蓋;蛋白質(zhì)的含量3個處理相比差異極顯著,菌柄蛋白質(zhì)含量也顯著高于菌蓋;完整的子實體中三萜含量與菌蓋中相比無差異,但與菌柄相比有顯著性差異,但菌蓋中三萜含量高于菌柄??傊?,多糖和蛋白質(zhì)的含量柄中均高于菌蓋,但三萜的含量菌蓋高于菌柄。
不同顆粒大小對靈芝茶活性成分的影響見表2。
表2 不同顆粒大小對靈芝茶藥用成分的影響
結(jié)果顯示,多糖的含量6個處理相比差異極顯著,其中0.075 mm~0.1 mm處理對多糖含量最大,其次是0.1 mm~0.25 mm處理,但1 mm~2 mm處理對多糖含量影響最小,隨著顆粒的增大,多糖含量基本呈逐漸降低的趨勢;蛋白質(zhì)含量不同處理之間有的無差異,有的差異極顯著,其中0.075 mm~0.1 mm處理的蛋白質(zhì)含量最高,隨著顆粒的增大,蛋白質(zhì)含量呈明顯的降低趨勢;三萜含量6個處理相比差異極顯著,呈明顯的降低趨勢??傊?,隨著顆粒的增大,靈芝多糖、蛋白、三萜的含量基本呈逐漸降低的趨勢。
靈芝多糖、蛋白、三萜類化合物是靈芝中的主要活性物質(zhì),也是衡量靈芝質(zhì)量的重要指標[24]。靈芝不同部位藥用成分含量的比較研究,到目前為止還沒有文獻報道,無法與其他類似的試驗數(shù)據(jù)比較。本實驗研究的結(jié)果表明,在菌蓋和菌柄中,多糖、蛋白質(zhì)、三萜3種藥用成分的含量差異性均極顯著,多糖和蛋白在菌柄中含量高,而三萜在菌蓋中含量高。顆粒大小對靈芝茶藥用成分影響較大,隨著顆粒的增大,靈芝多糖、蛋白質(zhì)、三萜的含量基本呈逐漸降低的趨勢,從藥用和經(jīng)濟角度考慮,靈芝茶顆粒大小選擇在0.1 mm~0.075 mm較好。本研究為提高靈芝茶的質(zhì)量提供技術參考依據(jù)。
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