曾哲靈,鄭 菲,王林林,蔣以號(hào)
(1.南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西南昌330047;2.南昌大學(xué)環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院,江西南昌330031;3.南昌大學(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院,江西南昌330031)
樟樹(Cinnamomum camphora L.Prest)是我國(guó)特產(chǎn)珍貴木材和經(jīng)濟(jì)林樹種,遍布我國(guó)14 個(gè)省。樟樹不僅可從其根、莖和葉中提取天然樟腦和芳香油等藥用物質(zhì),果實(shí)也具有極高的利用價(jià)值。由于其籽仁油中脂肪酸主要組成不同于一般的植物油,為52.05%癸酸,42.77% 月桂酸[1],均為中碳鏈脂肪酸(碳原子數(shù)為8~12 的脂肪酸)。關(guān)于中碳鏈脂肪酸甘油三酯(MCT)生理功能的研究國(guó)內(nèi)外多有報(bào)道,MCT 能迅速供能且代謝速度快,減少脂肪的沉積且無潛在的致癌性和致畸性,MCT 不僅用于減肥保健產(chǎn)品中,還廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、日用化工、食品等領(lǐng)域,以其獨(dú)特的性能和代謝方式成為酯類研究的熱點(diǎn)[2-5]。目前,人們?nèi)粘J秤糜痛蟛糠譃殚L(zhǎng)碳鏈油脂(主要為碳原子數(shù)大于12 的脂肪酸甘油三酯)。本次實(shí)驗(yàn)旨在于研究樟樹籽仁油作為日常食用油對(duì)大鼠血脂及血管動(dòng)脈硬化可能產(chǎn)生的影響并與其它長(zhǎng)碳鏈油脂進(jìn)行比較,為開發(fā)新型日常保健食用油提供理論依據(jù)。
動(dòng)物 清潔級(jí)SD 大鼠60 只,雄性,體重(170 ±10)g,湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(湘)2009-0004;基礎(chǔ)飼料配方 由南昌大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供,經(jīng)索氏提取法測(cè)得基礎(chǔ)飼料中粗脂肪含量為4%;樟樹籽仁油 由本實(shí)驗(yàn)室自制;豬油、大豆油 市場(chǎng)購(gòu)買;飼料 樟樹籽仁油、大豆油及豬油按一定比例加入基礎(chǔ)飼料,表1 為樟樹籽仁油、大豆油以及豬油中脂肪酸組成分。
表1 樟樹籽仁油、大豆油以及豬油的脂肪酸組成[1,6-7]Table 1 The fatty acid composition of camphor tree seeds oil,soybean oil and lard[1,6-7]
Au5421 型全自動(dòng)生化分析儀BECK MAN COULTER 提供;Anke TGL-16G 臺(tái)式離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠提供;TG、TC、HDL-C、LDL-C 測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)分別為:199AAJ、R117BPA、377ABA、R113BNA) 均由日本協(xié)和醫(yī)藥診斷株式會(huì)社提供;AST、ALT 測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)分別為:20120222、20120132) 均由上??迫A生物工程股份有限公司提供。
1.2.1 動(dòng)物分組及飼喂 實(shí)驗(yàn)大鼠在環(huán)境溫度為20~26℃,相對(duì)濕度為50%~70%,噪音小,晝夜明暗交替12/12h 的房間里,用金屬籠具飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)1w 后,根據(jù)TC 水平隨機(jī)分為4%樟樹籽仁油+8% 大豆油組、8% 樟樹籽仁油+4% 大豆油組、12%樟樹籽仁油組、12%大豆油組、12%豬油組、空白對(duì)照組??瞻讓?duì)照組飼喂普通飼料,其余各組飼喂添加了相應(yīng)比例油脂的基礎(chǔ)飼料,動(dòng)物自由進(jìn)食飲水。
1.2.2 觀測(cè)指標(biāo)及檢測(cè)方法 實(shí)驗(yàn)周期7w,每周稱重一次,觀察其活動(dòng)情況,飲食,飲水,糞便狀況。7w后禁食12h 后,尾靜脈采血約1.5mL。血樣3000r/min 離心15min,分離血清,取約300μL,采用全自動(dòng)生化分析儀,檢測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度載脂蛋白(HDL-C)、低密度載脂蛋白(LDL-C)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)指標(biāo),各組抗動(dòng)脈硬化指數(shù)(AAI)以及致動(dòng)脈硬化指數(shù)(AI)的比較:AAI =HDL-C/TC;AI =(TC-HDL-C)/HDL-C[8]。各組體脂的比較:大鼠解剖后,刮取大鼠生殖器周圍脂肪,稱取重量,體脂比(%)=生殖器周圍脂肪重量(g)/體重(g)×100。
樟樹籽仁油為淡黃色清亮液體,酸價(jià)為(0.50 ±0.10)mgKOH/g,碘值為(3.00 ±0.05)gI2/100g,皂化值為(275.43 ±5.12)mgKOH/g,比重為(0.84 ±0.01)g/cm3,熔點(diǎn)為(20 ±1)℃。
由表2 可見,各組大鼠體重、體脂、飼料消耗總量及攝油量均無顯著性差異(p >0.05)。E 組體重增加最多,B 組體重增重最少;D 組所取體脂占大鼠體重百分比最大,A-1、B、C 組較少;E 組飼料消耗最多,D 組飼料消耗最少;A-2 組攝油量最多,D 組攝油量最少。表明樟樹籽仁油相與長(zhǎng)碳鏈油脂對(duì)大鼠的體重及體脂差異不顯著。
由表3 可知,7w 后,血清中TC 含量,A-1、A-2組極顯著低于C、D 組(p <0.01),B 組極顯著低于D組(p <0.01);TG 含量,A-1、A-2 組極顯著低于C、D、E 組,B 組極顯著低于D 組(p <0.01);在HDL-C水平上,B 組相比較于D、E 組顯著升高(p <0.05);在LDL-C 水平上,與D 組比較,A-2、C 組顯著降低(p <0.05)。表明樟樹籽仁油特別是樟樹籽仁油與大豆油的混合油脂在誘導(dǎo)大鼠血清中TC、TG 含量的升高優(yōu)于大豆油和豬油,且樟樹籽仁油能提高大鼠血清中的HDL-C。
由表4 可知,與C 組比較,A-2、B 組在AAI 水平上顯著升高(p <0.05);與D 組比較,A-1、A-2、B 組AAI 顯著升高(p <0.05),AI 極顯著性降低(p <0.01);與E 組比較,D 組AAI 下降,而AI 升高,均有顯著性差異(p <0.05)。表明樟樹籽仁油及樟樹籽仁油與大豆油的混合油脂在誘導(dǎo)大鼠動(dòng)脈硬化的形成上優(yōu)于大豆油和豬油。
表2 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠體重及體脂的影響(s,n=10)Table 2 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on body weight and body fat in rats(s,n=10)
表2 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠體重及體脂的影響(s,n=10)Table 2 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on body weight and body fat in rats(s,n=10)
組別體重初始(g)最終(g)增重(g)體脂(%)飼料消耗總量(g)攝油量(g/w).42 ±0.33117520.14 A-2166.30 ±7.04459.14 ±16.50292.84 ±21.491.49 ±0.30118520.31 B164.75 ±12.08456.67 ±32.62291.92 ±39.721.43 ±0.35115619.82 C169.00 ±8.05466.80 ±26.27297.80 ±23.881.42 ±0.22117120.10 D164.63 ±11.82462.88 ±25.74298.25 ±25.511.54 ±0.20114219.58 E169.13 ±7.34484.13 ±23.96315.00 ±21.341.4 A-1163.60 ±8.33469.20 ±18.74305.60 ±19.331 9 ±0.201390-
表3 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠血脂的影響(s,n=10)Table 3 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on the level of serum in rats(s,n=10)
表3 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠血脂的影響(s,n=10)Table 3 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on the level of serum in rats(s,n=10)
注:與E 組比較:* p <0.05,** p <0.01;與C 組比較:Δp <0.05,ΔΔp <0.01;與D 組比較:# p <0.05,## p <0.01,表4、表5 同。
組別TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)##1.14 ±0.200.38 ±0.07 A-21.57 ±0.18ΔΔ##0.43 ±0.13**ΔΔ##1.19 ±0.190.32 ±0.08#B 1.85 ±0.26##0.86 ±0.28##1.44 ±0.18#*0.36 ±0.17 C 1.88 ±0.23##0.88 ±0.21##1.29 ±0.230.33 ±0.07#D 2.20 ±0.19**1.18 ±0.26**1.24 ±0.190.46 ±0.15**A-11.61 ±0.29ΔΔ##0.50 ±0.18**ΔΔ E 1.69 ±0.380.86 ±0.281.24 ±0.260.18 ±0.10
表4 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠抗動(dòng)脈硬化指數(shù)及致動(dòng)脈硬化指數(shù)的影響(s,n=10)Table 4 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on indices of AAI,AI in rats(s,n=10)
表4 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠抗動(dòng)脈硬化指數(shù)及致動(dòng)脈硬化指數(shù)的影響(s,n=10)Table 4 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on indices of AAI,AI in rats(s,n=10)
AAIAI 組別A-10.71 ±0.06#0.42 ±0.14##A-20.76 ±0.09Δ#0.33 ±0.16##B 0.75 ±0.12Δ#0.36 ±0.21##C 0.69 ±0.090.49 ±0.26 D 0.57 ±0.10*0.81 ±0.35**0.73 ±0.020.36 ±0.04 E
由表5 可以看出,A-1、A-2、B 三組在ALT 與AST 水平上與E 組比較無顯著性差異(p >0.05);C、D 組在ALT 指標(biāo)上顯著低于E 組(p <0.05)。表明樟樹籽仁油及樟樹籽仁油與大豆油的混合油脂不會(huì)導(dǎo)致大鼠肝功能異常。
表5 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠肝功能的影響(s,n=10)Table 5 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on the level of serum ALT,AST in rats(s,n=10)
表5 樟樹籽仁油與常食油脂對(duì)大鼠肝功能的影響(s,n=10)Table 5 Effect of camphor tree seeds oil and ordinary edible oil on the level of serum ALT,AST in rats(s,n=10)
組別ALT(U/L)AST(U/L)A-149.60 ±13.79181.80 ±30.62 A-242.30 ±3.09172.60 ±14.04 B 42.75 ±5.97190.50 ±39.57 C 36.25 ±2.76*168.88 ±19.00*D 39.13 ±8.15*193.63 ±34.12 E 49.13 ±4.91207.38 ±33.27
長(zhǎng)期的高油脂飲食后,血脂水平會(huì)有明顯升高,這表現(xiàn)在TC、TG、HDL-C、LDL-C 等方面。血清中TC 與TG 含量的升高與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生有關(guān);而HDL-C 含量則與動(dòng)脈管腔狹窄程度呈顯著的負(fù)相關(guān);抗動(dòng)脈硬化指數(shù)(AAI)是評(píng)價(jià)心血管系統(tǒng)動(dòng)脈硬化易患程度的指標(biāo)之一;動(dòng)脈硬化指數(shù)(AI)越高,說明患動(dòng)脈硬化的可能性越大。
飼喂7w 后,除空白對(duì)照組,各組實(shí)驗(yàn)大鼠在體重增加量、攝食量和攝油量均無顯著差異?;旌险翗渥讶视徒M(4%樟樹籽仁油+8%大豆油組,8%樟樹籽仁油+4%大豆油組)在降低大鼠血清中的TC、TG 方面較12%豬油組及12%大豆油組均有極顯著性差異,與12%豬油組比較,AI 指數(shù)極顯著性降低,AAI 指數(shù)顯著性升高;12%樟樹籽仁油組在升高AAI及HDL-C 方面較12%豬油組及12%豆油組有顯著差異,并較前者能極顯著降低TC、TG,顯著降低AI;相對(duì)于空白對(duì)照組,混合樟樹籽仁油組對(duì)TG 含量降低有顯著影響,而12% 樟樹籽仁油組能顯著升高HDL-C 水平;混合樟樹籽仁油組的TC、TG、LDL-C、AI 水平隨著樟樹籽仁油比例的增加而降低,而HDL-C、AAI 水平隨著樟樹籽仁油比例的增加而升高。長(zhǎng)期食用樟樹籽仁油特別是樟樹籽仁油與大豆油的混合油脂,對(duì)大鼠血脂的升高及動(dòng)脈硬化的形成明顯優(yōu)于豬油組,較優(yōu)于大豆油組,甚至有正面影響,這可能與樟樹籽仁油能升高大鼠血中HDL-C有關(guān)。
目前人們主要的食用油為長(zhǎng)碳鏈油脂,其為人體提供生物膜和生物活性物質(zhì)所必需的不飽和脂肪酸,同時(shí)也可以提供能量[9]。但是,長(zhǎng)碳鏈甘油三酯(LCT)中亞油酸的含量過高,在人體高代謝狀態(tài)時(shí)影響粒細(xì)胞活性,并導(dǎo)致免疫細(xì)胞受損,脂質(zhì)過氧化增加,加重機(jī)體損害。LCT 在肝臟線粒體的代謝過程需要肉毒堿的轉(zhuǎn)運(yùn),對(duì)于嚴(yán)重肝臟功能障礙的患者而言,其代謝將受明顯影響[10]。因此,長(zhǎng)碳鏈脂肪酸由于不易代謝而易轉(zhuǎn)變成機(jī)體自身脂肪組織,儲(chǔ)存于體內(nèi),造成血脂升高,動(dòng)脈硬化等。而MCT 在體內(nèi)代謝速度快,不需要肉堿的幫助就可直接進(jìn)入線粒體供利用,其消化吸收速度快,因而難以形成脂肪,不易造成人體肥胖,血脂升高及動(dòng)脈硬化[2,11],但其最大的缺點(diǎn)是必需脂肪酸含量較低。MCT/LCT 混合油脂可以彌補(bǔ)MCT 的這一缺點(diǎn),有研究發(fā)現(xiàn)以中長(zhǎng)鏈脂肪酸為膳食脂肪能明顯降低以長(zhǎng)碳鏈為膳食脂肪來源的,且有相關(guān)人體實(shí)驗(yàn)證明了這點(diǎn)[12-13]。
樟樹籽仁油中富含MCT,但關(guān)于樟樹籽仁油降血脂功能的研究及其具體機(jī)制還需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)來確認(rèn)。我國(guó)樟樹資源豐富,每年十一月份為樟樹籽成熟期,大量樟樹籽掉落未能充分利用,不但污染環(huán)境而且浪費(fèi)資源,因此樟樹籽仁油的開發(fā)和有效利用具有廣闊的應(yīng)用前景。
本文初步證實(shí)了樟樹籽仁油特別是樟樹籽仁油與大豆油的混合油脂在誘導(dǎo)大鼠血脂的升高及動(dòng)脈硬化的形成上明顯低于長(zhǎng)碳鏈油脂組,甚至有降血脂的效果,這為進(jìn)一步研究樟樹籽仁油對(duì)血脂的影響提供一些參考依據(jù)。
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