劉穎

【摘 要】 目的：探討梔子苷鎮(zhèn)痛抗炎的藥理作用。方法：選取小鼠進(jìn)行小白鼠熱板實(shí)驗(yàn)，醋酸誘發(fā)小白鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，梔子苷對(duì)醋酸誘發(fā)小白鼠毛細(xì)血管通透性等實(shí)驗(yàn)，對(duì)梔子苷的鎮(zhèn)痛抗炎作用進(jìn)行分析。結(jié)果：熱刺激反應(yīng)中，梔子苷（25mg/kg）可以延長(zhǎng)熱刺激所導(dǎo)致的小白鼠痛覺反應(yīng)時(shí)間；小白鼠扭體反應(yīng)中，梔子苷（50mg/kg）、梔子苷（12.5mg/kg）均對(duì)扭體反應(yīng)起到抑制作用，發(fā)揮鎮(zhèn)痛效果；大劑量梔子苷能夠顯著降低小白鼠腹腔毛細(xì)血管通透性，對(duì)炎癥導(dǎo)致的滲出具有明顯抑制作用。結(jié)論：梔子苷具有一定的鎮(zhèn)痛抗炎作用，值得進(jìn)一步研究和臨床應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 梔子苷；鎮(zhèn)痛抗炎；藥理作用

梔子苷是常用的鎮(zhèn)痛抗炎藥物。為了探討其實(shí)驗(yàn)藥理作用，本組研究中采用梔子苷對(duì)小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)梔子苷的鎮(zhèn)痛和抗炎作用進(jìn)行了分析。現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 藥物與試劑 本組研究的主要藥物與試劑包括生梔子果實(shí)，通過市場(chǎng)購(gòu)買并經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室鑒定。TGCJ設(shè)備，取梔子果實(shí)藥材適量，加入70%乙醇6倍與藥材量進(jìn)行提取，每次60min，共分3次進(jìn)行提取，對(duì)回收的乙醇進(jìn)行過濾處理，對(duì)稀釋液進(jìn)行分離純化，加壓干燥之后得干膏備用。采用HPLC法對(duì)有效單體梔子苷的含量進(jìn)行測(cè)量，為42.5%，采用UV法進(jìn)行測(cè)量測(cè)得梔子苷含量為86.2%[2]。

1.2 儀器 GL-8402型熱板測(cè)痛儀、752外可見分光光度儀、日本生產(chǎn)的MK-500型足爪儀。

1.3 動(dòng)物 昆明小白鼠，體重18～22g。

1.4 方法

1.4.1 梔子苷對(duì)小白鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究方法 選用昆明雌性小白鼠40只，按照隨機(jī)分組原則劃分為5組，分別為生理鹽水陰性對(duì)照組、梔子苷小劑量組、梔子苷中劑量組、梔子苷大劑量組和杜冷丁陽(yáng)性對(duì)照組（小、中、大劑量梔子苷分別為12.5、25、50mg/kg）。對(duì)小白鼠熱板測(cè)痛儀進(jìn)行調(diào)節(jié)，溫度保持在（55.0±0.2）℃，每次取一只小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，記錄放入至出現(xiàn)舔足所需的時(shí)間，記錄為疼痛閥值。篩除小于5s或者大于30s的小鼠，對(duì)合格者再次進(jìn)行兩次測(cè)量，取3次平均值。梔子苷小、中、大3個(gè)劑量組連續(xù)3d進(jìn)行皮下注射給藥，給藥前先進(jìn)行稱重計(jì)算藥量，陰性對(duì)照組給予相同生理鹽水進(jìn)行注射。3d后，5組分別給藥，給藥后30、60、90、120min分別進(jìn)行熱板測(cè)痛實(shí)驗(yàn)，對(duì)疼痛閥值進(jìn)行記錄，比較給藥組和對(duì)照組的差異情況，進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理[3]。

1.4.2 梔子苷對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的影響 取小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)劃分為5組，做好標(biāo)記之后進(jìn)行飼養(yǎng)。劃分的5組分別為生理鹽水陰性組、梔子苷小劑量組、梔子苷中劑量組、梔子苷大劑量組和杜冷丁陽(yáng)性對(duì)照組（小中大劑量梔子苷分別為12.5、25、50mg/kg）。前3d給藥方式與熱板測(cè)痛實(shí)驗(yàn)方法一致，用藥3d之后，第4天進(jìn)行小鼠稱重，稱重后再次進(jìn)行依次給藥。按照給藥時(shí)間為準(zhǔn)，杜冷丁陽(yáng)性對(duì)照組小鼠給藥30min之后，對(duì)所有小鼠進(jìn)行腹腔0.6%醋酸溶液0.1ml/10g體重注射，對(duì)各組小鼠的扭體反應(yīng)進(jìn)行觀察，記錄20min內(nèi)發(fā)生的扭體次數(shù)，進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理[4]。

1.4.3 梔子苷對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響實(shí)驗(yàn) 采取相同的方法選取小鼠并劃分為5組，分別為生理鹽水陰性組、梔子苷小劑量組、梔子苷中劑量組、梔子苷大劑量組和氫化可的松陽(yáng)性對(duì)照組（小、中、大劑量梔子苷分別為12.5、25、50mg/kg），標(biāo)記后送入動(dòng)物房進(jìn)行飼養(yǎng)。前3d給藥方式相同，第4天進(jìn)行稱重后，陰性組和梔子苷給藥組繼續(xù)給藥，陽(yáng)性對(duì)照組最后給藥。氫化可的松陽(yáng)性組給藥后30min，對(duì)各組小鼠右耳進(jìn)行二甲苯涂抹，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)15min后處死小鼠，剪下小鼠雙耳進(jìn)行電子天平稱重，以左右兩耳的重量差作為腫脹度進(jìn)行記錄，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理[5]。

1.4.4 梔子苷對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn) 采用與以上兩組相同的方式進(jìn)行小鼠選取和實(shí)驗(yàn)分組，前3d給藥方式一致，第4天進(jìn)行小鼠稱重后，3個(gè)梔子苷給藥組和生理鹽水陰性對(duì)照組繼續(xù)進(jìn)行皮下注射給藥和生理鹽水，給藥間隔為24h。以每只小鼠給藥時(shí)間為準(zhǔn)，陽(yáng)性對(duì)照組給藥30min之后，即梔子苷給藥組給藥1h之后，對(duì)所有小鼠注射0.5%伊文思藍(lán)溶液0.1ml/10g（體重）和0.6%醋酸溶液0.1ml/10g（體重），注射完成后20min，處死小鼠，剪開腹腔，采用8ml生理鹽水對(duì)腹腔進(jìn)行4次清洗，合并洗滌液進(jìn)行離心分離15min，取上清液測(cè)定吸光值[6]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，計(jì)算資料采用χ2進(jìn)行檢驗(yàn)，組間比較采用p檢驗(yàn)，P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

表1 梔子苷小鼠疼痛閥值的影響作用分析

對(duì)其他實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理后，結(jié)果顯示本次研究中，熱刺激反應(yīng)中，25mg/kg梔子苷可以延長(zhǎng)熱刺激所導(dǎo)致的小白鼠痛覺反應(yīng)時(shí)間；小白鼠扭體反應(yīng)中，50mg/kg梔子苷、12.5mg/kg梔子苷對(duì)扭體反應(yīng)均起到抑制作用，發(fā)揮鎮(zhèn)痛效果；大劑量梔子苷能夠顯著降低小白鼠腹腔毛細(xì)血管通透性，對(duì)炎癥導(dǎo)致的滲出具有明顯抑制作用。

3 討 論

炎癥是機(jī)體組織在受到各種因素導(dǎo)致的損傷刺激之后所表現(xiàn)出的防御反應(yīng)，在早期以血管擴(kuò)張、血管壁通透性增強(qiáng)以及血管內(nèi)皮間隙擴(kuò)大為主要的表現(xiàn)，后期隨著滲出增加導(dǎo)致組織腫脹。

梔子是傳統(tǒng)中藥的一種，藥食兩用。藥用梔子是指細(xì)草科植物梔子的成熟干燥果實(shí)，性寒，味苦，具有清熱利尿、瀉火除煩和涼血解毒的作用，在熱病心煩、血淋澀痛、目赤腫痛、血熱火毒和扭挫傷痛的治療中應(yīng)用較多。研究表明，含環(huán)烯醚萜苷類是梔子果實(shí)的主要成分，其中梔子苷最多，是產(chǎn)生藥用作用的主要成分。本組研究中，采取中藥提純方法，提純出梔子的有效成分梔子苷進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明梔子苷既可以抑制早期炎癥水腫，又可以抑制炎癥晚期肉芽組織增生，效果顯著。

綜上所述，本組研究顯示，不同劑量的梔子苷能夠提高小鼠熱刺激疼痛閥值，抑制扭體反應(yīng)，降低毛細(xì)血管通透性，抑制滲出性炎癥，發(fā)揮了顯著的鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用，值得進(jìn)一步研究應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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[6] 李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海：上海科技出版社，2009，4（5）：304-305.