代志軍　朱榮

摘要：訓(xùn)練組（男子足球運(yùn)動員，n=16）和對照組（男子大學(xué)生，n=16）在功率自行車上完成一次遞增負(fù)荷力竭運(yùn)動。運(yùn)動前、運(yùn)動后以及運(yùn)動后24 h采集靜脈血，測定外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞凋亡率、羥自由基、8—羥基脫氧鳥嘌呤（8—OHdG）和8—氧鳥嘌呤DNA糖基化酶（OGG1）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動后即刻，訓(xùn)練組和對照組外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（P<0.01；P<0.05）、淋巴細(xì)胞凋亡率（P<0.05；P<0.01）、羥自由基（P<0.01；P<0.01）、8—OHdG（P<0.01；P<0.01）和OGG1（P<0.01；P<0.01）均高于運(yùn)動前水平，而訓(xùn)練組OGG1升高幅度高于對照組（P<0.01），其他各指標(biāo)升高幅度則均明顯低于對照組（均為P<0.01）。運(yùn)動后24 h，對照組外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)低于運(yùn)動前（P<0.01），淋巴細(xì)胞凋亡率高于運(yùn)動前（P<0.01），而訓(xùn)練組則恢復(fù)至運(yùn)動前；兩組8—OHdG（P<0.05；P<0.01）均高于運(yùn)動前，但升高幅度明顯低于對照組（P<0.01）；OGG1在對照組恢復(fù)至運(yùn)動前，而訓(xùn)練組仍高于運(yùn)動前水平（P<0.05）。因此，長期運(yùn)動訓(xùn)練通過降低氧化應(yīng)激水平、提高DNA修復(fù)能力、減輕DNA氧化損傷，抑制運(yùn)動性淋巴細(xì)胞凋亡。

關(guān)鍵詞：運(yùn)動訓(xùn)練；外周血淋巴細(xì)胞；DNA損傷；細(xì)胞凋亡；DNA修復(fù)酶

中圖分類號：G804.7 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1006—2076（2012）03—0060—06

Abstract：Training group （male football athletes， n=16） and control group （male normal undergraduate students， n=16） performed a bout of incremental exhausted exercise test on cycle ergometer. Peripheral blood lymphocyte counts， apoptotic rate of leukocytes， hydroxy radical，8瞙ydroxydeoxyguanosine （8—OHdG） and 8—oxoguanine DNA glycosylase （OGG1） were determined in venous blood before， immediately after and 24 h after exercise test. We found that although lymphocyte count（P<0.01； P<0.05）， apoptotic rate（P<0.05； P<0.01）， hydroxyl radical（P<0.01；P<0.01）， 8—OHdG（P<0.01；P<0.01） and OGG1（P<0.01；P<0.01） increased immediately after exercise test in both groups， the change extent of OGG1 in training group

收稿日期：2012—02—22

基金項(xiàng)目：浙江省教育廳科研計(jì)劃項(xiàng)目（Y201017123）。

作者簡介：代志軍（1971— ），男，山東濰坊人，碩士，講師，研究方向籃球教學(xué)與訓(xùn)練。

作者單位：1. 濰坊學(xué)院，山東 濰坊 261061；2. 溫州醫(yī)學(xué)院，浙江 溫州 325035

1. Weifang University， Weifang 261061， China；2. Wenzhou Medical College， Whnezhou 325035， China

was significantly higher than that of control group （P<0.01）， while that of other indexes were lower than control group （all P<0.01）. After 24h， lymphocyte count was lower （P<0.01）， apoptotic rate was higher（P<0.01） than that of pre—exercise in control group， which were recovered in training group； 8—OHdG in both group were higher （P<0.05；P<0.01）than pre—exercise but elevation range in training group was lower than control group （P<0.01）； OGG1 recovered in control group， while higher than pre—exercise in training group （P<0.05）. In conclusion， attenuated oxidative stress， improved DNA repair ability and decreased lymphocyte oxidative DNA damage could be the mechanism to prevent exercise induced lymphocytes apoptosis through long—term exercise training.

Key words：exercise training； peripheral blood lymphocyte； DNA damage； apoptosis； DNA repair enzyme

運(yùn)動可影響免疫系統(tǒng)的機(jī)能，其中大強(qiáng)度（劇烈）運(yùn)動可抑制免疫，表現(xiàn)為運(yùn)動后外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)降低，上呼吸道感染的發(fā)病率升高。研究表明，運(yùn)動性免疫抑制的發(fā)生與運(yùn)動誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，而運(yùn)動氧化應(yīng)激造成的DNA損傷是細(xì)胞凋亡的主要原因。此外，機(jī)體還存在DNA損傷抵御系統(tǒng)，即針對DNA氧化損傷進(jìn)行有效修復(fù)，人體最重要的修復(fù)酶是8—氧鳥嘌呤DNA糖基化酶（8—oxoguanine DNA glycosylase，OGG1）。有研究顯示，運(yùn)動誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡與受試者的身體機(jī)能狀態(tài)有關(guān)，即經(jīng)過長期訓(xùn)練者（如運(yùn)動員）其氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的程度要明顯低于普通人群，但至今其機(jī)制未明。本研究旨在觀察長期運(yùn)動訓(xùn)練對一次力竭運(yùn)動后外周血淋巴細(xì)胞凋亡的影響，并探討氧化應(yīng)激、DNA損傷、OGG1表達(dá)在其間的作用。

1 研究對象與方法

山東體育學(xué)院學(xué)報(bào)

第28卷第3期

2012年6月 代志軍，等 長期運(yùn)動訓(xùn)練對外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷和凋亡的影響及機(jī)制研究

No.3 20121.1 研究對象

選擇濰坊學(xué)院體育系男子足球運(yùn)動員16名（訓(xùn)練年限超過2年，每天訓(xùn)練超過2 h，每周5次），對照組為身高、體重、年齡與訓(xùn)練組相匹配的本校非體育專業(yè)男性大學(xué)生16名（無規(guī)律運(yùn)動習(xí)慣，即每天運(yùn)動不超過20 min，每周不超過2次）。受試者身體健康，均無心血管疾病、糖尿病、慢性感染、骨骼肌肉病史及其他嚴(yán)重疾患病史、無常規(guī)用藥史（包括營養(yǎng)補(bǔ)劑）、無煙酒嗜好。受試者的一般情況。

1.2 一次遞增負(fù)荷力竭運(yùn)動實(shí)驗(yàn)

運(yùn)動實(shí)驗(yàn)在濰坊學(xué)院運(yùn)動人體科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境：氧濃度20.9%，CO2濃度小于300 ppm，溫度26℃，相對濕度40%～50%，氣壓760 mmHg。利用功率自行車（Monark 839E，瑞典）進(jìn)行一次遞增負(fù)荷力竭運(yùn)動實(shí)驗(yàn)，力竭實(shí)驗(yàn)方案：訓(xùn)練組和對照組先進(jìn)行10 min準(zhǔn)備活動（拉伸與慢跑）后，適應(yīng)性蹬車2 min（無負(fù)荷），隨后進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)：訓(xùn)練組起始負(fù)荷為100 W、每分鐘遞增25 W，對照組起始負(fù)荷為30 W，每2 min遞增30 W，兩組均保持60 r/min的轉(zhuǎn)速，直至力竭。力竭判斷標(biāo)準(zhǔn)：達(dá)到年齡標(biāo)準(zhǔn)化最大心率[220—年齡（歲）]，或者經(jīng)再三鼓勵，實(shí)驗(yàn)對象仍不能按規(guī)定強(qiáng)度完成運(yùn)動視為力竭。注意事項(xiàng)：所有受試者在實(shí)驗(yàn)前48 h內(nèi)均未進(jìn)行過劇烈運(yùn)動，簽訂知情同意書后填寫PAR—Q問卷，問卷中7個問題均回答“否”者可參加本實(shí)驗(yàn)。整個過程在心電監(jiān)護(hù)（Mac120，日本）以及兩名專業(yè)醫(yī)師陪同下進(jìn)行。

1.3 取血

受試者于運(yùn)動實(shí)驗(yàn)前半小時(shí)、運(yùn)動后即刻以及運(yùn)動后24 h，空腹?fàn)顟B(tài)下于肘靜脈分別采血10 mL，加入EDTA抗凝。

1.4 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)測定

取500 μL抗凝血，測定淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（全血分析儀，MICROS60，美國）。單位cell/μL。

1.5 淋巴細(xì)胞分離

使用密度梯度離心法分離淋巴細(xì)胞。取抗凝血用磷酸鹽緩沖液（PBS）等倍稀釋后，緩慢加入等體積的淋巴細(xì)胞分離液（Ficoll—Pague溶液，深圳晶美生物工程有限公司），3 000 rpm離心30 min，取淋巴細(xì)胞層，用PBS洗滌兩次，3 000 rpm離心5 min，棄上清。RPMI 1640（Gibco公司，美國）培養(yǎng)液再懸浮，加入10%小牛血清、青霉素和鏈霉素進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，密度為2.5×105 cells/mL。

1.6 淋巴細(xì)胞凋亡率測定

流式細(xì)胞法檢測淋巴細(xì)胞凋亡率。用預(yù)冷PBS洗細(xì)胞兩次，用250 μL結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞，濃度調(diào)整為1×106 cells/mL，取100 μL細(xì)胞懸液于5 mL流式管中，加5 μL Annexin V—FITC（深圳晶美生物工程有限公司）和10 μL 20 μg/mL碘化丙錠溶液，混勻后于室溫避光孵育15 min，加入400 μL PBS，流式細(xì)胞儀分析（EPICS—XLⅡMCL，美國Beckman公司；分析系統(tǒng)軟件為SystemⅡ）結(jié)果。

1.7 淋巴細(xì)胞8—羥基脫氧鳥嘌呤（8—OHdG）測定

用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）法測定淋巴細(xì)胞8—OHdG。用DNA提取試劑盒（南京建成生物公司）提取淋巴細(xì)胞DNA。DNA在TE緩沖液中溶解至20～50 μg/mL，在230 nm、260 nm和280 nm三個波長條件下檢測吸光度，并計(jì)算DNA的濃度，檢測其純度。取200 μg DNA加至135 μL雙蒸水中，加入15 μL乙酸鈉、6 U的核酸酶P1至DNA溶解液中，37℃ 孵育30 min。加入1M Tris—HCl緩沖液及2 U堿性磷酸酶，37℃孵育30 min。水解產(chǎn)物過純化柱，1 4000 rpm離心10 min。收集離心的液體，取50 μL DNA用ELISA試劑盒（深圳晶美生物工程有限公司）檢測8—OHdG的含量（ng/mL），檢測步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.8 淋巴細(xì)胞羥自由基測定

依照試劑盒（南京建成生物公司）說明，將lucigenin5（μmol/L）和細(xì)胞懸液（5×104/ml）加入預(yù)熱Krebs/Hepes緩沖液（37℃），反應(yīng)體系5ml。試管放入紫外分光光度計(jì)，1 cm光徑，檢測波長550 nm，蒸餾水調(diào)零，測各管吸光度值，只加lucigenin不加細(xì)胞的試管是空白對照。超氧陰離子和羥自由基含量為測試管與空白管吸光度差值，單位為KU/L。

1.9 淋巴細(xì)胞OGG1蛋白表達(dá)測定

考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白含量，蛋白樣品經(jīng)15% SDS—PAGE分離轉(zhuǎn)移于PVDF膜。一抗（Santacruz公司）孵育過夜，HRP標(biāo)記二抗（TBD公司）孵育1小時(shí)，ECL顯影。采用凝膠系統(tǒng)分析軟件掃描各條帶灰度值，以對照組運(yùn)動前條帶為100%，其它各條帶與其比值，即其相對表達(dá)量（%）。β—actin為內(nèi)參蛋白。

1.10 統(tǒng)計(jì)方法

所有數(shù)據(jù)均用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)比較使用單因素方差分析，組間比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P<0.05為顯著性水平，P<0.01為非常顯著水平。

2 研究結(jié)果

2.1 一次力竭運(yùn)動前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與淋巴細(xì)胞率的變化

運(yùn)動前安靜時(shí)，訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)低于對照組（P<0.01），淋巴細(xì)胞凋亡率則高于對照組（P<0.01）；運(yùn)動后即刻，兩組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（P<0.01；P<0.05）、淋巴細(xì)胞凋亡率（P<0.05；P<0.01）均高于運(yùn)動前，訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞凋亡率升高的幅度明顯低于對照組（48% vs 163%，P<0.01）；運(yùn)動后24 h，對照組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)低于運(yùn)動前（P<0.01），淋巴細(xì)胞凋亡率高于運(yùn)動前（P<0.01），而訓(xùn)練組則均恢復(fù)至訓(xùn)練前水平。

運(yùn)動前安靜時(shí)，訓(xùn)練組羥自由基高于對照組（P<0.01），兩組8—OHdG無顯著性差異（P>0.05）；運(yùn)動后即刻，兩組羥自由基（P<0.01；P<0.01）與8—OHdG（P<0.01；P<0.01）均高于運(yùn)動前，但訓(xùn)練組升高的幅度明顯低于對照組（羥自由基：51% vs 126%，P<0.01；8—OHdG：52% vs 86%，P<0.01）；運(yùn)動后24 h，兩組羥自由基均恢復(fù)至訓(xùn)練前水平，兩組8—OHdG仍高于運(yùn)動前（P<0.05；P<0.01），但訓(xùn)練組升高的幅度明顯低于對照組（23% vs 51%，P<0.01）。

3 討論

本研究中，一次力竭運(yùn)動后即刻，訓(xùn)練組和對照組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯升高，與前人的研究一致。這是由于運(yùn)動中兒茶酚胺等物質(zhì)分泌增加，促使淋巴細(xì)胞從肝、脾、淋巴結(jié)和胸腺等白細(xì)胞池釋放，從而影響了血液淋巴細(xì)胞的濃度。一般在運(yùn)動后數(shù)小時(shí)淋巴細(xì)胞數(shù)量開始減少，研究發(fā)現(xiàn)，不論是運(yùn)動員還是普通人，劇烈運(yùn)動后2～4 h可造成暫時(shí)性的淋巴細(xì)胞減少癥。在本研究中，力竭運(yùn)動24 h后，對照組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯減少，而訓(xùn)練組與運(yùn)動前無顯著性差異，雖然我們沒有在0—24h之間取觀察點(diǎn)，但結(jié)合前人的研究，我們認(rèn)為，訓(xùn)練組在力竭運(yùn)動后的恢復(fù)期（0～24 h之間）必定存在淋巴細(xì)胞顯著減少的時(shí)相，而在運(yùn)動后24 h這一時(shí)間點(diǎn)，訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞數(shù)量已恢復(fù)至運(yùn)動前水平。這說明長期運(yùn)動訓(xùn)練可明顯提高淋巴細(xì)胞對運(yùn)動刺激的耐受性，同時(shí)提示長期運(yùn)動訓(xùn)練可縮短運(yùn)動性免疫抑制恢復(fù)的時(shí)間。Malm等的研究顯示，連續(xù)5天的大強(qiáng)度運(yùn)動訓(xùn)練后24 h，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)仍未恢復(fù)，這與選擇的訓(xùn)練方案與施加的訓(xùn)練負(fù)荷有關(guān)。

細(xì)胞凋亡是免疫系統(tǒng)保持穩(wěn)態(tài)并抵御疾病的主要調(diào)節(jié)機(jī)制。研究證實(shí)，細(xì)胞凋亡參與了運(yùn)動后淋巴細(xì)胞數(shù)量的調(diào)控。應(yīng)用TUNEL法，Mars等首次報(bào)道了劇烈運(yùn)動后淋巴細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。隨后的研究顯示，淋巴細(xì)胞凋亡具有運(yùn)動強(qiáng)度依賴性。本研究證實(shí)，不同的身體機(jī)能狀態(tài)是影響安靜時(shí)和運(yùn)動后淋巴細(xì)胞凋亡的重要因素之一。安靜時(shí)訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞凋亡率略高于對照組，這與安靜時(shí)訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)稍低于對照組是一致的。研究表明，淋巴細(xì)胞保持一定凋亡水平有益于刺激淋巴器官中淋巴細(xì)胞的增殖與釋放，是機(jī)體的一種自我調(diào)節(jié)機(jī)制。力竭運(yùn)動后對照組淋巴細(xì)胞凋亡率升高幅度明顯高于訓(xùn)練組，24 h后訓(xùn)練組恢復(fù)至運(yùn)動前水平，而對照組仍居高不下，提示運(yùn)動員經(jīng)過長期運(yùn)動訓(xùn)練，機(jī)體已建立了抵抗運(yùn)動誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡的適應(yīng)機(jī)制，缺乏運(yùn)動習(xí)慣者在劇烈運(yùn)動應(yīng)激刺激下則更易發(fā)生淋巴細(xì)胞凋亡和淋巴細(xì)胞減少癥（運(yùn)動性免疫抑制）。結(jié)合兩組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化，我們認(rèn)為，訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞凋亡的減少和凋亡的迅速恢復(fù)防止了淋巴細(xì)胞數(shù)量的降低。

運(yùn)動造成細(xì)胞氧化還原狀態(tài)的改變是淋巴細(xì)胞凋亡最重要的機(jī)制之一，其初始信號為細(xì)胞內(nèi)自由基的增多。在本研究中，兩組淋巴細(xì)胞羥自由基在運(yùn)動后即刻均顯著升高，自由基可造成線粒體膜電位（MTP）去極化，線粒體膜間隙的某些蛋白如細(xì)胞色素C、凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）隨之釋放入胞漿，分別通過激活細(xì)胞內(nèi)的蛋白水解酶如caspase和依賴于caspase的直接染色質(zhì)凝聚作用（chromatin condensation），從而啟動了凋亡通路。運(yùn)動后即刻，訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞羥自由基升高的程度明顯低于對照組，提示長期運(yùn)動訓(xùn)練可提高機(jī)體的抗氧化水平、減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)，這是通過細(xì)胞內(nèi)的自由基清除系統(tǒng)（谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶等）表達(dá)上調(diào)實(shí)現(xiàn)的。因此，相對于普通人群，運(yùn)動員在運(yùn)動應(yīng)激后其細(xì)胞凋亡程度明顯減輕。運(yùn)動后24 h兩組淋巴細(xì)胞羥自由基均恢復(fù)至運(yùn)動前水平，研究證實(shí)，急性運(yùn)動后自由基顯著升高，但一般在運(yùn)動后24 h恢復(fù)。Viguie等報(bào)道，升高的淋巴細(xì)胞超氧化物在運(yùn)動后1 h即降至安靜水平，提示運(yùn)動后24 h內(nèi)氧化應(yīng)激指標(biāo)即可恢復(fù)。運(yùn)動中和運(yùn)動后數(shù)小時(shí)氧化應(yīng)激水平的暫時(shí)性升高可能是本研究中淋巴細(xì)胞DNA損傷和細(xì)胞凋亡的重要原因。值得注意的是，安靜時(shí)訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞羥自由基高于對照組，一方面解釋了訓(xùn)練組安靜時(shí)淋巴細(xì)胞凋亡率稍高于對照組的現(xiàn)象，有利于淋巴細(xì)胞的更新；另一方面，較高的氧化應(yīng)激狀態(tài)可對機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)作用，因自由基可激活腫瘤抑制基因（如p53）的表達(dá)，從而清除變異細(xì)胞并抑制腫瘤形成與發(fā)展，這也是長期運(yùn)動訓(xùn)練的積極效應(yīng)。

氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的DNA損傷參與了運(yùn)動誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過程，研究指出，淋巴細(xì)胞DNA單鏈斷裂與運(yùn)動強(qiáng)度成正比。8—OHdG是DNA氧化損傷后形成的堿基修飾產(chǎn)物，為DNA脫氧鳥苷的C8位受到羥自由基的攻擊而形成。機(jī)體修復(fù)機(jī)制正常時(shí)，8—OHdG 可以在OGG1的作用下從DNA鏈上切除并重新?lián)饺胝５镍B嘌呤堿基。因此，8—OHdG是DNA氧化損傷的生物標(biāo)志物，而OGG1則代表DNA修復(fù)系統(tǒng)的功能。本研究中，兩組淋巴細(xì)胞8—OHdG在運(yùn)動后即刻以及運(yùn)動后24h均顯著高于運(yùn)動前，表明運(yùn)動誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激狀態(tài)可使DNA損傷持續(xù)存在。Okamura等的研究顯示，連續(xù)8天的訓(xùn)練后尿8—OHdG增加，而淋巴細(xì)胞8—OHdG未發(fā)生改變，并認(rèn)為是由于淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的DNA修復(fù)系統(tǒng)的保護(hù)作用所致，研究結(jié)果的差異可能與受試者選取與訓(xùn)練方法有關(guān)。力竭運(yùn)動后及24 h訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞8—OHdG升高幅度顯著低于對照組，而OGG1升高幅度則顯著高于對照組，提示長期運(yùn)動訓(xùn)練可顯著提高DNA修復(fù)能力，運(yùn)動后DNA損傷明顯減輕。此外，運(yùn)動還可促進(jìn)核編碼的OGG1向線粒體轉(zhuǎn)位，增強(qiáng)線粒體DNA損傷的修復(fù)，這在一定程度上對運(yùn)動誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞凋亡起抑制作用。安靜時(shí)兩組淋巴細(xì)胞8—OHdG無顯著性差異，這可能與受試者的選取有關(guān)。雖然訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞羥自由基高于對照組，但本研究的受試者均為20歲左右的年輕男性，兩組OGG1在運(yùn)動前安靜時(shí)無顯著性差異，說明DNA修復(fù)功能均處于較高水平，因此，DNA氧化損傷能夠被迅速修復(fù)。有趣的是，運(yùn)動后24 h，訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞凋亡率已恢復(fù)正常，但淋巴細(xì)胞8—OHdG仍高于運(yùn)動前水平，這是因?yàn)殡m然力竭運(yùn)動導(dǎo)致DNA損傷，但并不表示損傷的細(xì)胞一定產(chǎn)生凋亡。訓(xùn)練組運(yùn)動后24 h OGG1仍高于運(yùn)動前水平，說明此時(shí)DNA修復(fù)過程仍在繼續(xù)，某些損傷的細(xì)胞可能重新被拯救而免于凋亡。此外，還可能與凋亡細(xì)胞的清除率有關(guān)。凋亡細(xì)胞清除是外周免疫應(yīng)答的最后步驟，并依賴于單核—巨噬細(xì)胞的吞噬活性，這一過程將對免疫應(yīng)答產(chǎn)生復(fù)雜的影響。若清除不及時(shí)，將發(fā)生自身免疫甚至癌癥，若過度清除則產(chǎn)生淋巴細(xì)胞減少癥和免疫缺陷病。劇烈運(yùn)動后常伴隨淋巴細(xì)胞減少癥，因此，運(yùn)動后凋亡細(xì)胞的過度清除可能也是本研究中訓(xùn)練組淋巴細(xì)胞凋亡率在運(yùn)動后24 h恢復(fù)正常的原因之一。

4 結(jié)論

4.1 長期運(yùn)動訓(xùn)練可造成機(jī)體免疫系統(tǒng)的慢性氧化應(yīng)激狀態(tài)，表現(xiàn)為安靜時(shí)淋巴細(xì)胞羥自由基升高、淋巴細(xì)胞凋亡率較高，而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較低。

4.2 一次力竭運(yùn)動可通過產(chǎn)生羥自由基使淋巴細(xì)胞DNA氧化損傷，啟動線粒體凋亡通路，促進(jìn)淋巴細(xì)胞凋亡。

4.3 長期運(yùn)動訓(xùn)練通過降低氧化應(yīng)激水平、提高DNA修復(fù)能力、減輕DNA氧化損傷，抑制運(yùn)動性淋巴細(xì)胞凋亡。

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