李健雄,溫小蘭,李英姿,邱躍華(廣東省東莞市企石醫(yī)院 523500)
肺炎支原體(MP)是處于嬰幼兒、青少年期容易出現(xiàn)的一種由于呼吸道感染而引發(fā)的一種主要危害其身體健康的病原體之一[1]。這種病在臨床上通常表現(xiàn)為呼吸道感染綜合癥狀。在患病人群中,大約有3%~10%的人群可以發(fā)展形成支原體肺炎[2]。但是僅僅依靠臨床的表現(xiàn)很難確定一些兒童的呼吸道感染是由MP引發(fā)的還是由于細(xì)菌等病原體引發(fā)的疾病,因此,在臨床治療上也表現(xiàn)出一定的困難。根據(jù)如今進(jìn)行的關(guān)于4種肺炎支原體的檢驗(yàn)方法來(lái)進(jìn)行MP的類型鑒別,是較為成熟且效果很好的方法?,F(xiàn)將臨床得到結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,報(bào)道如下。
1.1 一般資料 選取本院2010年3月至2011年10月臨床診斷結(jié)果顯示為患有MP感染的兒童138例,年齡為6個(gè)月至4歲。每位患兒都進(jìn)行對(duì)咽拭子的選取,并將選取的咽拭子做成快速培養(yǎng)與咽拭子聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),同時(shí)取患兒的血清采用血清MP被動(dòng)凝集法(MP-Ab)和免疫斑點(diǎn)的方法進(jìn)行檢測(cè)。其中咽拭子和采靜脈血都為2mL。對(duì)4種方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行采集和分析,并根據(jù)以往的治療診斷案例和現(xiàn)今的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。
1.2 方法 對(duì)于第1種采取咽拭子快速液體培養(yǎng)的方法,試劑的選取支原體分離鑒別培養(yǎng)液由珠海市浪峰生物技術(shù)有限公司提供,操作人員嚴(yán)格按照說(shuō)明書來(lái)進(jìn)行操作,在37℃的環(huán)境下進(jìn)行24h的培養(yǎng)后得出的結(jié)果;第2種方式是PCR,試劑由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供,需要在PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn),3h之后送出檢驗(yàn)結(jié)果;第3種是MP-Ab,試劑為日本瑞必歐株式會(huì)社MP-Ab檢測(cè)試劑Serodia-MycoⅡ凝集試驗(yàn)試劑盒,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,取出血標(biāo)本2mL,4h后出結(jié)果;第4種則是采取免疫斑點(diǎn)法,試劑由藍(lán)波生物提供,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,取血標(biāo)本2mL,在進(jìn)行檢驗(yàn)后0.5h后出結(jié)果。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行。計(jì)量資料以±s表示,組內(nèi)比較用重復(fù)測(cè)量的單因素方差分析,組間比較用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 4種MP的檢驗(yàn)結(jié)果 4種MP的陽(yáng)性結(jié)果分別是:快速培養(yǎng)法66例(47.8%),PCR 82例(59.4%),MP-Ab 116例(84.0%),免疫斑點(diǎn)法103例(74.0%)。由以上結(jié)果可見,在4種檢驗(yàn)方法進(jìn)行 MP檢驗(yàn)時(shí),免疫斑點(diǎn)法與MP-Ab對(duì)患兒的MP檢驗(yàn)結(jié)果明顯優(yōu)于PCR與快速培養(yǎng)法,因此,在對(duì)MP進(jìn)行檢測(cè)時(shí),應(yīng)主要選用免疫斑點(diǎn)法或MP-Ab。
2.2 4種方法檢測(cè)MP的時(shí)間比較 采用4種方法檢測(cè)MP時(shí),不但檢測(cè)結(jié)果差距很大,診斷得出結(jié)果的時(shí)間上依然長(zhǎng)短不一??焖倥囵B(yǎng)法24.0h,PCR 3.0h,MP-Ab 4.0h,免疫斑點(diǎn)法0.5h。由以上結(jié)果可見,免疫斑點(diǎn)法在檢測(cè)時(shí)間上最短,對(duì)治療有積極的影響,而PCR與MP-Ab在時(shí)間上沒(méi)有太大區(qū)別,因此,二者在時(shí)間上的可選擇性無(wú)太大差異,快速培養(yǎng)法得出結(jié)果所需要的時(shí)間大約為24h,因此,在醫(yī)生根據(jù)得出結(jié)果時(shí)間上進(jìn)行選擇時(shí),應(yīng)主要圍繞PCR、MP-Ab與免疫斑點(diǎn)法。
在綜合4種MP的檢驗(yàn)方法時(shí),結(jié)合得出結(jié)果所需要的時(shí)間與在檢測(cè)中正確率而言,應(yīng)主要選擇 MP-Ab與免疫斑點(diǎn)法。
MP感染在臨床上的表現(xiàn)是多種多樣的,尤其是對(duì)于嬰幼兒或青少年,可能因?yàn)镸P的感染引起全身各個(gè)肝臟器官受到損害,但主要表現(xiàn)為呼吸道感染[3]。隨著科技的不斷進(jìn)步,對(duì)于4種MP的檢驗(yàn)技術(shù)也在不斷提升,因此檢測(cè)出MP感染的發(fā)病率也在明顯增高,從而受到廣大人民群眾的高度關(guān)注[4]。目前在實(shí)驗(yàn)室中用來(lái)診斷的方法主要有4種:快速培養(yǎng)法、PCR、MP-Ab與免疫斑點(diǎn)法。這4種檢測(cè)方法在診斷MP感染上有不同的效果[5]。
快速培養(yǎng)法主要是利用MP新陳代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物使培養(yǎng)基中的液體的顏色發(fā)生改變,從而確定MP的生長(zhǎng),但是同時(shí)需要向其中加入青霉素等來(lái)減少其他細(xì)菌的滋長(zhǎng),但是整個(gè)過(guò)程需要24h才可以被檢測(cè)出來(lái),因此檢測(cè)率低下。PCR檢測(cè)法相對(duì)于快速培養(yǎng)法呈陽(yáng)性的效率更高,但是這種檢測(cè)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室的研究人員以及實(shí)驗(yàn)室自身的條件要求都很高,兒童在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)也需要咽拭子,因此,容易受到口腔內(nèi)部環(huán)境的影響。MP-Ab在這4種檢測(cè)方法中,陽(yáng)性率最高,其原理是運(yùn)用了表面吸附支原體抗原的明膠顆粒代替動(dòng)物的紅細(xì)胞,從而將原本會(huì)產(chǎn)生的非特異反應(yīng)消除,同時(shí)患者比較容易接受這種檢測(cè)方式,但其自身也有缺點(diǎn):血清產(chǎn)生抗體也會(huì)需要一段時(shí)間,因此不利于早期的診斷。免疫斑點(diǎn)法對(duì)于患者而言,采血的形式容易,陽(yáng)性率高,因此對(duì)患者臨床的癥狀和試驗(yàn)結(jié)果更為準(zhǔn)確,并且對(duì)患者臨床癥狀和臨床試驗(yàn)結(jié)果更為嚴(yán)謹(jǐn)。
因此,對(duì)比這4種方法檢測(cè)MP的檢驗(yàn)結(jié)果,MP-Ab與免疫斑點(diǎn)法都是值得在臨床中推廣使用的檢測(cè)方法。
[1] 馮彩蓮,陳蓮香,付小清,等.2 226例肺炎支原體IgM抗體的檢測(cè)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2006,3(6):244-246.
[2] 陸定,陸詩(shī)強(qiáng),莊麗寶,等.肺炎支原體引起小兒上呼吸道感染的臨床研究[J].中國(guó)當(dāng)代兒科雜志,2006,8(3):205-206.
[3] 周金鳳,黃秀瓊.1 362例呼吸道感染患者痰、咽拭子肺炎支原體培養(yǎng)結(jié)果分析[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2006,6(6):86-87.
[4] 馬雷,劉曄.肺炎支原體兩種檢測(cè)方法的比較[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志,2010,13(12):7-8.
[5] 李滿元.四種肺炎支原體檢驗(yàn)方法臨床應(yīng)用價(jià)值比較[J].中國(guó)民康醫(yī)學(xué),2011,23(14):1825.