楊明峰

(紹興市人民醫(yī)院,浙江 紹興 312000)

糖類相關(guān)抗原19-9(Carbohydratoantigen 19-9,簡稱CA19-9)作為腫瘤標(biāo)志物在消化道腫瘤檢測中具有重要的臨床價(jià)值。目前CA19-9檢測標(biāo)本類型一般用血清或血漿,有文獻(xiàn)報(bào)道血清與血漿中的蛋白質(zhì)含量不一定相同[1],且腫瘤標(biāo)志物在血清與血漿中的穩(wěn)定性有所不同[2],為了在臨床檢測工作中找到最佳的標(biāo)本類型,本文對2009年1月至2月在紹興市人民醫(yī)院消化內(nèi)科住院患者的CA19-9血漿與血清濃度測定進(jìn)行了對比分析。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑 CA 19-9采用美國雅培公司生產(chǎn)的Architect i2000免疫分析儀及配套CA 19-9XR試劑盒(化學(xué)發(fā)光酶免疫分析夾心法),試劑批號∶015-222 2/07。蛋白酶抑制劑PMSF購于上海華舜生物工程有限公司。

1.2 標(biāo)本的收集及處理 早晨7∶00～8∶00真空采血法抽取已知CA19-9檢測結(jié)果高于正常的住院患者血液5ml,分別注入血常規(guī)試管(浙江拱東醫(yī)用塑料廠)2ml和血清試管3ml,共20個(gè)標(biāo)本。標(biāo)本在采血后室溫2小時(shí)內(nèi)分離血清或血漿。將血清標(biāo)本分成均等的兩份,其中一管中加入終濃度為1mM的蛋白酶抑制劑PMSF。同一患者標(biāo)本分為三組∶血清標(biāo)本、血漿標(biāo)本和血清+PMSF組,將這三組同時(shí)放入Architect i2000免疫分析儀測定CA19-9濃度；同時(shí)三組標(biāo)本2～8℃加蓋存放7天,每隔兩天測定CA19-9濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用(±s)表示,血清與血漿CA19-9濃度比較用配對t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 新鮮血清與血漿CA19-9濃度比較 20例新鮮標(biāo)本測定結(jié)果在45～800 U/ml之間,血清CA 19-9測定結(jié)果為(235.69±46.99)U/ml,EDTA-K2抗凝血漿為(247.51±49.28)U/ml。配對 t檢驗(yàn)結(jié)果表明EDTA-K2抗凝血漿CA19-9濃度與血清CA19-9濃度相比無顯著性差異(P＞0.05)。

2.2 2～8℃保存7天血清與血漿CA19-9穩(wěn)定性比較 20例血清與血漿CA19-9穩(wěn)定性比較。結(jié)果表明新鮮血漿與保存7天血漿CA 19-9濃度無顯著性差異(P＞0.05)；而保存7天,血清與血漿CA19-9濃度有顯著性差異(P＜0.05),見表1。

表1 血清與血漿標(biāo)本2～8℃保存期間CA19-9濃度值比較±S)

表1 血清與血漿標(biāo)本2～8℃保存期間CA19-9濃度值比較±S)

與血漿標(biāo)本比較*P＜0.05

組 別 n 新鮮標(biāo)本(U/ml) 保存7天標(biāo)本(U/ml)血 清 20 235.69±46.99 196.90±77.11*血 漿 20 247.51±49.28 237.37±77.67

2.3 蛋白酶抑制劑PMSF對血清標(biāo)本穩(wěn)定性的影響 血清中加入蛋白酶抑制劑PMSF,結(jié)果顯示保存7天,血清+PMSF組與血漿組對CA19-9穩(wěn)定性影響無顯著性差異(P＞0.05),而與血清組相比有顯著性差異(P＜0.05),表明蛋白酶抑制劑PMSF可以提高血清CA19-9的穩(wěn)定性,見表2。

表2 蛋白酶抑制劑PMSF對血清、血漿CA19-9穩(wěn)定性的影響±s)

表2 蛋白酶抑制劑PMSF對血清、血漿CA19-9穩(wěn)定性的影響±s)

與血清+PMSF組比較*P＜0.05

組 別 n 新鮮標(biāo)本CA19-9濃度值(U/ml)保存7天CA19-9濃度值(U/ml)血清 20 223.74±90.30 195.90±97.11*血清+PMSF 20 233.35±90.20 230.31±98.71血漿 20 225.07±98.92 216.36±79.67**

3 討 論

臨床檢測腫瘤標(biāo)志物一般都建議采用血清或抗凝血漿,兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)。血漿中含抗凝成份,可能對某些腫瘤標(biāo)志物檢測有干擾。血清分離需要一定時(shí)間的預(yù)溫處理,尤其在冬季更是如此。本實(shí)驗(yàn)采用新鮮血清與血漿標(biāo)本,檢測結(jié)果表明血清與血漿CA19-9濃度差異不明顯,因此臨床檢測新鮮標(biāo)本可根據(jù)情況采用血清或血漿。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)血清2～8℃保存7天CA19-9濃度有所下降,而血漿組濃度變化不大,說明血漿CA19-9穩(wěn)定性優(yōu)于血清。有文獻(xiàn)報(bào)道凝血酶的濃度可以影響血清腫瘤標(biāo)志物的穩(wěn)定性[2],因此本實(shí)驗(yàn)在血清中加入蛋白酶抑制劑PMSF抑制血清蛋白酶活性,結(jié)果顯示2～8℃保存7天的血清+PMSF組CA19-9濃度高于血清組,說明蛋白酶抑制劑可以增加血清CA19-9的穩(wěn)定性。

[1]李魯平,丁杰峰.抗凝血漿與血清酶活性測定對比分析.浙江實(shí)用醫(yī)學(xué),2003,8(2)∶116

[2]Yoshimura T,Fujita K,Kawakami S,et al.Stability of pro-gastrinreleasing peptide in serum versus plasma.Tumor Biology,2008(4),29∶224