劉瑞敏，朱立鳴，梁玉杰，段永強，虎俊瑞

(1.甘肅省人民醫(yī)院，甘肅蘭州 730000;2.甘肅中醫(yī)學院基礎部，甘肅蘭州 730000)

生津利咽含片中藥復方是在中醫(yī)理論的指導下，根據(jù)陰虛津虧、生熱生燥的理論，結合臨床經(jīng)驗，以中醫(yī)古方與導師經(jīng)驗方相結合，采用滋陰生津、潤燥利咽的治法研制出的治療慢性咽炎的中藥制劑。根據(jù)以往的研究，臨床運用養(yǎng)陰利咽治療慢性咽炎有著明顯確切的療效。本課題著重從生津利咽含片的抗炎、鎮(zhèn)痛角度，為中醫(yī)藥防治慢性咽炎的新藥開發(fā)提供一些實驗依據(jù)，以促進提高中醫(yī)藥對慢性咽炎的理論認識和防治水平。

1 材料

1.1 動物

SPF級昆明種小鼠(合格證號SCXK甘2004-0006-0000197)，雌雄各半，體重20g±2g，由甘肅中醫(yī)學院醫(yī)學實驗中心提供。

1.2 儀器

電子天平，規(guī)格型號:Sartorius BL150，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.3 藥物

生津利咽含片(粉末)組方:生甘草、烏梅、玄參、桔梗、青果、制大黃由威海迪沙藥業(yè)集團公司提供制劑。金果飲咽喉片(市售)，山東綠因藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號070213，臨用前蒸餾水配成所需濃度;冰醋酸(乙酸)(分析純)，廣東汕頭市西隴化工廠，批號 0502161;甲醛，成都化學試劑廠，批號830920-2;瓊脂，上海中秦化學試劑有限公司，批號20070921;二甲苯，北京五二九五二化工廠，批號870317。

2 方法

下列各項實驗將小鼠隨機分為5組，即計量高、中、低組和陽性藥物(金果飲咽喉片)及蒸餾水對照組。等效劑量以60 kg成人常規(guī)劑量按人與動物體型系數(shù)折算。

2.1 瓊脂所致小鼠肉芽腫反應

給藥前1 h在小鼠背中線同一部位將毛剪盡，行淺麻(腹腔注射10%烏拉坦0.15ml·20g－1)，背部皮下無菌快速注射2%瓊脂0.2ml，各組動物每天分別給藥1次，連續(xù)14d。第14天將小鼠斷頭處死，仔細剝離并取出各組動物的瓊脂肉芽組織，剔除結締組織，電子天平稱重，并換算每100g體質重肉芽腫重量。

2.2 二甲苯所致小鼠耳腫脹

連續(xù)給藥7d，末次給藥后30min后，以二甲苯棉球接觸小鼠左耳5s，15min后將動物拉頸處死，用直徑7mm打孔器將小鼠雙耳相同部位等面積切下稱重，以左右兩耳耳片重量差作為腫脹厚度。

2.3 甲醛所致小鼠足腫脹的影響

連續(xù)7d，末次給藥1h后，小鼠右足注射0.05ml 2.5%甲醛致炎，致炎后分別于 0.5h、1h、2h、4h、6h用數(shù)顯千分卡尺測定小鼠右足腫脹厚度。

2.4 鎮(zhèn)痛實驗(醋酸致小鼠扭體法)

每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7d，末次給藥后1h，小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.20ml/只，觀察記錄各組小鼠15min內的扭體次數(shù)并計算出每分鐘扭體次數(shù)。

2.5 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)輸入計算機，采用SPSS13.0軟件統(tǒng)計，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(s)表示，根據(jù)方差齊性采用單因素方差分析(One-Way-ANOVN)。

3 結果

3.1 生津利咽含片對瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響

表1 生津利咽含片對瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響(s)

表1 生津利咽含片對瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響(s)

注:與蒸餾水對照組比較:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組別 動物數(shù)(n)劑量(g/kg)肉芽腫(g/100g體重)蒸餾水對照組 10 —0.43±0.21生津利咽大劑量組 10 0.88 0.11±0.04**生津利咽中劑量組 10 0.44 0.17±0.06**生津利咽小劑量組 10 0.22 0.25 ±0.07**△金 果 飲 組 10 0.50 0.14±0.05**

3.2 生津利咽含片對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響

表2 生津利咽含片對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(s)

表2 生津利咽含片對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(s)

注:與蒸餾水對照組比較:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組別 動物數(shù)(n)劑量(g/kg)腫脹度(g)蒸餾水對照組 10 —0.0060±0.0020生津利咽大劑量組 10 0.88 0.0018±0.0006**生津利咽中劑量組 10 0.44 0.0018±0.0005**生津利咽小劑量組 10 0.22 0.0029±0.0011*△金 果 飲 組 10 0.50 0.0022±0.0007**

3.3 生津利咽含片對甲醛所致小鼠足腫脹的影響

表3 生津利咽含片對甲醛所致小鼠足腫脹的影響(s)

表3 生津利咽含片對甲醛所致小鼠足腫脹的影響(s)

注:與蒸餾水對照組比較:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組別 動物數(shù)(只)劑量(g/kg)0.5h 1h 2h 4h 6h蒸 餾 水 對 照 組 10 — 0.75±0.29 0.63±0.22 0.72±0.25 0.79±0.26 0.75±0.20生津利咽大劑量組 10 0.880.10±0.03** 0.09±0.03** 0.16±0.07** 0.18±0.08** 0.17±0.08**△生津利咽中劑量組 10 0.440.10±0.05** 0.08±0.02** 0.08±0.01**△△ 0.15±0.02**△ 0.13±0.02**△生津利咽小量組 10 0.220.09±0.03** 0.11±0.04** 0.15±0.06** 0.21±0.07** 0.26±0.07**金 果 飲 組 10 0.500.08±0.03** 0.10±0.05** 0.16±0.07** 0.20±0.08** 0.24±0.09**

3.4 生津利咽含片對醋酸所致小鼠扭體反應的影響

表4 生津利咽含片對醋酸所致小鼠扭體反應的影響(s)

表4 生津利咽含片對醋酸所致小鼠扭體反應的影響(s)

注:與蒸餾水對照組相比:*P<0.05，**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05，△△P<0.01

組每分鐘扭體次數(shù)蒸餾水對照組 10 —別 動物數(shù)(n)劑量(g/kg)1.95±0.35生津利咽大劑量組 10 0.88 0.92±0.23**生津利咽中劑量組 10 0.44 1.07±0.22**生津利咽小劑量組 10 0.22 1.28 ±0.26**△金 果 飲 組 10 0.50 0.96±0.31**

4 討論

結果表明，生津利咽含片對二甲苯致小鼠耳腫脹具有良好的抑制作用，并且對甲醛致小鼠足腫脹具有良好的抑制作用，表明生津利咽含片對炎癥早期的滲出有抑制作用，從而減輕或消除咽部黏膜彌漫性充血及組織內滲出液積聚而引起的黏膜腫脹。生津利咽含片能顯著抑制瓊脂致小鼠肉芽腫炎性反應增生，說明其對炎癥后期的結締組織增生有抑制作用。以上作用提示，生津利咽含片可能對急慢性咽炎均有一定的治療作用。

慢性咽炎患者咽部常伴有微痛感。痛覺是一種復雜的感覺，常伴有不愉快的情緒反應。疼痛與炎癥的關系是密不可分的，炎癥介質如組胺、5-羥色胺、緩激肽、白三烯等均可激活傷害性感受器而產(chǎn)生疼痛作用。前列腺素雖不能引起明顯的疼痛，但可降低痛覺感受器靶細胞的痛閾而對其他致痛因子有增敏作用。在本論文所采用的鎮(zhèn)痛實驗模型中，醋酸致小鼠扭體主要是間接通過腹腔產(chǎn)生急性炎癥反應所致。實驗結果發(fā)現(xiàn)，生津利咽含片能顯著降低醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)，提示其具有良好的鎮(zhèn)痛作用。該作用有利于緩解慢性咽炎伴隨的疼痛感覺。