[摘 要]目的 探究天然煅燒骨粉（CBB）聯(lián)合濃縮生長因子（CGF）對牙周骨缺損的修復作用。方法 選取2022年4月-2023年4月我院收治的60例牙周骨缺損患者為研究對象，隨機分為對照組和研究組，每組30例。對照組采用CBB治療，研究組采用CBB聯(lián)合CGF治療，比較兩組牙齦愈合情況、牙周指標及垂直骨缺損高度（VDD）。結(jié)果 研究組牙齦愈合良好率為76.67%，高于對照組的46.67%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；兩組術(shù)后6個月BI、PD、CAL均低于術(shù)前，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；兩組術(shù)后6個月VDD均低于術(shù)前，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 CBB聯(lián)合CGF修復牙周骨缺損在改善牙周健康和修復軟硬組織方面表現(xiàn)出更理想的效果，優(yōu)于單獨使用CBB治療，可有效修復牙周骨缺損，促進牙齦愈合，改善牙周指標，臨床應用價值確切。

[關(guān)鍵詞] 牙周骨缺損；天然煅燒骨粉；濃縮生長因子

[中圖分類號] R783.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1004-4949（2024）21-0058-05

基金項目：2022年珠海市社會發(fā)展領(lǐng)域科技計劃項目（編號：2220004000212）

Study on the Application of Natural Calcined Bovine Bone Combined with Concentrated Growth Factor in the Repair of Periodontal Bone Defect

QI Huihua1， LIANG Yuanwei1， LIU Yinglu2

（1.Department of Stomatology， the Fifth people’s Hospital of Zhuhai， Zhuhai 519000， Guangdong， China； 2.Department of Special Clinic， Zhuhai Stomatological Hospital， Zhuhai 519000， Guangdong， China）

[Abstract]Objective To investigate the effect of natural calcined bovine bone （CBB） combined with concentrated growth factor（CGF） on the repair of periodontal bone defects. Methods A total of 60 patients with periodontal bone defects admitted to our hospital from April 2022 to April 2023 were randomly divided into control group and study group， with 30 patients in each group. The control group was treated with CBB， and the study group was treated with CBB combined with CGF. The gingival healing， periodontal index and vertical bone defect height （VDD） were compared between the two groups. Results The good rate of gingival healing in the study group was 76.67%， which was higher than 46.67% in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The BI， PD and CAL of the two groups at 6 months after operation were lower than those before operation， and the study group was lower than the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. The VDD of the two groups at 6 months after operation was lower than that before operation， and that of the study group was lower than that of the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion CBB combined with CGF in the repair of periodontal bone defects shows a more ideal effect in improving periodontal health and repairing soft and hard tissues， which is better than CBB alone. Meanwhile， it can effectively repair periodontal bone defects， promote gingival healing， and improve periodontal indicators. The clinical application value is accurate.

[Key words] Periodontal bone defect； Calcined bovine bone； Concentrated growth factor

牙周骨缺損（periodontal bone defect）是由牙周病引起的一種漸進性、不可逆的病理過程，主要表現(xiàn)為牙周附著喪失和牙齒松動。恢復牙周附著和牙齒穩(wěn)固是治療牙周病的最終目標[1]。近年來，生物活性材料的植入已成為促進牙周骨重建成的研究熱點之一。人工骨植入因其不引起二次創(chuàng)傷和用量不受限制的優(yōu)勢，在牙周治療中得到廣泛的關(guān)注，然而其昂貴的成本和易吸收的缺點仍需克服[2]。天然煅燒骨粉（calcined bovine bone，CBB）是一種從牛骨中提取的物質(zhì)，主要成分為羥基磷灰石，具備多孔性、骨引導性和骨誘導作用。CBB類似于自然骨的微孔結(jié)構(gòu)，能夠支持和引導新骨向縱深生長，并提供支架供新骨和新生血管生長，因此被廣泛應用于骨缺損修復[3]。濃縮生長因子（concentrated growth factor，CGF）是通過自體靜脈血分離離心制備的血小板濃縮制品，富含多種生長因子和纖維蛋白，具有促進組織再生的能力，廣泛應用于種植骨缺損修復、上頜竇提升、位點保存、根尖和牙周手術(shù)等領(lǐng)域[4，5]。本研究結(jié)合2022年4月-2023年4月珠海市口腔醫(yī)院收治的60例牙周骨缺損患者臨床資料，旨在探討CBB聯(lián)合CGF在牙周骨缺損修復中的作用，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2022年4月-2023年4月珠海市口腔醫(yī)院收治的60例牙周骨缺損患者為研究對象，隨機分為對照組和研究組，每組30例。對照組男12例，女18例；年齡22～55歲，平均年齡（36.68±3.25）歲。研究組男13例，女17例；年齡20～53歲，平均年齡（36.46±2.88）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），研究可比。本研究所有患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準 納入標準：①口腔內(nèi)至少存在一個牙周袋深度（PD）≥6 mm，并且臨床牙周附著喪失（CAL）≥3 mm的位點，經(jīng)臨床和X線檢查證實有骨下牙周袋存在；②骨缺損范圍≥0.2 cm×0.2 cm×0.2 cm；③年齡30～55歲；④配合度良好。排除標準：①由侵襲性或惡性骨腫瘤引起的骨缺損；②近3個月內(nèi)使用可能影響或促進骨代謝的藥物治療；③存在活動性感染性病變或代謝性骨病導致的骨缺損；④存在心臟疾?。á蚣壖耙陨闲墓δ芗膊。?；⑤具有肝腎功能異常（ALT、AST>正常值的1.5倍，血肌酐超過正常范圍值，血鈣、血磷電解質(zhì)超過正常范圍）；⑥糖尿病控制不佳患者（空腹血糖仍≥8.0 mmol/L）；過敏性體質(zhì)者；⑦存在各種可能導致口腔影像檢查偽影的情況，例如使用金屬義齒或烤瓷牙；⑧臨床資料缺失或中途退出研究者。

1.3 方法

1.3.1材料 本研究使用的材料包括CBB（陜西瑞盛生物科技有限公司）和CGF（自行制備）。CGF的制備過程如下：術(shù)前從肘靜脈抽取20 ml血液，將血液置于不含抗凝劑的玻璃涂層離心管內(nèi)，然后放入離心機中以2400～3000 rpm的轉(zhuǎn)速離心12 min。離心后，血液分為3層：最上層為乏血小板的血清層，中間層為CGF纖維蛋白凝塊，此凝塊整體較大而致密，并且富含濃縮的生長因子，底層為紅細胞層。使用無菌鑷子取出CGF纖維蛋白凝塊，靜置10 min，然后用無菌剪刀去除紅細胞層和血漿層。根據(jù)手術(shù)需要，將CGF壓制成膜片或剪成碎顆粒狀，備用。

1.3.2治療方法 60例患者骨下牙周袋分布于雙尖牙、下頜第一和第二磨牙，牙齒的松動程度不超過Ⅰ度，并通過口腔探測確定至少存在一個牙周袋深度大于3 mm的位置，在完成牙周基礎(chǔ)治療1個月后，接受相應治療。對照組采用CBB治療：首先，在常規(guī)麻醉下，使用0.12%醋酸氯己定溶液含漱3 min，對術(shù)區(qū)進行消毒，鋪巾，在術(shù)區(qū)齦緣處做內(nèi)斜切口，盡量保留牙齦，切口包括近中和遠中相鄰的一顆牙。翻開頰側(cè)和舌側(cè)的黏膜瓣，將肉芽組織刮凈，平整根面，并用生理鹽水沖洗，記錄骨下牙周袋的深度和寬度。然后，在骨下牙周袋區(qū)域植入CBB材料，將牙齦瓣復位，并進行嚴密縫合。術(shù)后，放置牙周塞治劑，14 d后拆線，予以頭孢克洛膠囊（四川制藥制劑有限公司，國藥準字H20067033，規(guī)格：0.25 g/粒）（0.5 g/次，3次/d）和甲硝唑片（安徽貝克生物制藥有限公司，國藥準字H32020145，規(guī)格：0.2 g/片）（0.4 g/次，3次/d）口服1周。此外，患者需每天使用復方氯己定溶液（江蘇晨牌邦德藥業(yè)有限公司，國藥準字H20058018，規(guī)格：200 ml/瓶）含漱，10 ml/次，3次/d，連續(xù)使用6周。囑患者術(shù)后4周內(nèi)避免咬硬物，定期隨訪和進行口腔衛(wèi)生維護，在術(shù)后6個月后進行CBCT拍攝。研究組采用CBB植骨聯(lián)合CGF治療：在骨下牙周袋區(qū)域植入CBB材料和CGF材料，一部分CGF材料被壓成1～2 mm的微粒，并與CBB材料混合充填到骨缺損區(qū)，填充后與骨袋口齊平，另一部分CGF材料被壓成膜片狀，覆蓋在缺損區(qū)的根面和牙槽骨表面，利用CBB植骨和CGF的生物學特性來促進牙周骨缺損的修復和再生，其余步驟同對照組一致。術(shù)后的護理和隨訪方式同對照組一致。

1.4 觀察指標

1.4.1評估兩組牙齦愈合情況 于術(shù)后6個月由同一名醫(yī)師對兩組患者的牙齦愈合情況進行評估，分為牙齦愈合良好、牙齦愈合不良。①牙齦愈合良好：牙間隙的齦乳頭充盈，且高度約等于或略低于牙齦緣，牙齦緣覆蓋釉牙骨質(zhì)界，無明顯的牙齦退縮；或者牙齦緣稍微向根尖方向退縮，暴露部分牙根，探針探診測量釉牙骨質(zhì)界至牙齦緣的距離為1～2 mm，出現(xiàn)輕度牙齦退縮；②牙齦愈合不良：齦乳頭在牙間隙未被完全填充，或者出現(xiàn)牙齦緣退縮，牙根暴露，探診測量釉牙骨質(zhì)界至牙齦緣的距離大于2 mm，出現(xiàn)牙齦中重度退縮。

1.4.2測量兩組牙周指標 于術(shù)前及術(shù)后6個月分別對兩組患者的出血指數(shù)（BI）、牙周袋深度（PD）、臨床附著喪失（CAL）進行測量，由同一名醫(yī)師完成，以評價牙周恢復情況。①BI：用鈍頭牙周探針輕探入齦溝或袋底，取出探針30 s后觀察有無出血及出血程度，以0～5分記分：0分=牙齦健康，無炎癥及出血；1分=牙齦顏色有炎癥性改變，探診不出血；2分=探診后有點狀出血；3分=探診出血沿牙齦緣擴散；4分=出血流滿并溢出齦溝；5分=自動出血[6]；②PD：使用Williams牙周刻度探針測量，精準到1 mm；③CAL：使用Williams牙周刻度探針測量，精準到1 mm。

1.4.3記錄兩組垂直骨缺損高度 于術(shù)前及術(shù)后6個月拍攝兩組患者的根尖片，以釉牙骨質(zhì)界作為基準點，計算釉牙骨質(zhì)界至骨袋底部的缺損垂直距離A，減除釉牙骨質(zhì)界至牙槽嵴頂水平線的垂直距離B，垂直骨缺損高度（DD）（mm）=A-B。VDD可用于評估骨缺損充填及牙周組織再生情況，VDD數(shù)值越大表明牙槽骨的垂直破壞程度越嚴重，牙周支持組織喪失越嚴重。術(shù)后VDD減少超過50%，說明大部分骨缺損已修復。

2 結(jié)果

2.1 兩組牙齦愈合情況比較 對照組牙齦愈合良好14例，牙齦愈合不良16例；研究組牙齦愈合良好23例，牙齦愈合不良7例。研究組牙齦愈合良好率為76.67%（23/30），高于對照組的46.67%（14/30），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=5.711，P=0.017）。

2.2 兩組牙周指標比較 兩組術(shù)后6個月BI、PD、CAL均低于術(shù)前，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.3 兩組垂直骨缺損高度比較 兩組術(shù)后6個月垂直骨缺損高度均低于術(shù)前，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

3 討論

異種骨移植聯(lián)合生長因子已成為治療牙周骨缺損的重要方法[7，8]。既往臨床研究發(fā)現(xiàn)[9]，使用Bio-Oss膠原和Bio-Gide膜治療牙周骨缺損的有效性確切，可改善PD和CAL指標，并促進牙周新附著和骨再生。在一項兔下頜雙皮質(zhì)骨缺損的實驗中顯示[10]，富血小板血漿聯(lián)合Bio-Oss膠原和BioGide膜的治療同樣表現(xiàn)出促進骨再生的顯著作用。然而，關(guān)于國產(chǎn)材料治療牙周骨缺損的研究報道相對較少。研究發(fā)現(xiàn)[11]，CBB能夠有效提高骨再生能力，在修復顱骨和牙槽骨缺損方面顯示出積極作用。在拔牙后的頜骨缺損修復中，CBB的治療效果達到93%以上，并能夠在24周內(nèi)有效保持牙槽骨的寬度和高度，效果與Bio-Oss膠原相當，且未見明顯副作用[12]。由于CBB的成分類似于人體骨組織，并能與體內(nèi)的骨改建速度相匹配，因此有極大潛力成為一種有效治療牙周骨缺損的新型材料[13]。

本研究結(jié)果顯示，研究組牙齦愈合良好率為76.67%，高于對照組的46.67%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），表明CBB聯(lián)合CGF治療在改善牙周狀況和骨缺損方面的效果良好，可使牙齦炎癥得到減輕，改善牙周附著水平，減少骨缺損的修復，證實了CBB作為一種骨移植材料在牙周骨缺損治療中的積極作用和臨床有效性。理想的骨移植材料應具有與自然骨相似的連續(xù)微孔結(jié)構(gòu)，以支持和引導新生骨向縱深生長并填充移植材料[14]。CBB修復材料經(jīng)過脫脂、脫蛋白處理和低溫煅燒，保留了天然骨的骨小梁和骨內(nèi)管腔系統(tǒng)，具備連續(xù)多孔結(jié)構(gòu)，這有利于細胞因子的復合和新生骨細胞的滲入，并且具有適當?shù)膹姸茸鳛橹Ъ懿牧?，同時也具有良好的生物相容性[15]。兩組術(shù)后6個月垂直骨缺損高度均低于術(shù)前，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），提示在術(shù)后6個月時觀察到CBB治療后有新骨形成，且骨密度與骨缺損周圍相近，進一步證實CBB是一種較好的骨移植材料。CGF通過Medifuge離心機交替變速離心模式制備出的第三代制劑，可釋放更高濃度的生長因子，并具備更堅韌三維纖維蛋白結(jié)構(gòu)[16]。研究表明[17]，CGF可加速植骨材料與自體組織的整合，還能促進微血管生成，且具有一定的免疫調(diào)節(jié)功能，有助于骨缺損部位實現(xiàn)組織重建，從而使牙周組織的功能性再生成為可能。本研究結(jié)果還顯示，兩組術(shù)后6個月BI、PD、CAL均低于術(shù)前，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），表明CBB聯(lián)合CGF治療在改善牙周狀況和修復骨缺損方面效果更佳。CGF富含生長因子，能夠刺激骨細胞的增值和分化，促進骨組織的再生和修復，加速骨損傷部位的愈合過程，同時還具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用，有助于減輕炎癥反應。CBB聯(lián)合CGF治療利用了CBB的骨支架功能和CGF的生物活性雙重優(yōu)勢，使骨缺損區(qū)的新生骨更為穩(wěn)固，骨密度更高，牙周組織的功能性恢復更加理想。相較于單獨使用CBB，CBB聯(lián)合CGF的治療方法在修復效果上更為理想，為牙周骨缺損患者提供了一種更為優(yōu)越的治療選擇。

綜上所述，CBB聯(lián)合CGF修復牙周骨缺損在改善牙周健康和修復軟硬組織方面表現(xiàn)出更理想的效果，優(yōu)于單獨使用CBB治療，可有效修復牙周骨缺損，促進牙齦愈合，改善牙周指標，臨床應用價值確切。

[參考文獻]

[1]Martin C，Sanz M.Orthodontic tooth movement after periodontal regeneration of intrabony defects[J].Korean J Orthod，2024，54（1）：3-15.

[2]Seshima F，Bizenjima T，Aoki H，et al.Periodontal Regenerative Therapy Using rhFGF-2 and Deproteinized Bovine Bone Mineral versus rhFGF-2 Alone：4-Year Extended Follow-Up of a Randomized Controlled Trial[J]. Biomolecules，2022，12（11）：1682.

[3]Liu K，Huang Z，Chen Z，et al.Treatment of periodontal intrabony defects using bovine porous bone mineral and guided tissue regeneration with/without platelet-rich fibrin：A randomized controlled clinical trial[J].J Periodontol，2021，92（11）：1546-1553.

[4]Sun S，Xu X，Zhang Z，et al.A novel concentrated growth factor （CGF） and bio-oss based strategy for second molar protection after impacted mandibular third molar extraction：a randomized controlled clinical study[J].BMC Oral Health，2023，23（1）：750.

[5]Samarth G，Kolte A，Kolte R，et al.Comparative evaluation of demineralized freeze-dried bone allograft with and without concentrated growth factor membrane in the treatment of periodontal intrabony defects：a randomized controlled clinical trial[J].Clin Oral Investig，2023，27（4）：1645-1657.

[6]孟煥新.牙周病學[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：130.

[7]Meghil MM，Mandil O，Nevins M，et al.Histologic Evidence of Oral and Periodontal Regeneration Using Recombinant Human Platelet-Derived Growth Factor[J].Medicina（Kaunas），2023，59（4）：676.

[8]Alshujaa B，Talmac AC，Altindal D，et al.Clinical and radiographic evaluation of the use of PRF，CGF，and autogenous bone in the treatment of periodontal intrabony defects：Treatment of periodontal defect by using autologous products[J].J Periodontol，2024，95（8）：729-739.

[9]Ramires GAD，Helena JT，Oliveira JCS，et al.Evaluation of Guided Bone Regeneration in Critical Defects Using Bovine and Porcine Collagen Membranes：Histomorphometric and Immunohistochemical Analyses[J].Int J Biomater，2021，2021：8828194.

[10]Mao Y，Hu M，Chen L，et al.CGF-HLC-I repaired the bone defect repair of the rabbits mandible through tight junction pathway[J].Front Bioeng Biotechnol，2022，10：976499.

[11]Zhang Y，Luo W，Zheng L，et al.Efficient bone regeneration of BMP9-stimulated human periodontal ligament stem cells （hPDLSCs） in decellularized bone matrix （DBM） constructs to model maxillofacial intrabony defect repair[J].Stem Cell Res Ther，2022，13（1）：535.

[12]巨佳，楊馳，武和明，等.黃牛煅燒骨填充材料用于拔牙后牙槽骨缺損修復的效果評價[J].上?？谇会t(yī)學，2023，32（2）：198-202.

[13]Osuchukwu OA，Salihi A，Abdullahi I，et al.A pedagogical approach for the development and optimization of a novel mix of biowastes-derived hydroxyapatite using the Box-Behnken experimental design[J]. Heliyon，2023，10（1）：e23092.

[14]Gani MA，Budiatin AS，Lestari MLAD，et al.Fabrication and Characterization of Submicron-Scale Bovine Hydroxyapatite：A Top-Down Approach for a Natural Biomaterial[J].Materials （Basel），2022，15（6）：2324.

[15]Li Y，Tan Z，Zhang J，et al.Physical and Chemical Properties，Biosafety Evaluation，and Effects of Nano Natural Deer Bone Meal on Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells[J].Front Bioeng Biotechnol，2022，10：891765.

[16]Lee HM，Shen EC，Shen JT，et al.Tensile strength，growth factor content and proliferation activities for two platelet concentrates of platelet-rich fibrin and concentrated growth factor[J].J Dent Sci，2020，15（2）：141-146.

[17]Shyu SS，F(xiàn)u E，Shen EC.Clinical and Microcomputed Topography Evaluation of the Concentrated Growth Factors as a Sole Material in a Cystic Bony Defect in Alveolar Bone Followed by Dental Implantation：A Case Report[J].Implant Dent，2016，25（5）：707-714.

收稿日期：2024-3-21 編輯：扶田