郭樂(lè)樂(lè)，李榮香，呂大嬌，胥 博

漯河市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)與遺傳中心·河南省生育力保護(hù)和優(yōu)生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 漯河 462000

男性不育是臨床上較為常見(jiàn)的一類(lèi)病癥。隨著現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展，男性受嗜煙、酗酒、熬夜、縱欲過(guò)度等不良生活習(xí)慣的影響，其不育風(fēng)險(xiǎn)逐漸上升，而較大的生活壓力也將進(jìn)一步增加男性不育問(wèn)題的發(fā)生率［1］。相關(guān)研究［2］顯示，生殖道感染是男性不育問(wèn)題的重要影響因素，沙眼衣原體（CT）與淋球菌（NG）是對(duì)生殖影響較大的兩種感染源。此外，解脲支原體（UU）由于具有較高的感染率，且對(duì)抗精子抗體與精子的結(jié)合具有促進(jìn)作用，導(dǎo)致感染者精子活力與功能降低，對(duì)感染者的精液質(zhì)量具有不利影響。但臨床上各類(lèi)感染因素對(duì)男性生育問(wèn)題的影響程度還存在著較大爭(zhēng)議。本研究旨在分析男性門(mén)診孕前體檢者與男性不育者的UU、CT、NG 感染率與精液參數(shù)，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2020 年9 月—2022 年3 月樣本醫(yī)院收治的150例接受精液檢測(cè)分析的門(mén)診患者作為研究對(duì)象，將100例男性不育者納為觀(guān)察組，將50例男性孕前體檢者納為對(duì)照組。觀(guān)察組：年齡23～42 歲，平均年齡（31.28±2.45）歲。對(duì)照組：年齡23～41 歲，平均年齡（30.89±2.37）歲。兩組患者一般資料具有可比性（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀(guān)察組患者與妻子具有1 年以上同居經(jīng)歷并未孕育，經(jīng)臨床診斷確診為不育者。②觀(guān)察組患者性生活正常，且無(wú)其他明顯疾病。③所有受檢者均對(duì)本研究?jī)?nèi)容知情且同意。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)［3］：①觀(guān)察組患者受無(wú)精子癥、遺傳疾病、性功能障礙等問(wèn)題的影響導(dǎo)致不育。②受檢者在檢測(cè)前1 個(gè)月內(nèi)存在服用抗生素類(lèi)藥物經(jīng)歷。③受檢測(cè)精液存在病原學(xué)檢測(cè)不全問(wèn)題。

1.2 方法

兩組受檢者均接受精液檢測(cè)。受檢者在檢驗(yàn)前需嚴(yán)格禁欲2～7 d，禁欲期間要保持良好的生活習(xí)慣，禁煙禁酒。檢測(cè)時(shí)，采用手淫法采集受檢者精液，并將精液保存于無(wú)菌器皿中。取樣結(jié)束后，需立即將樣本送至檢驗(yàn)科進(jìn)行檢驗(yàn)，樣本需保存于37 ℃的恒溫環(huán)境中，并于1 h 內(nèi)完成對(duì)精液樣本的檢驗(yàn)分析。檢驗(yàn)過(guò)程中，檢驗(yàn)人員要嚴(yán)格遵循相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與要求執(zhí)行操作，減少檢驗(yàn)結(jié)果的誤差。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

以WHO 制定的《人類(lèi)精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》［4］為標(biāo)準(zhǔn)，以精子計(jì)數(shù)板與精子質(zhì)量分析儀對(duì)受檢者精液樣本的質(zhì)量參數(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)。對(duì)于部分精液密度低、不適用于機(jī)器檢驗(yàn)的樣本，需采用人工顯微鏡進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)指標(biāo)包含精液量、精子濃度、總精子數(shù)、精子總活力、精子前向運(yùn)動(dòng)比例及精子畸形率。各指標(biāo)正常值參考范圍為：精液量≥1.5 mL，精子濃度≥15×106/mL，總精子數(shù)≥39×106/次，精子總活力≥40%，精子前向運(yùn)動(dòng)比例≥32%，精子畸形率≤96%。UU 感染率［5］：樣本送檢后浸入到培養(yǎng)液中，于37 ℃恒溫環(huán)境中對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行24～72 h 的培養(yǎng)，用UU培養(yǎng)藥敏試劑盒對(duì)培養(yǎng)結(jié)束后的樣本進(jìn)行檢測(cè)。若樣本培養(yǎng)液顏色由橙變紅，則為陽(yáng)性，提示存在UU 生長(zhǎng)；若樣本培養(yǎng)液顏色不變，則為陰性。CT 感染率［6］：用尿道拭子對(duì)受檢者進(jìn)行核酸檢驗(yàn)樣本采集，采用熒光定量PCR 方案與熒光定量PCR 儀對(duì)樣本CT-DNA 進(jìn)行檢測(cè)。NG 感染率：將樣本接種至TM 培養(yǎng)基中，于37 ℃環(huán)境下孵育48 h，取透明、邊緣整齊、呈水滴狀的可疑菌落，采用細(xì)菌自動(dòng)鑒定儀進(jìn)行鑒定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者常規(guī)精液分析情況

兩組受檢者在精液量、精子濃度、總精子數(shù)、精子總活力與精子向前運(yùn)動(dòng)方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀(guān)察組受檢者精子畸形率高于對(duì)照組受檢者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組受檢者常規(guī)精液分析情況（±s）

表1 兩組受檢者常規(guī)精液分析情況（±s）

組別觀(guān)察組（n=100）對(duì)照組（n=50）t值P值精液量（mL）3.49±1.44 3.84±1.52 1.377 0.170精子濃度（×106/mL）54.81±39.76 56.74±40.63 0.278 0.781總精子數(shù)（×106/次）195.57±161.22 211.71±162.08 0.577 0.565精子總活力（%）60.05±22.14 61.75±20.88 0.452 0.652精子向前運(yùn)動(dòng)（%）45.53±20.65 46.86±17.83 0.389 0.698精子畸形率（%）97.32±1.44 68.76±10.22 27.494＜0.001

2.2 兩組受檢者UU、CT及NG感染率情況

兩組受檢者UU 感染率、CT 感染率與NG 感染率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組受檢者UU、CT及NG感染率情況 例（%）

2.3 觀(guān)察組受檢者UU感染陽(yáng)性與陰性的精液參數(shù)情況

觀(guān)察組受檢者中，UU 感染陽(yáng)性與陰性患者精液量、精子濃度、總精子數(shù)、精子總活力及精子向前運(yùn)動(dòng)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），陽(yáng)性患者的精子畸形率高于陰性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 觀(guān)察組受檢者UU感染陽(yáng)性與陰性的精液參數(shù)情況（±s）

表3 觀(guān)察組受檢者UU感染陽(yáng)性與陰性的精液參數(shù)情況（±s）

組別陽(yáng)性（n=30）陰性（n=70）t值P值精液量（mL）3.46±1.28 3.53±1.45 0.229 0.819精子濃度（×106/mL）50.72±40.83 56.24±39.81 0.631 0.530總精子數(shù)（×106/次）181.63±154.95 200.36±164.82 0.530 0.597精子總活力（%）58.36±23.27 60.85±22.41 0.503 0.616精子向前運(yùn)動(dòng)（%）44.07±21.86 45.88±20.47 0.397 0.692精子畸形率（%）97.63±1.82 94.47±2.05 7.296＜0.001

3 討論

男性不育問(wèn)題是男科常見(jiàn)的一類(lèi)病癥，其病發(fā)原因多與遺傳因素或不良生活習(xí)慣有關(guān)。有研究［7］顯示，生殖道感染對(duì)不良生育問(wèn)題具有重要影響。目前，臨床已驗(yàn)證，UU、CT、NG、人型支原體與生殖道支原體可引發(fā)尿道炎、前列腺炎等生殖道感染問(wèn)題，但支原體在生殖道感染中可表現(xiàn)為無(wú)明顯癥狀與體征的定植狀態(tài)，因此，臨床上對(duì)于支原體、衣原體在生殖道中的致病意義存在較大爭(zhēng)議。臨床觀(guān)點(diǎn)普遍認(rèn)為，泌尿生殖道中存在一個(gè)具有多種泌尿道菌落的微生物群落環(huán)境，而非處于一個(gè)無(wú)菌環(huán)境，在該微生物群落中存在乳酸菌、厭氧菌、葡萄球菌、棒狀桿菌等多種菌落，同潛在的炎癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)與前列腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)均具有相關(guān)性［8］。但生殖道感染對(duì)男性不育者精液質(zhì)量的影響，臨床上尚未得出定論。

支原體在人體中是一種條件致病菌，而UU 是人體泌尿生殖道感染問(wèn)題中最為常見(jiàn)的一種支原體，同時(shí)也是男性生殖道感染與不育癥診斷中一項(xiàng)重要的常規(guī)檢查項(xiàng)目。目前，臨床上對(duì)于UU 在男性不育問(wèn)題中的作用機(jī)制尚未明確。有研究［9］顯示，UU 感染后可黏附于生精細(xì)胞表面或侵入生精細(xì)胞中，導(dǎo)致精母細(xì)胞的細(xì)胞膜受到損壞，從而使精母細(xì)胞的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。此外，UU 感染后還將對(duì)曲細(xì)精管內(nèi)生精上皮形成侵犯，從而對(duì)精子的產(chǎn)生與成熟造成不利影響，導(dǎo)致患者出現(xiàn)不育問(wèn)題。有研究［10］指出，UU 可附著于精子頭部與尾部，導(dǎo)致精子游動(dòng)無(wú)力、相互纏繞，且能夠產(chǎn)生神經(jīng)胺酶樣物質(zhì)，對(duì)精子與卵子的接觸形成干擾，進(jìn)一步加重感染者的不育情況。另有研究［11］指出，由于精子與精子膜蛋白之間存在交叉免疫反應(yīng)，而UU吸附于精子細(xì)胞表面能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞活化，從而通過(guò)細(xì)胞免疫功能實(shí)現(xiàn)對(duì)精子細(xì)胞的滅殺。CT 是一種具有獨(dú)特發(fā)育周期與專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)的原核型微生物，能夠在正常男性的尿道分泌物中檢測(cè)出來(lái)。相關(guān)研究［12］顯示，CT 感染會(huì)導(dǎo)致精子凋亡情況加劇，對(duì)精子的頂體膜造成損傷，使精子頂體消失，從而對(duì)精子的穿透能力造成嚴(yán)重的不利影響。除此之外，CT 感染還可引發(fā)免疫反應(yīng)，導(dǎo)致感染者機(jī)體產(chǎn)生抗精子抗體，從而加重感染者的不育情況。有研究［13］指出，CT 在寄生過(guò)程中能夠?qū)λ拗骷?xì)胞的細(xì)胞代謝功能起到抑制作用，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生溶解、破壞，溶酶體內(nèi)大量的水解酶釋放出來(lái)，誘發(fā)生殖道炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步加重感染者的不育情況。NG 是一種能夠引發(fā)泌尿生殖道化膿性感染的寄生菌，主要存在于尿道炎患者的膿性分泌物中。NG 感染可通過(guò)泌尿系統(tǒng)與生殖道擴(kuò)散至附睪、前列腺、精囊腺等部位，并引發(fā)炎癥反應(yīng)，而附睪炎可引發(fā)輸精管水腫、梗阻及相鄰睪丸實(shí)質(zhì)性萎縮問(wèn)題，前列腺炎則能夠引發(fā)射精管水腫、受壓?jiǎn)栴}［14］。在附睪炎、前列腺炎等病癥的影響下，感染者具有較高的少精子癥、無(wú)精子癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，并為感染者帶來(lái)不育問(wèn)題。

本研究結(jié)果的產(chǎn)生原因與精液參數(shù)指標(biāo)易受多因素影響有關(guān)。當(dāng)前社會(huì)活動(dòng)中所存在的大氣污染、水體污染、不良生活飲食習(xí)慣等問(wèn)題，均會(huì)對(duì)男性精液參數(shù)指標(biāo)產(chǎn)生影響。此外，常規(guī)精液分析指標(biāo)僅為男性生育能力評(píng)估中的一個(gè)項(xiàng)目，而男性精液參數(shù)在生殖道感染外也可能存在其他影響因素。受檢者出于性經(jīng)歷復(fù)雜、猜測(cè)自身生育能力不佳或在研究中存在隱瞞自身病史等原因，導(dǎo)致病史調(diào)查結(jié)果失真。在生殖道感染問(wèn)題方面，相關(guān)研究［15］已證實(shí)，CT 感染與NG 感染能夠?qū)δ行缘纳芰υ斐蓢?yán)重?fù)p害。研究［16］發(fā)現(xiàn)，UU 感染陽(yáng)性患者的精子濃度、精子存活率與前向運(yùn)動(dòng)比例均低于陰性患者，而陽(yáng)性患者的精子畸形率要高于陰性患者。分析其原因在于，UU 與精子膜糖蛋白之間存在交叉抗原，在交叉抗原的影響下，免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的UU 抗體不僅能與UU 結(jié)合，也能與精子進(jìn)行結(jié)合，從而導(dǎo)致精液參數(shù)各方面指標(biāo)降低。UU 在融入精子細(xì)胞后會(huì)對(duì)精子活動(dòng)產(chǎn)生不利影響，導(dǎo)致精子的運(yùn)動(dòng)方式發(fā)生變化，并引發(fā)精子畸形問(wèn)題。本研究中，由于樣本量較少，且UU 感染陽(yáng)性不育者與陰性不育者在數(shù)量上存在較大差距，因此導(dǎo)致研究結(jié)果存在一定差異。在精子畸形率上，UU 感染陽(yáng)性不育者的發(fā)生率要高于陰性不育者，提示UU 感染對(duì)不育患者精子形態(tài)存在明顯的不利影響，UU 感染為男性不育者精子質(zhì)量的重要影響因素之一。

綜上所述，UU 感染容易引發(fā)精子畸形問(wèn)題，對(duì)男性不育患者的精液質(zhì)量與不育情況產(chǎn)生不利影響，同時(shí)也是臨床診療中一項(xiàng)重要的觀(guān)察指標(biāo)。而UU、CT、NG 感染對(duì)男性不育者精液質(zhì)量的影響有待加入更多參考因素，展開(kāi)更加全面的探究。