陳佳 陳光福

【摘要】 目的 對酵母樣真菌抗真菌藥物最低抑菌濃度（minimal inhibit concentration，MIC）進行藥敏試驗，為臨床合理用藥提供相關(guān)依據(jù)。方法 采集銅仁市人民醫(yī)院從2020年1月—2022年6月根據(jù)常規(guī)培養(yǎng)方式培養(yǎng)出344株酵母樣真菌進行MIC藥敏試驗，對試驗結(jié)果進行分析，統(tǒng)計標本來源類型、科室、不同種類酵母樣真菌的分布情況，對主要酵母樣真菌的藥敏性進行分析。結(jié)果 培養(yǎng)出的344株酵母樣真菌標本來源科室主要為重癥醫(yī)學科（23.55%）、神經(jīng)外科（15.12%）;標本類型主要為尿液標本（56.69%），其次為分泌物標本與切口分泌物標本（均12.21%）;酵母樣真菌種類主要為白色假絲酵母菌（39.83%），其次為光滑假絲酵母菌（22.97%）、克柔假絲酵母菌（14.83%）、熱帶假絲酵母菌（9.88%）。白色假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素B的敏感性較高，克柔假絲酵母菌對兩性霉素B、伏立康唑的敏感性較高。結(jié)論 應(yīng)當對重癥醫(yī)學科、神經(jīng)外科的患者及中老年患者加強酵母樣真菌感染的預(yù)防，尤其是對尿路感染的預(yù)防。不同種類的酵母樣真菌對不同抗真菌藥物敏感性有所不同，酵母樣真菌MIC藥敏試驗對臨床上合理使用抗真菌藥物具有重要的指導(dǎo)價值。

【關(guān)鍵詞】 酵母樣真菌;最低抑菌濃度藥敏試驗;耐藥性

文章編號：1672-1721（2024）05-0091-04? ? ?文獻標志碼：A? ? ?中國圖書分類號：R519;R446.5

真菌感染在臨床中比較多見。真菌感染多為侵襲性真菌感染，又稱為侵襲性真菌病，在細胞免疫功能低下者中更容易發(fā)生，具有較高的致病性與致死性[1]。酵母樣真菌是侵襲性真菌病中常見的病原菌之一[2]。酵母樣真菌屬于單細胞真菌，由于其外觀類似酵母型菌落，被稱為酵母樣真菌。據(jù)相關(guān)報道顯示，全球每年因侵襲性真菌病造成的死亡人數(shù)約160萬人。念珠菌（即假絲酵母菌）引起的真菌病發(fā)病率為0.50%～0.69%。在我國住院患者中，念珠菌感染發(fā)病率呈逐漸增長趨勢[3]。隨著我國人口老齡化問題的日益突出，老年住院患者增多。老年患者存在免疫力低下、患有慢性疾病、具有長期用藥史、導(dǎo)管滯留等多種特殊情況，發(fā)生侵襲性真菌病的風險增大。本研究采集了銅仁市人民醫(yī)院在2020年1月—2022年6月培養(yǎng)出的344株酵母樣真菌進行MIC藥敏試驗分析，對其分布特征與藥物敏感性特征進行分析，以有效防治侵襲性真菌病，為指導(dǎo)臨床用藥提供相關(guān)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標本來源

銅仁市人民醫(yī)院從2020年1月—2022年6月根據(jù)常規(guī)培養(yǎng)方式培養(yǎng)出的344株酵母樣真菌。

1.2 方法

儀器設(shè)備：梅里埃VITEK2全自動鑒定儀、梅里埃ATB-FUNGUS3酵母樣真菌藥敏試劑盒、安圖生物念珠菌顯色平板、沙保羅瓊脂平板、37 ℃恒溫培養(yǎng)箱、比濁儀、移液器、旋渦混合儀。

培養(yǎng)方法：挑取平板上培養(yǎng)不超過4 d的純菌落，用質(zhì)量分數(shù)為0.85%的氯化鈉溶液制成2 McF的菌懸液。用移液器取20 μL菌懸液到ATBF3培養(yǎng)基的安瓿中，用吸管混勻。用移液器在每個杯狀凹槽中加入135 μL混勻的ATB F3培養(yǎng)基。蓋好試條蓋子，置于濕盒。（35 ±2 ）℃培養(yǎng)，念珠菌屬培養(yǎng)（24±2）h，新生隱球菌培養(yǎng)（48±6）h。

結(jié)果判讀：在黑暗背景下進行肉眼判讀，對每1個抗真菌藥物，從低濃度開始，與生長對照杯狀凹比較，兩性霉素B和5-氟胞嘧啶記錄完全抑制生長的濃度為MIC，氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑與生長對照相比生長量有明顯的減少（80%抑制）的濃度可作為這些抗真菌藥物的MIC。S為敏感，I為中度敏感，R為耐藥。

1.3 觀察指標

統(tǒng)計標本來源類型、科室、不同種類酵母樣真菌的分布情況，以及主要酵母樣真菌的藥敏性。

2 結(jié)果

2.1 標本來源科室分布情況

標本來源科室主要為重癥醫(yī)學科、神經(jīng)外科，見表1。

2.2 標本來源類型分布情況

標本來源主要為尿液標本，其次為分泌物標本與切口分泌物標本，見表2。

2.3 標本來源患者年齡分布情況

標本來源患者的年齡集中在39～74歲，見表3。

2.4 標本不同種類酵母樣真菌分布情況

標本中，白色假絲酵母菌占比最高，見表4。

2.5 主要酵母樣真菌的藥敏性分析

白色假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素B的敏感性較高，克柔假絲酵母菌對兩性霉素B、伏立康唑的敏感性較高，見表5。

3 討論

3.1 酵母樣真菌MIC藥敏試驗的優(yōu)勢

抗真菌感染療程長，大部分藥物不良反應(yīng)多，治療方案設(shè)計不合理可出現(xiàn)耐藥和肝腎功能減退，因此真菌藥敏試驗在臨床診療工作中顯得尤為重要。傳統(tǒng)的K-B法只能定性，不能定量。MIC藥敏試驗?zāi)軌颢@得較精準的藥物濃度，為抗真菌感染治療方案設(shè)計提供技術(shù)支撐，為遏制真菌耐藥提供依據(jù)。在臨床用藥中，抗感染藥物在患者體內(nèi)需要達到的濃度不能低于MIC值，才能有效抵抗病原微生物。MIC值越小，則反映藥物對抵抗病原微生物的能力越強。微量肉湯稀釋法是檢測病原菌MIC試驗中的常用有效方法，其檢測準確性較高[4]。在一些研究中，將微量肉湯稀釋法的檢測結(jié)果作為標準，用于對新檢測方法檢測效能的分析[5]。在本次研究中選擇了微量肉湯稀釋法進行MIC藥敏試驗。

3.2 標本來源分布情況

在本次研究中，培養(yǎng)出的344株酵母樣真菌標本來源科室主要為重癥醫(yī)學科與神經(jīng)外科，其占比分別為23.55%、15.12%，說明銅仁市人民醫(yī)院的重癥醫(yī)學科與神經(jīng)外科收治的患者更容易發(fā)生酵母樣真菌感染。劉寶等[6]的研究顯示，分離得到的酵母樣真菌主要來自住院患者的檢測標本，其中來自重癥監(jiān)護室患者的標本最多，與本研究結(jié)果有相似之處。重癥醫(yī)學科與神經(jīng)外科收治的患者通常自身體質(zhì)較差，免疫力低下，容易受到外部環(huán)境中病原菌的侵襲，且在治療、護理過程中侵入性操作較多，如吸痰、氣管切開、留置導(dǎo)尿管、留置引流管等，會進一步增加病原菌侵襲風險。神經(jīng)外科患者術(shù)后存在的手術(shù)切口也是引發(fā)感染的重要因素。研究結(jié)果提示銅仁市人民醫(yī)院應(yīng)當加強對重癥醫(yī)學科、神經(jīng)外科患者的感染預(yù)防。此次研究顯示，酵母樣真菌標本來源標本類型主要為尿液標本，占比為56.69%，其次為分泌物標本與切口分泌物標本，占比均為12.21%。程鵬等[7]的研究顯示，酵母樣真菌標本來源主要為血液標本，其次為引流液、穿刺液等，與本研究結(jié)果不同。這可能與收治病種的差異有關(guān)。銅仁市人民醫(yī)院酵母樣真菌標本主要來自重癥醫(yī)學科與神經(jīng)外科收治的患者，這類患者多因昏迷、尿潴留、尿失禁等需要留置尿管，故導(dǎo)致泌尿系統(tǒng)感染的風險增加。本次研究結(jié)果可知，肺部真菌感染的病例較少，這可能與醫(yī)院一直重視對患者的肺部感染預(yù)防有關(guān)，也反映出該院對患者的尿路感染預(yù)防工作欠缺，還需加強、改進。本次研究還顯示，酵母樣真菌標本來源患者的年齡集中在39～74歲，表明酵母樣真菌感染好發(fā)于中老年患者中。中老年患者相比青年患者疾病通常更為嚴重，機體受到的損傷更大，而且中老年患者通常存在多種疾病合并的現(xiàn)象，治療措施增多，侵入性操作隨之增加。研究結(jié)果提示臨床應(yīng)當加強對中老年患者的酵母樣真菌感染預(yù)防。

3.3 不同種類酵母樣真菌分布及藥敏性

本次研究中，酵母樣真菌種類主要為白色假絲酵母菌，占比為39.83%，其次為光滑假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌，占比分別為22.97%、14.83%、9.88%。高振祥等[8]、范欣等[9]的研究中，均顯示白色假絲酵母菌的占比最高，證實白色假絲酵母菌是引起真菌病的重要病原菌。在本次研究的藥敏性分析中發(fā)現(xiàn)，白色假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素B的敏感性較高，克柔假絲酵母菌對兩性霉素B、伏立康唑的敏感性較高。上述研究結(jié)果與趙董強等[10]、吳春芳等[11]的研究結(jié)果有不同之處，表明在不同地區(qū)或者不同醫(yī)院感染酵母樣真菌的耐藥性特征存在差異，提示臨床應(yīng)當積極做好菌株鑒定與藥敏性試驗，根據(jù)實際檢測結(jié)果選擇抗真菌藥物。本次研究結(jié)果可知，兩性霉素B對整體的酵母樣真菌感染治療具有較好的敏感性，可作為銅仁市人民醫(yī)院酵母樣真菌感染治療的首選藥物;5-氟胞嘧啶與伏立康唑在不同酵母樣真菌中所產(chǎn)生的藥敏性存在較大差異，故在臨床上需要針對具體的感染菌種選擇性用藥;氟康唑與伊曲康唑?qū)φw的酵母樣真菌感染治療均出現(xiàn)較高的耐藥性，且光滑假絲酵母菌對氟康唑、伊曲康唑敏感存在固有的敏感性低的現(xiàn)象，克柔假絲酵母菌對氟康唑天然耐藥，在酵母樣真菌感染治療中應(yīng)當避免使用這2種藥物。

3.4 針對本次研究提出的建議

重癥醫(yī)學科、神經(jīng)外科是酵母樣真菌感染的高發(fā)科室，且酵母樣真菌感染容易發(fā)生于尿路系統(tǒng)中。重癥醫(yī)學科、神經(jīng)外科在對患者實施治療、護理的過程中，應(yīng)當重視對尿路感染的觀察和預(yù)防，對相關(guān)措施進行改進，減少感染的發(fā)生。尿路系統(tǒng)感染早期無典型癥狀，尤其昏迷、意識障礙等患者無法主動表達自覺癥狀，使尿路系統(tǒng)感染在早期不容易被發(fā)現(xiàn)。臨床醫(yī)護人員應(yīng)當做好對引流尿液的觀察和送檢，及早發(fā)現(xiàn)、及早治療，降低酵母樣真菌感染對患者健康的危害程度。

一旦經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)酵母樣真菌感染，應(yīng)當積極采取抗真菌治療。由于獲得菌株鑒定、藥敏試驗結(jié)果的等待時間較長，為積極控制酵母樣真菌感染的進一步發(fā)展，可根據(jù)既往的相關(guān)經(jīng)驗總結(jié)，通過患者的原發(fā)疾病情況、疑似感染發(fā)病部位等推斷最可能出現(xiàn)的病原菌，給予抗真菌經(jīng)驗治療。比如根據(jù)本次研究的統(tǒng)計結(jié)果，可在等待藥敏試驗結(jié)果期間給予對整體酵母樣真菌感染具有較好敏感性的兩性霉素B。在獲得藥敏試驗結(jié)果后，再根據(jù)患者的具體情況調(diào)整抗真菌的用藥方案。

嚴格按照藥物劑量規(guī)定用藥。針對病情嚴重的患者，可適當增加劑量，但要考慮抗真菌藥物大劑量用藥可能引起的不良反應(yīng)。應(yīng)選擇聯(lián)合用藥方案，通過控制不同種類抗真菌藥物的劑量，降低不良反應(yīng)的發(fā)生風險。

綜上所述，重癥醫(yī)學科、神經(jīng)外科是銅仁市人民醫(yī)院較容易發(fā)生酵母樣真菌感染的2個科室，感染部位以泌尿系統(tǒng)為主，主要發(fā)生在中老年患者中;不同種類的酵母樣真菌對不同抗真菌藥物敏感性有所不同，酵母樣真菌MIC藥敏試驗對臨床上合理使用抗真菌藥物具有重要的指導(dǎo)價值。

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（編輯：徐亞麗）

作者簡介：陳 佳，女，本科，副主任技師。