陳正民　李乃樹　劉子祥　姚超　孫發(fā)締　許兆龍

【摘要】 目的：探討微小核糖核酸-7-5p（miR-7-5p）/成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4（FGFR4）軸與膽囊癌病理特征、預(yù)后的關(guān)系。方法：選取蚌埠醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院2018年4月—2022年4月收治的膽囊癌患者108例為膽囊癌組，按照2∶1比例選取同期收治的良性膽囊疾病患者54例為良性組。比較兩組miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)水平，分析二者表達(dá)與膽囊癌病理特征的關(guān)系。以患者入院第1天作為隨訪起始日，截至2023年4月30日，記錄隨訪期間的生存率，分析miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)與膽囊癌預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果：膽囊癌組miR-7-5p mRNA表達(dá)低于良性組，F(xiàn)GFR4 mRNA表達(dá)高于良性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且膽囊癌患者miR-7-5p mRNA與FGFR4 mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤最大直徑≥3 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化患者的miR-7-5p mRNA表達(dá)水平均低于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤最大直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中-高分化患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤最大直徑≥3 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化患者的FGFR4 mRNA表達(dá)水平均高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤最大直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中-高分化患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。miR-7-5p mRNA高表達(dá)組生存率高于低表達(dá)組，平均生存期長(zhǎng)于低表達(dá)組，兩組生存曲線比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。FGFR4 mRNA高表達(dá)組生存率低于低表達(dá)組，平均生存期短于低表達(dá)組，兩組生存曲線比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。COX回歸分析提示，miR-7-5p mRNA表達(dá)增高是膽囊癌預(yù)后的保護(hù)因素，F(xiàn)GFR4 mRNA表達(dá)增高是膽囊癌預(yù)后的危險(xiǎn)因素（P<0.05）。結(jié)論：膽囊癌組織中miR-7-5p mRNA表達(dá)下調(diào)，F(xiàn)GFR4 mRNA表達(dá)上調(diào)，二者存在相關(guān)性，且與臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度密切相關(guān)，是膽囊癌預(yù)后的獨(dú)立影響因素，有望成為預(yù)測(cè)膽囊癌預(yù)后的重要指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 膽囊癌 微小核糖核酸-7-5p 成纖維生長(zhǎng)因子受體4 病理特征 預(yù)后

Relationship between miR-7-5p/FGFR4 Axis and Clinicopathological Features and Prognosis of Gallbladder Carcinoma/CHEN Zhengmin， LI Naishu， LIU Zixiang， YAO Chao， SUN Fadi， XU Zhaolong. //Medical Innovation of China， 2023， 20（33）： 00-007

[Abstract] Objective： To investigate the relationship between microRNA-7-5p （miR-7-5p）/fibroblast growth factor receptor 4 （FGFR4） axis and pathological features and prognosis of gallbladder carcinoma. Method： A total of 108 patients with gallbladder carcinoma admitted to the 2nd Affiliated Hospital of BBMC from April 2018 to April 2022 were selected as the gallbladder carcinoma group， and according to the ratio of 2∶1， 54 patients with benign gallbladder disease admitted during the same period were selected as the benign group. The expression levels of miR-7-5p mRNA and FGFR4 mRNA were compared between the two groups， and the relationship between the expression and pathological features of gallbladder carcinoma were analyzed. With the first day of the patient's admission was taken as the start date of follow-up， and as of April 30， 2023. The survival rate during follow-up was recorded， and the relationship between the expression of miR-7-5p mRNA and FGFR4 mRNA and the prognosis of gallbladder carcinoma was analyzed. Result： The expression of miR-7-5p mRNA in gallbladder carcinoma group was lower than that in benign group， and FGFR4 mRNA expression in gallbladder carcinoma group was higher than that in benign group， the differences were statistically significant （P<0.05）， and miR-7-5p mRNA was negatively correlated with FGFR4 mRNA expression in gallbladder carcinoma patients （P<0.05）. The expression levels of miR-7-5p mRNA in patients with clinical stage Ⅲ-Ⅳ， maximum tumor diameter ≥3 cm， with lymph node metastasis and poorly differentiation were lower than those in patients with clinical stage Ⅰ-Ⅱ， maximum tumor diameter <3 cm， no lymph node metastasis and moderate-well differentiation， the differences were statistically significant （P<0.05）. The expression levels of FGFR4 mRNA in patients with clinical stage Ⅲ-Ⅳ， maximum tumor diameter ≥3 cm， with lymph node metastasis and poorly differentiation were higher than those in patients with clinical stage Ⅰ-Ⅱ， maximum tumor diameter <3 cm， no lymph node metastasis and moderate-well differentiation， the differences were statistically significant （P<0.05）. The survival rate of the high expression group of miR-7-5p mRNA was higher than that of the low expression group， and the average survival time of the high expression group was longer than that of the low expression group， and the survivorship curve of the two groups was statistically significant （P<0.05）. The survival rate of the high expression group of FGFR4 mRNA was lower than that of the low expression group， and the average survival time of the high expression group was shorter than that of the low expression group， and the survivorship curve of the two groups was statistically significant （P<0.05）. COX regression analysis suggested that the increased expression of miR-7-5p mRNA was a protective factor for the prognosis of gallbladder carcinoma， and the increased expression of FGFR4 mRNA was a risk factor for the prognosis of gallbladder carcinoma （P<0.05）. Conclusion： The expression of miR-7-5p mRNA is down-regulated and FGFR4 mRNA expression is up-regulated in gallbladder carcinoma tissues， and the two are correlated. And they are closely related to clinical staging， tumor size， lymph node metastasis and differentiation degree. They are independent factors influencing the prognosis of gallbladder carcinoma， and are expected to be an important indicator for predicting the prognosis of gallbladder carcinoma.

[Key words] Gallbladder carcinoma miR-7-5p FGFR4 Pathological features Prognosis

First-author's address： The 2nd Affiliated Hospital of BBMC， Bengbu 233000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.33.001

膽囊癌是惡性程度較高的一種消化系統(tǒng)腫瘤，死亡率在各類惡性腫瘤中居第6位，但若能盡早確診，及時(shí)行根治性手術(shù)，5年生存率較理想[1]。然而，膽囊癌早期發(fā)病隱匿，缺乏典型癥狀，當(dāng)出現(xiàn)明顯癥狀時(shí)，往往已發(fā)展為中晚期，錯(cuò)過最佳干預(yù)時(shí)機(jī)，預(yù)后欠佳[2]。臨床必須尋求新的膽囊癌相關(guān)標(biāo)志物與治療靶點(diǎn)，為治療提供依據(jù)，提高遠(yuǎn)期生存率，改善預(yù)后。研究表明微小核糖核酸（microRNA，miRNA）與腫瘤發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)，它能直接降解靶基因mRNA，或?qū)Φ鞍追g過程進(jìn)行抑制，經(jīng)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達(dá)水平，參與細(xì)胞增殖、黏附、侵襲、轉(zhuǎn)移、凋亡等過程，可通過作用于下游分子及相關(guān)信號(hào)通路，發(fā)揮抑癌或促癌作用[3]。既往研究發(fā)現(xiàn)，miR-7-5p可以通過靶向絲氨酸/蘇氨酸激酶11的3UTR對(duì)非小細(xì)胞肺癌的A549細(xì)胞凋亡進(jìn)行調(diào)控[4]。這表明miR-7-5p與腫瘤疾病存在關(guān)聯(lián)，但與膽囊癌病理特征、預(yù)后的關(guān)系尚未徹底明確。另有研究指出，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR）能與其配體相互作用，參與腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移等過程，F(xiàn)GFR4作為FGFR家族的成員，亦與腫瘤發(fā)生有關(guān)[5]。基于此，本研究旨在分析miR-7-5p/FGFR4軸與膽囊癌病理特征、預(yù)后的關(guān)系，進(jìn)一步明確miR-7-5p與FGFR4的關(guān)系，以及二者在膽囊癌中的作用機(jī)制，為該病日后的治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取蚌埠醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院2018年4月—2022年4月收治的膽囊癌患者108例為膽囊癌組，按照2︰1比例選取同期收治的良性膽囊疾病患者54例為良性組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：膽囊癌組，①經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)為膽囊癌，且留取組織樣本檢測(cè)miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)水平；②年齡≥18歲；③精神狀態(tài)及認(rèn)知、表達(dá)能力正常，可配合隨訪。良性組，①良性膽囊疾病，同期于本院接受手術(shù)治療，留取樣本組織檢測(cè)miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)水平；②年齡≥18歲；③精神狀態(tài)、認(rèn)知、表達(dá)正常。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①同時(shí)患其他原發(fā)性腫瘤；②此次因膽囊癌復(fù)發(fā)入院接受手術(shù)治療；③術(shù)前行新輔助放療、化療；④出血性疾病、心臟病、血液系統(tǒng)疾病；⑤肝、腎、腦等重要臟器功能不全。研究方案獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)?；颊呋蚣覍賹?duì)研究知情同意。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 利用逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）檢測(cè)膽囊樣本組織中miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)水平。主要儀器為離心機(jī)（Avanti JXN-30型，美國(guó)貝克曼庫爾特有限公司）、PCR檢測(cè)儀（ABI 7500型，美國(guó)ABI公司）、熒光定量PCR儀（LightCycler96型，瑞士羅氏公司）。主要試劑為Trizol試劑（美國(guó)Invitrogen公司）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑（美國(guó)貝克曼庫爾特有限公司）。

1.2.2 檢測(cè)方法 通過手術(shù)獲取樣本組織，并存放在液氮內(nèi)完全冷凍，研磨成粉末狀，經(jīng)Trizol試劑完全裂解，對(duì)總RNA進(jìn)行提取，測(cè)定其純度與濃度，存至低溫環(huán)境（-80 ℃）。將RNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，引物采用Primer 5.0軟件設(shè)計(jì)，以β-actin為內(nèi)參，上、下游引物序列具體如下，（1）miR-7-5p：5-TAATGGTGTTGGGAATGATGGAAT-3、5-TTGGTGGGTGGGGTGGGAAAATA-3；（2）FGFR4：5-TATGGTGGGAAATGGATGGAT-3、5-TAATGGGTAGTGGAATGTTGTAT-3；（3）β-actin：5-TTTGTGGGGTGAATGTAAAATGG-3、5-TGGTGAAGTGGGGTGGAATG-3。PCR反應(yīng)條件：95 ℃ 5 min（預(yù)變性）；95 ℃ 30 s（變性），62 ℃ 35 s（退火），72 ℃ 30 s（延伸），35個(gè)循環(huán)。根據(jù)2-ΔΔCt法確定目標(biāo)基因的表達(dá)水平。

1.3 隨訪

以患者入院第1天作為隨訪起始日，截至2023年4月30日，采用電話/微信隨訪，記錄患者的生存率，每3個(gè)月進(jìn)行1次隨訪。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

經(jīng)SPSS 20.0軟件統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，行字2檢驗(yàn)；滿足正態(tài)分布的計(jì)量資料以（x±s）表示，多組間比較行單因素方差分析，兩兩比較行LSD檢驗(yàn)，兩組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；利用Kaplan-Meier法與log-rank檢驗(yàn)進(jìn)行生存分析；兩計(jì)量資料的相關(guān)性采用Pearson線性相關(guān)分析；miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)與膽囊癌預(yù)后的關(guān)系采用COX回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較

兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見表1。

2.2 兩組miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)比較

膽囊癌組miR-7-5p mRNA表達(dá)低于良性組，F(xiàn)GFR4 mRNA表達(dá)高于良性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。Pearson線性相關(guān)分析提示，膽囊癌患者miR-7-5p mRNA與FGFR4 mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.735，P<0.05）。

2.3 膽囊癌患者miR-7-5p mRNA表達(dá)與病理特征的關(guān)系

臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤最大直徑≥3 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化患者的miR-7-5p mRNA表達(dá)水平均低于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤最大直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中-高分化患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.4 膽囊癌患者FGFR4 mRNA表達(dá)與病理特征的關(guān)系

臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤最大直徑≥3 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化患者的FGFR4 mRNA表達(dá)水平均高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤最大直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中-高分化患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表4。

2.5 miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)與膽囊癌預(yù)后的關(guān)系

本次隨訪時(shí)間為12～36個(gè)月，中位隨訪時(shí)間24個(gè)月。（1）以膽囊癌患者miR-7-5p mRNA表達(dá)的均值2.45為界（≥均值為高表達(dá)，<均值為低表達(dá)），分為miR-7-5p mRNA高表達(dá)組（n=58）與低表達(dá)組（n=50）。結(jié)果提示，miR-7-5p mRNA高表達(dá)組生存率為74.14%（43/58），平均生存期32個(gè)月，低表達(dá)組生存率為42.00%（21/50），平均生存期26個(gè)月。miR-7-5p mRNA高表達(dá)組生存率高于低表達(dá)組，平均生存期長(zhǎng)于低表達(dá)組，兩組生存曲線比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（log-rank 字2=11.727，P<0.001），見圖1。（2）以膽囊癌患者FGFR4 mRNA表達(dá)的均值34.69為界（≥均值為高表達(dá)，<均值為低表達(dá)），分成FGFR4 mRNA高表達(dá)組（n=61）與低表達(dá)組（n=47）。結(jié)果提示，F(xiàn)GFR4 mRNA高表達(dá)組生存率為47.54%（29/61），平均生存期28個(gè)月，低表達(dá)組生存率為74.47%（35/47），平均生存期32個(gè)月。FGFR4 mRNA高表達(dá)組生存率低于低表達(dá)組，平均生存期短于低表達(dá)組，兩組生存曲線比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（log-rank 字2=7.429，P=0.006），見圖2。

2.6 miR-7-5p mRNA、FGFR4 mRNA表達(dá)與膽囊癌預(yù)后的COX回歸分析

在調(diào)整了性別、年齡、臨床分期、腫瘤最大直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、病理類型后，COX回歸分析提示，miR-7-5p mRNA表達(dá)增高是膽囊癌預(yù)后的保護(hù)因素，F(xiàn)GFR4 mRNA表達(dá)增高是膽囊癌預(yù)后的危險(xiǎn)因素（P<0.05），見表5。

3 討論

目前，臨床對(duì)膽囊癌診療已取得了一定進(jìn)展，但由于早期診斷難度大，部分患者就診時(shí)已出現(xiàn)早期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，甚至侵犯肝臟，即便行手術(shù)治療，術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)仍較高[6-7]。臨床亟須進(jìn)一步掌握膽囊癌的發(fā)病與進(jìn)展機(jī)制，尋求新的治療靶點(diǎn)。膽囊癌侵襲、轉(zhuǎn)移過程非常復(fù)雜，涉及多種信號(hào)通路、效應(yīng)因子、腫瘤微環(huán)境等因素[8]，但具體機(jī)制現(xiàn)階段尚無定論。miRNA是非編碼單鏈小分子RNA，能對(duì)各種生物過程進(jìn)行調(diào)控，如調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡，并且參與了免疫應(yīng)答、神經(jīng)元發(fā)育等過程，與腫瘤發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)[9]。miR-7-5p則在多類惡性腫瘤中發(fā)揮了調(diào)控作用，且通過不同途徑影響患者病情[10-11]，但關(guān)于其對(duì)膽囊癌的作用機(jī)制有待進(jìn)一步探討。FGFR4在肝癌等腫瘤組織中存在異常表達(dá)，參與了腫瘤血管形成過程[12]。通過分析miR-7-5p、FGFR4與膽囊癌進(jìn)展、預(yù)后的關(guān)系，便于更深入掌握與之相關(guān)的治療靶點(diǎn)。

本次結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與良性膽囊疾病組織相比，膽囊癌組織中miR-7-5p mRNA表達(dá)下調(diào)，而FGFR4 mRNA表達(dá)上調(diào)，且在膽囊癌患者中二者呈負(fù)相關(guān)。研究指出miR-7-5p是一種腫瘤抑制因子，對(duì)腫瘤生長(zhǎng)、侵襲有抑制作用[13]。王富霞等[14]發(fā)現(xiàn)，miR-7-5p能與聚合酶ε基因4[polymerase （DNA-directed） epsilon 4，POLE4]靶向結(jié)合，對(duì)非小細(xì)胞肺癌的腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移進(jìn)行抑制。劉志洋等[15]研究提示，miR-7-5p能對(duì)POLE4表達(dá)進(jìn)行靶向抑制，從而抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤的增殖、侵襲。彭慧等[16]發(fā)現(xiàn)，食管癌組織中miR-7-5p呈低表達(dá)，Krüppel樣因子4（Krüppel-like factor 4，KLF4）呈過表達(dá)，miR-7-5p能通過靶向抑制KLF4對(duì)食管癌細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移能力進(jìn)行調(diào)控。這進(jìn)一步提示miR-7-5p具有腫瘤抑制作用，本研究亦證實(shí)miR-7-5p在膽囊癌組織中呈低表達(dá)，表明患者體內(nèi)的抑癌作用削弱。FGFR4是FGFR家族的重要成員，亦是一種癌蛋白，F(xiàn)GFR4過表達(dá)可致Wnt/β-連環(huán)蛋白（Wnt/β-catenin）、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylin-ositol-3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt）、Janus激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子（Janus kinase/signal transducer and activator of transcription，JAK/STAT）等下游信號(hào)通路處于失調(diào)狀態(tài)，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移能力，這是FGFR4促進(jìn)癌癥進(jìn)展的重要機(jī)制[17]。董慶旭等[18]指出，通過抑制FGFR4表達(dá)，能對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞增殖進(jìn)行抑制，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，亦表明FGFR4的過表達(dá)具有促癌作用。本次發(fā)現(xiàn)miR-7-5p與FGFR4表達(dá)存在相關(guān)性，miR-7-5p能抑制膽囊癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡，而FGFR4可促進(jìn)癌細(xì)胞增殖，抑制癌細(xì)胞凋亡，故二者在膽囊癌患者中呈負(fù)相關(guān)。

本研究提示，miR-7-5p、FGFR4表達(dá)均與膽囊癌臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度相關(guān)，提示二者對(duì)膽囊癌進(jìn)展有調(diào)控作用。miR-7-5p的主要靶基因?yàn)锳KT1、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞單位α基因（phosphatidylinositol 3-kinase catalytic alpha polypeptide gene，PIK3CA）等[19]。FGFR4則可影響PI3K/Akt信號(hào)通路，與miR-7-5p存在相同靶基因，即二者具有相同下游信號(hào)通路。當(dāng)miR-7-5p表達(dá)受到抑制后，F(xiàn)GFR4表達(dá)上調(diào)，膽囊癌細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)，促進(jìn)病情進(jìn)展，miR-7-5p/FGFR4軸可能通過上述機(jī)制，影響膽囊癌患者病情。本次結(jié)果提示，miR-7-5p高表達(dá)及FGFR4低表達(dá)患者的預(yù)后更好，遠(yuǎn)期生存率更高，總生存期延長(zhǎng)，且二者均為膽囊癌預(yù)后影響因素。研究表明miR-7-5p聯(lián)合miR-152-3p能對(duì)Wnt/β-catenin通路進(jìn)行調(diào)控，影響乳腺癌的化療耐藥[20]，這提示miR-7-5p可影響腫瘤化療效果，化療效果則與預(yù)后密切相關(guān)。FGFR4能通過調(diào)控Wnt/β-catenin、PI3K/Akt、JAK/STAT等信號(hào)通路，產(chǎn)生促癌作用，導(dǎo)致病情進(jìn)展，影響預(yù)后。miR-7-5p/FGFR4軸在膽囊癌進(jìn)展中有重要調(diào)控作用，最終影響患者的遠(yuǎn)期生存率。

綜上所述，miR-7-5p/FGFR4軸對(duì)膽囊癌進(jìn)展有調(diào)控作用，與患者的腫瘤分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度和預(yù)后密切相關(guān)，二者均為膽囊癌預(yù)后的獨(dú)立影響因素。但本研究也有不足，如最長(zhǎng)隨訪時(shí)間為36個(gè)月，受研究時(shí)間限制，未能進(jìn)行更遠(yuǎn)期的隨訪，之后還需延長(zhǎng)隨訪時(shí)間予以觀察。

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