劉思琴，江美彥，劉仁浪，張宇柔，侯 凱，馮冬菊，徐東北，鄭全林，吳 衛(wèi)*

（1 四川農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院，四川成都 611130；2 四川全泰堂川白芷產(chǎn)業(yè)有限公司, 四川成都 629000）

中藥白芷為傘形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.ex Hoffm) Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm) Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss) Shan et Yuan 的干燥根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為中品，在我國有著悠久的藥食兩用的歷史[1-2]。白芷藥材中的主要藥效成分是香豆素[3]，包括歐前胡素、異歐前胡素和氧化前胡素等[4]。長期以來一直作為中藥用于治療感冒、發(fā)熱引起的頭痛和傷口引起的疼痛[5]。在食品、保健品、香料和美容等方面也有廣泛的用途[6-7]。白芷適應性很強，喜溫暖濕潤氣候，宜種植在土層深厚、疏松肥沃的砂質壤土地[8]?，F(xiàn)藥用的白芷主要有川白芷、杭白芷、禹白芷和祁白芷等4 大藥材商品[9]。川白芷主產(chǎn)于四川遂寧、安岳等地，其中遂寧白芷種植歷史最久，其產(chǎn)量和品質都最佳，為道地藥材[10-11]。但目前川白芷生產(chǎn)中存在盲目施肥，嚴重影響其產(chǎn)量和品質等問題，采用適宜有效的綠色種植技術迫在眉睫。

我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中化肥過量施用問題較為普遍，肥料利用率不高、資源浪費、環(huán)境污染等問題時有發(fā)生?！笆奈濉逼陂g，我國政府提出化肥減量增效目標為到2025 年末全國農(nóng)用化肥施用量實現(xiàn)穩(wěn)中有降，三大糧食作物化肥利用率達到43%[12]。隨著人口的增加和耕地的減少，作物增產(chǎn)與生態(tài)環(huán)境保護的矛盾將日益尖銳，實現(xiàn)化肥減量增效是農(nóng)業(yè)綠色可持續(xù)發(fā)展的必然要求[13]。研究發(fā)現(xiàn)根際促生菌具有分解土壤內(nèi)部營養(yǎng)物質[14]、分泌生長素[15]、調(diào)節(jié)植物生命周期某些或所有階段植物體內(nèi)促生菌含量[16]、抑制有害菌生長[17]等作用，從而可促進作物生長，提高作物產(chǎn)量[18-21]和品質[22]。但關于根際促生菌應用于白芷的研究報道很少。隨著中藥材市場的擴大與發(fā)展，中藥材產(chǎn)業(yè)優(yōu)質高效發(fā)展越來越關鍵。因此在白芷中應用根際促生菌并將其推廣具有重要意義。本研究前期從白芷根際分離出一株具有固氮、溶磷和解鉀活性的真菌黑曲霉ZJ-17，盆栽試驗發(fā)現(xiàn)其對白芷具有促生作用，因此推測黑曲霉ZJ-17 在田間對白芷生長、產(chǎn)量和品質也具有促進效果，本試驗利用此黑曲霉ZJ-17 制成微生物菌劑，與化肥和有機肥聯(lián)合使用，探究其在田間的實際促生效果，以期為實現(xiàn)白芷高產(chǎn)、優(yōu)質和綠色種植提供科學支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗地概況

試驗點設在四川省遂寧市船山區(qū)唐家鄉(xiāng)余建村白芷生產(chǎn)基地 (30°50′N，105°57′E)。試驗地為平地，年平均氣溫為16.7℃～17.4℃，年平均降雨量是887.3～927.6 mm，前茬為白芷，土壤為灰潮土，土壤理化性質：pH7.8，有機質含量為10.41 g/kg，堿解氮含量為24.34 mg/kg，速效磷含量為12.66 mg/kg，速效鉀含量為78.10 mg/kg。

1.2 田間試驗

田間試驗始于2021 年9 月，為一年期試驗，共設置8 個處理，T0：不施肥；T1：半肥；T2：全肥；T3：半肥+種施黑曲霉ZJ-17；T4：半肥+黑曲霉ZJ-17 灌根；T5：全肥+種施黑曲霉ZJ-17；T6：全肥+黑曲霉ZJ-17 灌根；T7：全肥+種施市售黑曲霉，每個處理重復3 次，共24 個小區(qū)，小區(qū)面積20 m2(5 m×4 m)，隨機區(qū)組排列。

黑曲霉ZJ-17 真菌置于PDA 培養(yǎng)基中，28℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)7 天后，收集黑曲霉孢子，加入無菌水，調(diào)整其濃度為3.0×108CFU/mL，按照30 L/hm2施用量，每個小區(qū)0.06 L，稀釋100 倍，將市面購買黑曲霉孢子粉的濃度調(diào)整一致。播前覆上油枯，施入磷酸鈣和硫酸鉀，開溝播種，按行距40 cm 進行條播，最后將稀釋后的菌液均勻澆在種子表面 (次年3 月為灌根施用)。當白芷株高4～7 cm 時，進行1～2 次間苗，株距10 cm。全肥量為油枯750 kg/hm2、尿素139.5 kg/hm2、過磷酸鈣2193.8 kg/hm2、硫酸鉀240 kg/hm2，半肥量為上述肥料施用量減半。尿素分3 次施用，即苗肥 (12 月)、冬肥 (次年2 月)、春肥 (次年3 月)，施用比例為2:5:3；過磷酸鈣與硫酸鉀分2 次施用 (底肥、春肥)，施用比例為5:5。施用時將3 種化肥混勻撒入土壤中。有機肥作為底肥施用。其余栽培措施與當?shù)卦耘啻胧┍３忠恢隆０总破贩N為四川農(nóng)業(yè)大學吳衛(wèi)教授選育的‘川芷2 號’白芷品種，原植物為杭白芷Angelicadahurica(Fisch.ex Hoffm) Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss) Shan et Yuan。供試菌株為課題組前期從‘川芷2 號’根際土壤分離篩選的黑曲霉 (Aspergillusniger) ZJ-17 菌株，具有較強固氮、溶磷和解鉀活性；另市場購買黑曲霉孢子粉 (有效活菌數(shù)≥100 億/g，沂源康源生物科技有限公司)。

1.3 測定項目及方法

2021 年9 月播種后連續(xù)取樣至次年收獲期，每兩月進行1 次采樣，分別為2021 年11 月及2022 年1 月、3 月、5 月和7 月收獲期。每次每個小區(qū)取5 株有代表性、長勢一致、健康無病蟲害的白芷植物樣品，測定株高、根長和根粗。于收獲期測產(chǎn)[23]。采用高效液相色譜法[24]測定白芷歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素、白當歸素、佛手柑內(nèi)酯、白當歸腦和水合氧化前胡素含量，參照《土壤農(nóng)化分析》測定氮、磷、鉀含量[25]，熒光定量法測定收獲期白芷土壤中黑曲霉ZJ-17 定植率。根據(jù)黑曲霉ZJ-17 基因序列，參考Rinttil?等[26]的方法進行實時熒光定量PCR 反應引物序列設計，熒光定量PCR 反應體系見表1。

表1 實時熒光定量PCR 反應體系Table 1 Real-time fluorescence quantitative PCR

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2016、SPSS 23.0 和GraphPad Prism 8等軟件進行統(tǒng)計分析和作圖。

2 結果與分析

2.1 黑曲霉在白芷根際的定植情況

從圖1 可知，種施菌劑后黑曲霉均能有效定植于土壤，且其定植率與僅施肥料處理差異顯著(P<0.05)，在全肥條件下種施ZJ-17 菌劑 (T5)的定植率最高，與半肥條件下種施黑曲霉ZJ-17 菌劑處理(T3)差異不顯著。種施市售黑曲霉 (T7)也能定植于土壤，定植率顯著高于不施肥(T0)處理 (P<0.05)。種施菌劑處理黑曲霉定植情況顯著優(yōu)于菌劑灌根處理。因此，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑更有助于其在土壤中定植。

圖1 不同處理土壤中黑曲霉基因拷貝數(shù)Fig.1 A.niger gene copies in different treatment soils

2.2 黑曲霉ZJ-17 對白芷株高的影響

從表2 可見，施肥促進了白芷的生長，尤其是收獲前兩個月 (5 月下旬)的效果達到顯著水平 (P<0.05)。全肥條件下，收獲期T5 處理株高較T2 處理顯著提高11.57% (P<0.05)。與市售黑曲霉 (T7)相比，在11 月下旬T5 處理的株高顯著增加，生長后期(2022–01–28 至2022–07–21)二者無顯著性差異。半肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T3)處理白芷的株高在2022 年5 月下旬、7 月下旬與T1 無顯著差異，與菌劑灌根處理 (T4)比，苗期(2021–11–30)株高顯著增加，其他時期無顯著差異。

表2 不同處理各時期白芷株高 (cm)Table 2 Plant height of A.dahurica var.formosana under different treatments in each period

2.3 黑曲霉ZJ-17 對白芷根長的影響

從表3 可知，與不施肥 (T0)比，施肥后白芷的根長總體都增長。全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T5) 與僅全肥 (T2) 處理比較，白芷的根長在2022 年1 月下旬、3 月下旬和收獲期(2022–07–21)均顯著增加 (P<0.05)，收獲期該處理下白芷根長達21.19 cm，較僅全肥處理顯著增加10.85% (P<0.05)。與市售黑曲霉 (T7)比，T5 在在2022 年11 月下旬根長顯著增加24.52% (P<0.05)，生長后期無顯著性差異。半肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T3)白芷與僅半肥 (T1)處理比較，白芷根長在2022 年3 月下旬和收獲期均顯著增加 (P<0.05)。種施黑曲霉ZJ-17 菌劑與灌根處理比，生長后期白芷的根長差異不顯著。

表3 不同處理各時期白芷根長 (cm)Table 3 Root length of A.dahurica var.formosana under different fertilizer treatments in each period

2.4 黑曲霉ZJ-17 對白芷根粗的影響

從表4 可知，與不施肥 (T0)比，施用全肥后白芷的根粗均顯著增加 (P<0.05)。全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T5) 處理與僅全肥 (T2) 處理比較，白芷的根粗在各時期均顯著增加 (P<0.05)，收獲期根粗最大，可達50.23 mm，顯著提高16.70%，比市售黑曲霉處理 (T7)顯著提高10.69% (P<0.05)。半肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T3)處理與僅半肥 (T1)處理比較，白芷的根粗從苗期至2022 年3 旬下旬均顯著增加 (P<0.05)。種施黑曲霉ZJ-17 菌劑處理與菌劑灌根處理比較，在收獲期全肥條件下差異顯著 (P<0.05)。

表4 各時期不同處理白芷的根粗 (mm)Table 4 Root thickness of A.dahurica var.formosana under different fertilizer treatments in each period

2.5 黑曲霉ZJ-17 對白芷產(chǎn)量和經(jīng)濟效益的影響

由表5 可知，與不施肥 (T0)相比，施肥后白芷的產(chǎn)量均提高，全肥 (T2) 處理白芷產(chǎn)量顯著提高19.55% (P<0.05)。全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T5)處理的產(chǎn)量、總產(chǎn)值和經(jīng)濟效益 (注：當年市場價為7.5 元/kg，鮮貨)與僅全肥 (T2)處理比均顯著增加，產(chǎn)量顯著增加16.33%，經(jīng)濟效益顯著增加19.94% (P<0.05)，與不施肥 (T0)處理比產(chǎn)量顯著增加32.69% (P<0.05)，與市售黑曲霉 (T7)處理比產(chǎn)量和經(jīng)濟效益均無顯著性差異。半肥條件下，施加黑曲霉ZJ-17 菌劑處理的產(chǎn)量、總產(chǎn)值和經(jīng)濟效益與僅半肥處理比無顯著差異。產(chǎn)量和總產(chǎn)值由大到小排序為：全肥+種施黑曲霉ZJ-17 (T5)>全肥+種施市售黑曲霉 (T7)>全肥+黑曲霉ZJ-17 灌根 (T6)>全肥(T2)>半肥+種施黑曲霉ZJ-17 (T3)>半肥+黑曲霉ZJ-17 灌根 (T4)>半肥 (T1)>不施肥 (T0)，產(chǎn)量分別為24819、24819、26529、26529、22064、22197、20706、17857 kg/hm2。經(jīng)濟效益排序為：全肥+種施黑曲霉ZJ-17 (T5)>全肥+種施市售黑曲霉 (T7)>全肥+黑曲霉ZJ-17 灌根 (T6)>半肥+種施黑曲霉ZJ-17(T3)>全肥 (T2)>半肥+黑曲霉ZJ-17 灌根 (T4)>半肥 (T1)>不施肥 (T0)。由此可知，全肥條件下，在播期施用黑曲霉ZJ-17 菌劑能顯著提高白芷產(chǎn)量(P<0.05)，總產(chǎn)值達198966 元/hm2，經(jīng)濟效益可達160066 元/ hm2。

表5 各處理白芷產(chǎn)量和經(jīng)濟效益Table 5 Yield and economic benefit of A.dahurica var.formosana under different fertilizer treatments

2.6 黑曲霉ZJ-17 對白芷養(yǎng)分積累的影響

從收獲期各處理白芷地上部養(yǎng)分積累量(圖2a)可以看出，與不施肥 (T0)對照比較，施用全肥(T2) 后白芷地上部氮、磷和鉀積累量均顯著增加(P<0.05)。全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑(T5)后白芷地上部磷積累量顯著增加，與市售黑曲霉處理 (T7)比，白芷地上部磷和鉀積累量顯著增加(P<0.05)。種施黑曲霉菌劑 (T5)白芷地上部磷和鉀積累量與該菌劑灌根處理 (T 6) 比顯著提高(P<0.05)。從收獲期各處理白芷地下部分養(yǎng)分積累量(圖2b)可以看出，與不施肥 (T0)相比，施用全肥(T2)后白芷地下部分氮、磷和鉀積累量分別顯著增加40.38%、32.65%和34.55% (P<0.05)。全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T5) 后，白芷地下部氮、磷和鉀的積累量與僅全肥(T2)處理比分別顯著增加37.73%、21.18%和28.75%，且T5 處理白芷養(yǎng)分積累量顯著高于菌劑灌根處理 (T6) (P<0.05)；與市售黑曲霉處理 (T7)比，白芷地下部氮和鉀積累量顯著增加 (P<0.05)。半肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T3)與僅半肥(T1)處理相比白芷地下部氮和鉀的積累量也顯著增加 (P<0.05)。

圖2 收獲期不同處理白芷養(yǎng)分積累量Fig.2 Nutrient accumulation of A.dahurica var.formosana at harvest stage under different treatments

2.7 黑曲霉ZJ-17 對白芷香豆素類成分含量的影響

通過測定白芷根部7 種香豆素發(fā)現(xiàn)，白芷歐前胡素、佛手柑內(nèi)酯、白當歸素和水合氧化前胡素含量在生育期內(nèi)總體呈先下降后上升的趨勢，但不同種類香豆素變化趨勢不盡一致(圖3a)。歐前胡素含量在2022 年5 月下旬較高，此時無論在半肥還是全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑處理與僅半肥(T1) 和僅全肥(T2) 處理比白芷歐前胡素含量均提高，最高可達4.46 mg/g。收獲時，半肥條件下黑曲霉ZJ-17 種施 (T3)和灌根(T4)處理后的歐前胡素含量較僅半肥(T1)處理分別提高9.82%和13.73%，全肥條件下種施菌劑 (T5)處理與僅全肥 (T2)處理比，在5 月下旬歐前胡素含量明顯升高，7 月下旬差異不明顯。由圖3c 和圖3d 可知，氧化前胡素和白當歸腦含量總體先上升再降低，收獲期，在半肥條件下黑曲霉ZJ-17 菌劑種施和灌根處理與僅半肥處理比氧化前胡素和白當歸腦含量均增加。由圖3b 可知，隨著時間的推移，異歐前胡素含量整體逐漸上升，2022 年3 月下旬至5 月下旬上升速率最快，在收獲期，半肥條件下種施ZJ-17 菌劑 (T3)處理異歐前胡素含量最高，與僅半肥 (T1)處理和僅全肥 (T2)處理比分別增加22.45% 和26.53%，與市售黑曲霉(T7)處理比增加46.94%。由圖3e 和圖3g 可知，半肥條件下，黑曲霉ZJ-17 菌劑灌根 (T4)處理與僅半肥(T1)處理比，在生長后期佛手柑內(nèi)酯和水合氧化前胡素含量迅速增加，在收獲期分別比半肥 (T1)處理增加26.09%和25.00%。

圖3 不同處理白芷各時期香豆素類成分含量Fig.3 Coumarin contents of A.dahurica var.formosana under different treatments in each period

2.8 黑曲霉ZJ-17 對白芷香豆素類成分積累量的影響

由圖4a、c、和e、f、g 發(fā)現(xiàn)，與不施肥 (T0)相比，施肥后白芷歐前胡素、氧化前胡素、佛手柑內(nèi)酯、白當歸素和水合氧化前胡素積累量均顯著增加(P<0.05)。全肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑(T5)與僅全肥 (T2)處理比較，除佛手柑內(nèi)酯積累量無顯著性差異外，其他香豆素類成分積累量均顯著增加，其中歐前胡素和異歐前胡素分別增加34.83%和22.67% (P<0.05)。種施菌劑 (T5)處理與菌劑灌根(T6) 處理相比，各香豆素類成分積累量均顯著增高，與市售黑曲霉 (T7)處理比各香豆素類成分積累量也均顯著增高 (P<0.05)。由圖4a、b、c、d 可知，半肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑 (T3)處理白芷與僅半肥 (T1)處理比白芷歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素和白當歸腦積累量分別顯著增加26.92%、34.65%、30.45%和34.83%，種施菌劑 (T3)白芷歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素和白當歸腦積累量均顯著高于黑曲霉ZJ-17 菌劑灌根 (T4) 處理(P<0.05)，佛手柑內(nèi)酯和白當歸素含量二者無顯著差異。由此，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑能顯著提高白芷歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素和白當歸腦積累量，且效果顯著優(yōu)于黑曲霉ZJ-17 菌劑灌根處理和市面售賣黑曲霉處理 (P<0.05)。

圖4 不同處理收獲期白芷香豆素類成分積累量Fig.4 Accumulation of coumarins in A.dahurica var.formosana at harvest stage

3 討論

3.1 白芷的生長指標和產(chǎn)量

研究表明植物根際促生真菌具有促進植物生長、提高植物抗逆性，增加作物產(chǎn)量和提高質量的作用[27]。在目前化肥農(nóng)藥大量施用破壞生態(tài)環(huán)境的背景下，促生菌作為生物制劑，在農(nóng)業(yè)、林業(yè)和環(huán)境修復等方面具有良好應用前景[28]。

課題組前期通過篩選白芷根際促生菌發(fā)現(xiàn)，所篩促生綜合潛力最強的真菌為黑曲霉ZJ-17，其具有較強的固氮、溶磷、溶鉀活性，與不施菌對照處理相比，接種菌株ZJ-17 后，遂寧土壤白芷的株高、根粗、地上鮮重和根鮮重均顯著增長，崇州土壤白芷的株高和根鮮重均顯著增加[29]。本試驗結果進一步證實，在大田生產(chǎn)條件下，黑曲霉ZJ-17 與有機肥和化肥聯(lián)合使用確實可明顯促進白芷生長，其植株株高、根長和根粗均明顯高于不施肥處理以及全肥處理，白芷單位面積產(chǎn)量也明顯增加。在全肥條件下，播種期施用菌劑處理的產(chǎn)量明顯高于未施用菌劑處理，增產(chǎn)率16.33%，產(chǎn)量最大值為26529 kg/hm2，與市面售賣黑曲霉處理間差異不顯著；半肥條件下施用黑曲霉ZJ-17 菌劑能保證其不減產(chǎn)，且與僅全肥處理差異不明顯，說明黑曲霉ZJ-17 菌劑確實能替代部分化肥用量。究其原因，可能是施入土壤中的根際促生菌株能改善植物根際營養(yǎng)環(huán)境，增加了對作物營養(yǎng)的供應，對植物生長和發(fā)育起到促進作用[30]。王丹等[31]發(fā)現(xiàn)巨大芽孢桿菌在正常氮磷供應條件下改善了油菜生長，促進了油菜對P、K、Zn 和B 等營養(yǎng)元素的吸收。申佳麗等[32]將膠質芽孢桿菌菌液對小黃瓜進行灌根，結果發(fā)現(xiàn)小黃瓜根中鉀、磷，莖中鉀、氮，小黃瓜葉中磷、鉀受到顯著影響。本試驗的進一步測定分析也發(fā)現(xiàn)，全肥條件下，播期施加黑曲霉ZJ-17 菌劑后白芷地下部分全氮、全磷和全鉀的積累量均顯著增加。半肥條件下，播期施加黑曲霉ZJ-17 菌劑白芷地下部分全氮和全鉀的積累量也顯著增加。據(jù)此認為，施加黑曲霉ZJ-17 能增強白芷獲得養(yǎng)分的能力，進而促進其生長和產(chǎn)量提升。

3.2 白芷的品質

本研究中供試黑曲霉ZJ-17 對白芷品質也有明顯促進作用。至于全肥條件下施加黑曲霉ZJ-17 菌劑處理白芷的生長性狀及產(chǎn)量高于半肥條件下施加菌劑者，但半肥條件下施加菌劑處理白芷的香豆素含量明顯升高的原因，推測與全肥條件下施加黑曲霉ZJ-17 菌劑處理的白芷根生長較快，根比較粗大，韌皮部在根中所占比例較小，其分泌組織分布較少，香豆素含量相對較低有關。曾有學者研究發(fā)現(xiàn)白芷香豆素相對含量與直徑間呈非正相關關系[33]。馬逾英等[34]測定了兩個產(chǎn)地不同商品等級 (注：主要根據(jù)根大小劃分等級)川白芷樣品，也發(fā)現(xiàn)三等品總香豆素含量均高于一、二等品。雷雨恬等[35]研究也表明白芷6 種香豆素成分含量的總和以三等品最高，一等品最低。本試驗還發(fā)現(xiàn)，全肥條件下施用黑曲霉ZJ-17，盡管白芷香豆素含量未提升，但其香豆素成分積累量均明顯增加，這與江美彥等[29]的研究結果一致，進一步表明黑曲霉ZJ-17 對白芷品質確實具有明顯影響，但如何將黑曲霉ZJ-17 與化肥和有機肥合理配施，在提高產(chǎn)量的同時也增加主要有效成分含量值得進一步探討。本試驗中，施用黑曲霉ZJ-17 條件下白芷香豆素累積量顯著高于市售黑曲霉處理，充分說明從白芷根際分離的促生菌黑曲霉ZJ-17 更適合用于白芷專用微生物肥料的開發(fā)利用。

3.3 黑曲霉ZJ-17 施用時間分析

本試驗還探討了黑曲霉ZJ-17 菌劑的最佳施用時間。研究表明，微生物肥料不是速效肥，所以，要在作物的營養(yǎng)臨界期和大量吸收期前7～10 天施用效果最佳。同時對不同作物或同一作物的不同時期，要選用不同的施用方法。最適施用時間是清晨和傍晚或無雨陰天，避免陽光中紫外線將肥料中的微生物殺死[36]。種肥15 kg 配施不同量微生物菌劑，玉米根莖性狀及產(chǎn)量均明顯優(yōu)于微生物肥料和高于常規(guī)施肥[37]。本研究中，半肥條件下，播期施用該菌劑使苗期白芷株高和根粗明顯增加；全肥條件下播期施用該菌劑使大部分生長階段白芷的株高、根長和根粗均明顯增加。至于次年3 月施用黑曲霉ZJ-17菌劑對白芷生長無明顯促進作用，可能與菌劑施入時間短，菌的定植率相對低有關。綜合考慮，建議實際生產(chǎn)中于播期施入該菌劑。

4 結論

常規(guī)有機肥和化肥用量下，播期種子表面澆施黑曲霉ZJ-17 菌劑能顯著促進白芷生長、養(yǎng)分吸收和香豆素類成分積累量，促進白芷生長，提高白芷產(chǎn)量和品質，提高了經(jīng)濟效益。本實驗室鑒定的黑曲霉ZJ-17 菌株制備的菌劑效果顯著好于市售菌劑，但采用生育中期 (3 月)灌根的方法施用該菌劑的效果不明顯。在半肥條件下，種施黑曲霉ZJ-17 菌劑可顯著提高白芷根中的歐前胡素和異歐前胡素含量，但產(chǎn)量和經(jīng)濟效益不及全肥條件下種施黑曲霉ZJ-17 菌劑處理。需進一步研究實際生產(chǎn)中，保障產(chǎn)量且增加主要有效成分含量的肥料用量。