黃劼 袁雯 陶瑩

流行性感冒簡稱流感，是臨床上兒科、急診常見的一種疾病，是流感病毒引起的一種急性呼吸道疾病，屬于丙類傳染病[1]。流感一般表現(xiàn)為急性起病，潛伏期通常為1 ～7 d，多為2 ～4 d，臨床癥狀以高熱、乏力、頭痛、全身酸痛等全身中毒癥狀較重，而呼吸道癥狀（鼻塞、流鼻涕、咽喉痛、干咳等）較輕為主要特征[2-3]。流感嚴重者甚至出現(xiàn)呼吸衰竭、膿毒癥休克、急性壞死性腦病、心力衰竭等情況，對患者心、肝、腎等多臟器功能造成嚴重的損傷，影響身體健康以及生命安全[4]。目前常見的流感主要有兩種類型，即甲型流感和乙型流感，而人們感染的主要是甲型流感病毒中的甲1 亞型流感病毒（influenza virus of H1N1 sub type，H1N1）、甲3 亞型流感病毒（influenza virus of H3N2 sub type，H3N2）亞型以及乙型流感病毒中的維多利亞流感病毒（Victoria）和乙型山形流感病毒（Yamagata）系。所有5 歲以下的兒童都被公認為是重癥流感的高危人群，但是2 歲以下的兒童患流感的風(fēng)險最高，6 個月以下的嬰兒因流感住院率和病死率最高[5]。孕婦、嬰幼兒、老年人和慢性基礎(chǔ)疾病等高危人群，患流感后出現(xiàn)嚴重疾病和病死的風(fēng)險均較高。兒童感染流感后易出現(xiàn)高熱、腹瀉、嘔吐、呼吸暫停等，對患兒的生長發(fā)育、免疫功能、生命安全造成嚴重的威脅。因此，明確兒童流感感染病毒的過程以及患兒機體免疫系統(tǒng)響應(yīng)的過程，對于臨床治療兒童流感，降低并發(fā)癥的發(fā)生，保障良好預(yù)后具有非常重要的價值和意義?；诖耍狙芯恐荚谔接懥魇郊毎g(shù)檢測兒童流感成熟T 淋巴細胞（mature T lymphocytes，CD3+）、誘導(dǎo)性T 細胞/輔助性T 細胞（helper T cells，CD4+）、抑制性T 細胞/細胞毒性T 細胞（cytotoxic T cells，CD8+）、T 淋巴細胞亞群和自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）表達水平的變化，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2022 年4 月—2023 年4 月于湘潭市第一人民醫(yī)院兒科就診的20 例流感患兒作為此次研究的觀察組，再選取同時期于湘潭市第一人民醫(yī)院進行體檢的20 名健康兒童作為對照組。其中對照組男童10 名，女童10 名；年齡4 ～12 歲，平均（8.65±2.47）歲；身體質(zhì)量指數(shù)20 ～25 kg/m2，平均（22.86±1.37）kg/m2。觀察組男童11 例，女童9 例；年齡4 ～12 歲，平均（8.70±2.42）歲；身體質(zhì)量指數(shù)20 ～25 kg/m2，平均（22.84±1.35）kg/m2；病程3 ～7 d，平均（5.45±1.12）d；流感類型：甲型流感12 例，乙型流感8 例。兩組兒童性別、年齡、身體質(zhì)量指數(shù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。

納入標準：（1）觀察組兒童經(jīng)臨床診斷均符合《兒童流感診斷與治療專家共識（2020 年版）》[6]中對兒童流感的診斷標準。（2）年齡4 ～12 歲。（3）所有兒童及監(jiān)護人均知此次研究內(nèi)容并簽訂知情同意書。（4）入院就診前均未服用過任何藥物。（5）個人資料齊全。排除標準：（1）普通感冒、其他上呼吸道感染、其他下呼吸道感染患兒。（2）精神煩躁、哭鬧不止不配合研究者。（3）未獲得兒童監(jiān)護人知情同意。（4）免疫系統(tǒng)先天性異?；蛘系K者。（5）合并心、肝、腎等臟器惡性腫瘤或血液系統(tǒng)疾病者。

1.2 方法

研究開始前1 d 告知兩組兒童及其監(jiān)護人次日凌晨須空腹，檢查開始前禁止進食和飲水。醫(yī)護人員采集兩組兒童清晨空腹外周血2 mL，置于乙二胺四乙酸二鉀真空采血管中備用，隨后使用BriCyte E6 流式細胞儀（邁瑞）分別檢測兩組兒童的CD3+、CD4+、CD8+、T 淋巴細胞亞群和NK 細胞表達水平，所有實驗室檢驗操作均嚴格按照實驗室、試劑盒、儀器要求進行操作，記錄檢測結(jié)果。其中兒童體內(nèi)CD3+正常水平為61%～85%、CD4+正常水平為28%～58%、CD8+正常水平為19%～48%、T 淋巴細胞亞群正常表達水平為20%～40%，NK 細胞正常表達水平為7%～25%。

1.3 觀察指標

比較兩組兒童淋巴細胞亞群和NK 細胞表達水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以（±s）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

與對照組兒童相比，觀察組患兒的CD3+、CD4+、NK細胞、T 淋巴細胞亞群表達水平均明顯偏低（P＜0.05）；與對照組兒童相比，觀察組患兒的CD8+表達水平均明顯偏高（P＜0.05）。見表1。

表1 觀察組與對照組兒童淋巴細胞亞群和NK 細胞表達水平比較（%，±s）

表1 觀察組與對照組兒童淋巴細胞亞群和NK 細胞表達水平比較（%，±s）

組別 CD3+ CD4+ CD8+ NK 細胞 T 淋巴細胞對照組（n ＝20） 72.42±7.04 45.69±10.23 25.33±9.75 56.45±7.11 66.88±9.11觀察組（n ＝20） 61.44±7.43 36.76±10.48 34.54±8.54 42.21±6.23 60.03±10.23 t 值 4.797 2.727 3.178 6.737 2.236 P 值 ＜0.001 0.010 0.003 ＜0.001 0.031

3 討論

流感病毒容易發(fā)生變異，主要通過飛沫以及接觸傳染，傳染性較強，人群普遍易感，發(fā)病率較高，歷史上在全世界引起多次暴發(fā)性流行，是全球關(guān)注的重要公共衛(wèi)生問題[7-8]。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計，每年季節(jié)性流感在全球可導(dǎo)致300 萬～500 萬重癥病例，29 萬～65 萬病死。流感在中國以冬春季節(jié)多見，人們感染流感后臨床表現(xiàn)以全身中毒癥狀為主，其次是呼吸道癥狀，而兒童發(fā)熱程度通常高于成年人，患乙型流感時惡心、嘔吐、腹瀉等消化道癥狀較成年人多見[9-10]。目前，臨床上普遍認為流感的發(fā)病機制復(fù)雜多樣，認為主要是流感病毒進入人體呼吸道后，與呼吸道表面纖毛柱狀上皮細胞的特殊受體結(jié)合而進入細胞中，然后在細胞內(nèi)完成自我復(fù)制，新的病毒顆粒不斷被釋放并播散再感染更多其他的細胞，進而引起機體出現(xiàn)發(fā)熱、頭痛、肌痛等全身癥狀，甚至引起病毒性肺炎、腦病等[11-12]。此外，有諸多學(xué)者認為流感的發(fā)病還與環(huán)境因素（氣候變量、經(jīng)緯度等）、個體因素（基礎(chǔ)慢性疾病、吸煙、勞累、壓力大等）、易發(fā)生重癥的高危人群（年齡＜5 歲或≥65 歲，肥胖、妊娠、圍生期婦女等）等因素密切聯(lián)系[13-14]。

兒童是流感暴發(fā)的高危人群，臨床醫(yī)護工作者以及監(jiān)護人應(yīng)該引起高度重視。兒童感染流感病毒后，病毒通過血凝素與呼吸道上皮細胞含有唾液酸受體的細胞表面進行結(jié)合，進而感染[15-16]。流感病毒侵襲機體后可以誘發(fā)細胞因子風(fēng)暴，導(dǎo)致全身出現(xiàn)明顯的炎癥反應(yīng)，出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征以及多臟器功能衰竭，對兒童身心的生長發(fā)育造成嚴重的影響[17-18]。目前，臨床上普遍認為兒童感染流感病毒的發(fā)病機制主要是病原體直接侵害機體導(dǎo)致的，其次還認為其與兒童機體免疫功能紊亂有密切的關(guān)系[19]。目前，有部分研究指出，機體感染流感后淋巴細胞亞群和NK細胞水平會出現(xiàn)明顯的變化，致使免疫功能出現(xiàn)紊亂，影響身體健康，危及生命安全[20]。

T 淋巴細胞簡稱T 細胞，是由來源于骨髓的淋巴干細胞，在胸腺中的胸腺素的誘導(dǎo)下，經(jīng)過一系列有序的分化過程，逐漸在胸腺發(fā)育成熟為能夠識別何種抗原的T 細胞庫，通過淋巴以及血液循環(huán)而分布到全身的免疫器官和組織中發(fā)揮免疫功能[21]。T 細胞是相當復(fù)雜的不均一體，又在體內(nèi)不斷地更新，在同一時間可以存在不同發(fā)育階段或功能的亞群，但是其分類原則和命名尚未統(tǒng)一[22]。臨床上根據(jù)免疫應(yīng)答中的功能不同，將T 細胞分成若干亞群：CD4+、CD8+等。CD3+是指成熟的T 淋巴細胞，能夠與T 細胞抗原受體（T cell antigen receptor，TCR）結(jié)合形成TCR-CD3+復(fù)合體分子，然后將抗原信號傳遞到細胞內(nèi)。CD4+、CD8+能夠分別于主要組織相容性抗原-Ⅱ（Major histocompatibility antigen-Ⅱ，MHC-Ⅱ）、主要組織相容性抗原-Ⅰ（Major histocompatibility antigen-Ⅰ，MHC-Ⅰ）分子結(jié)合，穩(wěn)定TCR 與抗原肽-MHC 分子復(fù)合物的結(jié)合，促進體內(nèi)激活信號的傳遞[23]。NK 細胞不同于T、B 細胞，它是一類不需要預(yù)先致敏就可以非特異性的殺傷腫瘤細胞和病毒感染細胞的淋巴細胞[24]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組兒童相比，觀察組患兒的CD3+、CD4+、NK 細胞、T 淋巴細胞亞群表達水平均明顯偏低（P＜0.05）；與對照組兒童相比，觀察組患兒的CD8+表達水平均明顯偏高（P＜0.05）。說明經(jīng)流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)流感兒童均存在明顯的體液以及細胞免疫功能紊亂。分析其原因可能與流感患兒感染流感病毒后，體內(nèi)輔助性T 細胞受到侵襲和損傷，導(dǎo)致CD4+細胞、CD3+細胞分化過程受阻，無法正常分化，且損傷加重，致使T細胞的活性受到明顯的抑制，增加CD8+的數(shù)量，最終導(dǎo)致免疫功能出現(xiàn)紊亂。此外，流感病毒侵襲機體免疫器官后，導(dǎo)致機體無法正常釋放T 淋巴細胞，進而導(dǎo)致總的T 淋巴細胞數(shù)量明顯降低，免疫功能損傷并受到抑制，機體出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，又進一步影響免疫功能，加重流感病毒對機體的侵襲和損傷，形成惡性循環(huán)。當機體受到流感病毒的侵襲后，機體內(nèi)免疫應(yīng)答會發(fā)生相應(yīng)反應(yīng)，即NK 細胞被激活，然后與Fc 段進行結(jié)合，發(fā)揮非特異性的殺傷作用，直接殺死或破壞被流感病毒侵襲或感染的靶細胞。文章中體現(xiàn)了《兒童流感診斷與治療專家共識（2020 年版）》[6]的臨床參考。

綜上所述，流感兒童均存在明顯的體液以及細胞免疫功能紊亂，主要表現(xiàn)為CD3+、CD4+、NK 細胞、T 淋巴細胞亞群表達水平下降，CD8+表達水平上升，可為流感患兒的臨床治療、減少并發(fā)癥及預(yù)后評估提供理論依據(jù)。