陳沛然 ，趙立文，黃鳳杰

（1. 中國藥科大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 南京 211198；2. 南京圣和藥業(yè)股份有限公司，江蘇 南京210049）

1 B7-H3簡介

B7-H3（又稱CD276）是B7超家族中的一員，是一種Ⅰ型跨膜糖蛋白，是近年來新發(fā)現(xiàn)的免疫檢查點(diǎn)。B7-H3具有B7-H3家族的結(jié)構(gòu)特征和典型的免疫球蛋白樣分子結(jié)構(gòu)。與其他B7-H3家族成員一樣，人源B7-H3擁有4個(gè)保守的結(jié)構(gòu)半胱氨酸，一個(gè)由IgC樣和IgV樣結(jié)構(gòu)域組成的胞外域及許多不同的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域（見圖1）。

圖1 B7-H3的結(jié)構(gòu)示意圖Figure 1 Graphical structure of B7-H3

B7-H3的異常表達(dá)與癌癥的發(fā)生與進(jìn)展密切相關(guān)，研究人員通過對臨床樣本使用基于單克隆抗體8H9的免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，人體正常組織中B7-H3僅在腹部、肝臟、胰腺、腎皮質(zhì)、唾液腺腺泡細(xì)胞、胃上皮細(xì)胞具有非特異性細(xì)胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)[1-2]。然而對于臨床樣本的研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3在非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、原發(fā)性肝癌、結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）、乳腺癌、前列腺癌、咽喉癌、黑色素瘤等多種腫瘤組織中有異常大量表達(dá)，且在腫瘤微環(huán)境（tumor microenvironment，TME）中的基質(zhì)細(xì)胞、纖維原細(xì)胞、上皮細(xì)胞等表面也有表達(dá)，其在腫瘤組織中的過量表達(dá)往往伴隨患者不良預(yù)后與較短的總生存期和無進(jìn)展生存期[3-15]。B7-H3在單核細(xì)胞和粒細(xì)胞及人體正常組織中均無表達(dá)，而在一些樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、自然殺傷（natural killing，NK）細(xì)胞和B細(xì)胞上有表達(dá)，這使得B7-H3成為具有潛在臨床治療價(jià)值的免疫檢查點(diǎn)。B7-H3不僅可通過抑制免疫系統(tǒng)促成腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，還可通過一些非免疫途徑介導(dǎo)腫瘤的轉(zhuǎn)移、耐藥、血管生成從而促進(jìn)癌癥進(jìn)展。鼠源B7-H3主要是一種2Ig-B7-H3二聚體的構(gòu)型[16]，人類B7-H3包含2種異構(gòu)體即4Ig-B7-H3和2Ig-B7-H3，其中4Ig-B7-H3是B7-H3的主要表達(dá)形式，其在多種腫瘤細(xì)胞上異常表達(dá)，但其功能與2Ig-B7-H3并無區(qū)別[17-18]。目前B7-H3的配體尚未發(fā)現(xiàn)，其作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究。本文綜合目前的研究進(jìn)展，針對B7-H3的免疫調(diào)節(jié)作用、促腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移作用、促血管生成作用、促腫瘤細(xì)胞耐藥作用及其他作用這幾方面的機(jī)制分別進(jìn)行介紹（見圖2）。

圖2 B7-H3作用通路示意圖Figure 2 B7-H3 signaling pathway

2 B7-H3在癌癥中的免疫調(diào)節(jié)作用

B7-H3在癌癥中的免疫調(diào)節(jié)作用最早被發(fā)現(xiàn)，盡管早期研究指出B7-H3對免疫系統(tǒng)具有激活作用，但隨后大量實(shí)驗(yàn)證明B7-H3是免疫抑制受體。早在2001年有研究者將從健康捐獻(xiàn)者體內(nèi)提取的T細(xì)胞與轉(zhuǎn)染B7-H3質(zhì)粒并可表達(dá)B7-H3的624mel黑色素瘤細(xì)胞共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，B7-H3可促進(jìn)CD8+T和CD4+T細(xì)胞增殖，增強(qiáng)細(xì)胞毒作用和對624mel細(xì)胞的殺傷效果，并上調(diào)CD8+T和CD4+T細(xì)胞的干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）分泌[19]。有研究人員用體內(nèi)模型對B7-H3的免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了驗(yàn)證，將重組表達(dá)B7-H3的P815細(xì)胞移植到小鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)相對于不表達(dá)B7-H3的P815細(xì)胞，B7-H3表達(dá)可顯著抑制腫瘤生長，研究發(fā)現(xiàn)其通過刺激抗原特異性CD8+T細(xì)胞增殖從而增強(qiáng)其細(xì)胞毒作用[20]。但隨后越來越多的研究得出相反結(jié)論，在小鼠T細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，外源B7-H3-Ig可通過抑制轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白-1（activator protein-1，AP-1）和減少細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）產(chǎn)生抑制CD4+T細(xì)胞激活與增殖的作用，抗鼠源B7-H3的單克隆抗體可激活T細(xì)胞[21]。2009年的一項(xiàng)研究也得出相似的結(jié)論：體外模型中B7-H3可抑制CD8+T和CD4+T細(xì)胞增殖和活性，減少IFN-γ分泌[22]。B7-H3敲除小鼠表現(xiàn)出增強(qiáng)的CD8+T細(xì)胞與NK細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒作用，B7-H3沉默可增加小鼠的CD8+T細(xì)胞的IFN-γ分泌和顆粒酶B的表達(dá)，并上調(diào)NK細(xì)胞顆粒酶B的表達(dá)，提高NK細(xì)胞的細(xì)胞殺傷功能[23]。一項(xiàng)對癌癥基因組圖譜（the cancer genome atlas，TCGA）和中國膠質(zhì)瘤基因組圖譜（Chinese glioma genome atlas，CGGA）的神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織基因組數(shù)據(jù)的大規(guī)模分析發(fā)現(xiàn)，B7-H3可改變固有免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、T細(xì)胞共刺激、T細(xì)胞激活等相關(guān)基因的表達(dá)，特別是調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫反應(yīng)相關(guān)基因，從而介導(dǎo)免疫抑制的發(fā)生[24]。B7-H3也有調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞募集的作用，在對一些非小細(xì)胞肺癌患者的組織研究中發(fā)現(xiàn)，B7-H3在腫瘤微環(huán)境中的表達(dá)往往伴隨著更多的CD45+免疫細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD3+T細(xì)胞、NK細(xì)胞、漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞的聚集，以及更高的程序性死亡配體-1（programmed death ligand-1，PD-L1）表達(dá)[6]。

由于目前對B7-H3的配體還知之甚少，尚無法對B7-H3的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制做出詳盡的解釋，在某些研究中證實(shí)B7-H3具有免疫激活作用，在另一些研究中發(fā)現(xiàn)B7-H3具有免疫抑制作用，這可能與實(shí)驗(yàn)中所用的細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)動物基因型以及實(shí)驗(yàn)方法的不同有關(guān)，但目前普遍認(rèn)為B7-H3是可以促使癌細(xì)胞免疫逃逸的免疫抑制分子[13,25-27]。

3 B7-H3的促癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移作用

細(xì)胞從原位點(diǎn)的擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移是癌癥惡化的重要標(biāo)志，癌癥的擴(kuò)散往往伴隨不良預(yù)后和高死亡率。在臨床上，B7-H3在多種腫瘤組織中的過表達(dá)與癌癥擴(kuò)散有關(guān)，常伴隨不良預(yù)后。

上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化賦予細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的能力，是癌細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要特征。在肺腺癌細(xì)胞A549中使用小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）沉默B7-H3的表達(dá)，可以下調(diào)如基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）、波形蛋白、Snail、N-鈣黏蛋白等上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志蛋白的表達(dá)，削弱肺腺癌細(xì)胞A549的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[28]。對肝癌的臨床研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3的高表達(dá)與癌癥轉(zhuǎn)移的發(fā)生和不良預(yù)后顯著相關(guān)，對臨床樣本研究發(fā)現(xiàn)其通過Janus激酶2（Janus kinase 2，JAK2）/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）/Snail通路調(diào)節(jié)N-鈣黏蛋白、E-鈣黏蛋白、波形蛋白的表達(dá)使肝癌細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化從而促使其轉(zhuǎn)移[29]。在黑色素瘤中，B7-H3也被發(fā)現(xiàn)可以通過JAK2/STAT3/Snail通路上調(diào)MMP-2、MMP-9等促癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移蛋白表達(dá)，并且下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）、TIMP-1等抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的蛋白表達(dá)[30]。有研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3對JAK2/STAT3/Snail通路的激活作用部分是通過誘導(dǎo)其上游的癌癥相關(guān)蛋白激酶Src激活，并下調(diào)其對應(yīng)負(fù)調(diào)節(jié)物細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制蛋白3（suppressor of cytokine signaling-3，SOCS-3）/含SH2結(jié)構(gòu)蛋白酪氨酸激酶-1（SH2-containing protein tyrosine phosphatese，SHP-1）的表達(dá)[31]。在體外實(shí)驗(yàn)中，使用JAK2/STAT3通路抑制劑FLLL32可以有效阻斷B7-H3的促癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移作用。JAK2抑制劑AG490也可以有效減少B7-H3在結(jié)直腸癌細(xì)胞中的促遷移和侵襲作用[32]。綜上，B7-H3主要通過JAK2/STAT3通路促進(jìn)癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的發(fā)生，從而促使癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。IL-8是促癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的細(xì)胞因子[33]，在黑色素瘤細(xì)胞系MDA-MB-435和FEMX-I移植的小鼠模型中IL-8大量表達(dá)，敲除B7-H3可以顯著減少IL-8的表達(dá)，并減少癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移[30]。另有研究指出，B7-H3可使胰腺癌細(xì)胞Toll樣受體4（Toll like receptor 4，TLR4）/核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）通路激活，上調(diào)其下游血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和IL-8的表達(dá)，提高胰腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲能力[34]。循環(huán)上皮癌細(xì)胞（circulating epithelial tumor cells，CETCs）在外周循環(huán)中的出現(xiàn)是癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的先決條件，Ki-67是癌細(xì)胞增生的生物標(biāo)志物，在針對乳腺癌臨床樣本的檢測中發(fā)現(xiàn)，超過80%的CETCs中B7-H3的表達(dá)異常，并且其表達(dá)與Ki-67在CETCs中的表達(dá)顯著相關(guān)[35]。

4 B7-H3在腫瘤組織中的促血管生成作用

腫瘤組織周圍異常的血管生成也是癌癥進(jìn)展的一個(gè)重要標(biāo)志，癌細(xì)胞可以通過改變自身周圍的血管結(jié)構(gòu)來為其輸送生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和輸出代謝廢物，構(gòu)建適宜癌細(xì)胞增生的微環(huán)境。

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞是血管內(nèi)皮實(shí)驗(yàn)常用細(xì)胞，在血管生成中起重要作用，有研究者通過慢病毒轉(zhuǎn)染B7-H3基因至人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，相比于對照組，其在體外模型和體內(nèi)模型中均有更強(qiáng)的血管生成能力，該血管生成能力的提高是通過細(xì)胞內(nèi)VEGF上調(diào)實(shí)現(xiàn)的[36]。

在CRC患者的組織中發(fā)現(xiàn)，B7-H3表達(dá)量與腫瘤組織的微血管密度呈正相關(guān)，研究者提取了過表達(dá)B7-H3的CRC細(xì)胞培養(yǎng)基，將其用于培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，在B7-H3 CRC培養(yǎng)基的刺激下，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的血管生成、遷徙和侵襲能力。B7-H3可提高CRC細(xì)胞的血管內(nèi)皮生長因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGF-A）表達(dá)量和促血管生成能力，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明該作用部分是通過激活NF-κB通路實(shí)現(xiàn)的[37]。Tie-2是一種可與促血管新生蛋白因子結(jié)合的酪氨酸激酶受體，可以不依賴VEGF調(diào)節(jié)腫瘤微血管。B7-H3在透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌患者的腫瘤血管上皮組織中大量表達(dá)，檢測發(fā)現(xiàn)B7-H3與Tie-2表達(dá)量呈正相關(guān)，且兩者的表達(dá)位點(diǎn)有一定重疊，B7-H3與Tie-2表達(dá)量均與腫瘤組織中的微血管密度呈正相關(guān)，這說明B7-H3的促血管生成作用可能部分是通過Tie-2通路實(shí)現(xiàn)的[38]。在三陰乳腺癌中，B7-H3在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor associated macrophage，TAM）上的大量表達(dá)與不良預(yù)后相關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)高表達(dá)B7-H3的TAM具有促血管生成功能，在注射了B7-H3highTAM的4T1小鼠乳腺癌模型中，比對照組檢測出更多的血管生成和VEGF-A等血管生成相關(guān)蛋白表達(dá)，而且B7-H3highTAM組的血管結(jié)構(gòu)更混亂、形狀更扭曲，形態(tài)更像是腫瘤組織周圍異常生成的血管[39]。

5 B7-H3的促癌細(xì)胞耐藥的作用

現(xiàn)如今，化療仍然是治療癌癥的主要手段，一些化療藥物可誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，然而通過一段時(shí)間的治療，一些癌細(xì)胞會演化出對化療藥物的耐藥性。耐藥性是影響化療療效的一個(gè)主要障礙。

誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡是許多化療藥物的作用機(jī)制，在CRC細(xì)胞中，B7-H3的表達(dá)量與其中抗凋亡蛋白B細(xì)胞淋巴瘤-2（B cell lymphoma-2，Bcl-2）、B細(xì)胞淋巴瘤-xl（B cell lymphoma-xl，Bcl-xl）表達(dá)呈正相關(guān)，且與促凋亡蛋白BCL2相關(guān)蛋白X（BCL2-associated X protein，Bax）表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)，在高表達(dá)B7-H3的CRC細(xì)胞系SW620-B7-H3-EGFP中，與對照組相比，SW620-B7-H3-EGFP對5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑均表現(xiàn)出更好的耐藥性和更強(qiáng)的抗凋亡能力，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其抗凋亡作用部分是通過激活JAK2/STAT3通路實(shí)現(xiàn)的[40]。紫杉醇是一種常用的化療藥物，在乳腺癌細(xì)胞中，B7-H3的表達(dá)也可通過JAK2/STAT3加強(qiáng)癌細(xì)胞對紫杉醇的抗性；敲除B7-H3的乳腺癌細(xì)胞對紫杉醇敏感性顯著增強(qiáng)，其中髓樣細(xì)胞白血病-1（myeloid cell leukemia，Mcl-1）、生存素等STAT3通路下游的抗凋亡蛋白表達(dá)量顯著下降[41]。吉西他濱是一種嘧啶類抗腫瘤代謝藥，B7-H3可通過上調(diào)生存素的表達(dá)從而提高癌細(xì)胞對吉西他濱的抗性[42]。含BRCA1/BRCA2復(fù)合體亞基3（BRCA1/BRCA2 containing complex subunit 3，BRCC3）參與細(xì)胞中DNA修復(fù)過程[43]，5-氟尿嘧啶的細(xì)胞毒性會因DNA修復(fù)的激活而減少，有研究發(fā)現(xiàn)B7-H3介導(dǎo)的對5-氟尿嘧啶耐藥性伴隨著BRCC3上調(diào)而增強(qiáng)，使用siRNA敲除BRCC3可以逆轉(zhuǎn)B7-H3介導(dǎo)的對5-氟尿嘧啶抗藥性[44]。B7-H3還可以通過激活磷脂酰肌醇三羥基激酶（phosphoinositide-3 kinase，PI3K）/AKT通路增強(qiáng)癌細(xì)胞對順鉑和紫杉醇的耐藥性，當(dāng)加入PI3K或AKT抑制劑時(shí)癌細(xì)胞的耐藥性顯著下降[45]。絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）通路調(diào)節(jié)增殖、應(yīng)激、凋亡等多種細(xì)胞過程，在癌細(xì)胞耐藥中也發(fā)揮作用。MAPK的去磷酸化失活受到上游一組名為MAP激酶磷酸化酶（MAP kinase phosphatases，MPK）的雙特異性磷酸酶的調(diào)控。最近一項(xiàng)研究通過DNA微陣列技術(shù)辨別出一種名為雙特異性磷酸酶10（dual specificity phosphatase，DUSP10）的MPK，其參與了B7-H3介導(dǎo)的癌細(xì)胞對達(dá)卡巴嗪和順鉑的獲得耐藥性，B7-H3可通過下調(diào)DUSP10的表達(dá)來提高M(jìn)APK通路的活性，增強(qiáng)癌細(xì)胞抗凋亡能力，從而提高癌細(xì)胞對達(dá)卡巴嗪和順鉑的耐藥性[46]。傳統(tǒng)化療方式往往只能殺死普通癌細(xì)胞，但無法有效殺死腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cells，CSCs），普通腫瘤細(xì)胞可以轉(zhuǎn)變?yōu)镃SCs，從而獲得藥物抗性。絲裂原活化蛋白激酶激酶（mitogen-activated protein kinase kinase，MAPKK，又稱MEK）是促使癌細(xì)胞干性轉(zhuǎn)化的重要因子，B7-H3高表達(dá)可磷酸化激活主要穹隆蛋白（major vault protein，MVP），MVP通過增強(qiáng)鼠類肉瘤病毒癌基因同源物B1（V-raf murinesar-coma viral oncogene homolog B1，B-RAF）和MEK之間的互相作用，從而激活MEK促使更多普通癌細(xì)胞發(fā)生干性轉(zhuǎn)化[47]。

阿霉素可通過介導(dǎo)細(xì)胞衰老使癌細(xì)胞生長停滯，而B7-H3可通過上調(diào)跨膜四家族成員1（transmembrane 4 superfamily member 1，TM4SF1）抑制阿霉素介導(dǎo)的細(xì)胞生長停滯和G2/M滯阻，B7-H3對TM4SF1的調(diào)節(jié)作用依賴于AKT[48]。奧沙利鉑可導(dǎo)致癌細(xì)胞的細(xì)胞周期在G2/M滯阻，限制其復(fù)制增殖。有研究表明，B7-H3在CRC細(xì)胞中的表達(dá)可通過激活STAT3通路上調(diào)M期誘導(dǎo)磷酸酶1（cell division cyclin 25A，又稱CDC25A）表達(dá)，促使癌細(xì)胞越過G2/M滯阻，從而提高CRC細(xì)胞對奧沙利鉑的抗性，并且在CRC患者組織中發(fā)現(xiàn)CDC25A和B7-H3的表達(dá)也呈正相關(guān)[49]。

放射性治療可破壞癌細(xì)胞的DNA結(jié)構(gòu)，致使癌細(xì)胞凋亡。B7-H3可減少化療誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、S期滯阻和DNA雙鏈斷裂，B7-H3過表達(dá)可下調(diào)自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3（light chain 3，LC3）、自噬相關(guān)蛋白5（autophagy protein 5，Atg5）、Beclin-1等自噬相關(guān)蛋白表達(dá)，通過降低細(xì)胞自噬水平從而增強(qiáng)癌細(xì)胞對放射性治療的抗性[50]。另有一項(xiàng)研究通過對經(jīng)過X光照射的人結(jié)腸腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組分析發(fā)現(xiàn)，與敲除B7-H3的人結(jié)腸癌RKO細(xì)胞對比，B7-H3的高表達(dá)可通過NF-κB通路上調(diào)有絲分裂驅(qū)動蛋白家族成員15（kinesin family member 15，KIF15）的表達(dá)，KIF15可激活下游的胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase，ERK），提高RKO細(xì)胞對放射性的抗性，KIF15抑制劑或沉默KIF15可以逆轉(zhuǎn)B7-H3介導(dǎo)的放射性耐受[51]。

6 B7-H3在癌癥中的其他作用

癌癥的產(chǎn)生往往伴隨Warburg效應(yīng)，即在氧氣充足的情況下，癌細(xì)胞傾向于削弱有氧呼吸，進(jìn)行糖酵解反應(yīng)為細(xì)胞提供能量，Warburg效應(yīng)可以創(chuàng)造出適合腫瘤生存的腫瘤微環(huán)境，為癌細(xì)胞DNA復(fù)制、蛋白質(zhì)合成提供能量和原料，并且抑制微環(huán)境中免疫細(xì)胞對癌細(xì)胞的殺傷功能。缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）是介導(dǎo)Warburg效應(yīng)的一個(gè)重要因子。B7-H3被發(fā)現(xiàn)與腫瘤組織的Warburg效應(yīng)有關(guān)，B7-H3可通過PI3K/AKT/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）通路上調(diào)HIF-1α及其下游的糖酵解調(diào)節(jié)因子，增強(qiáng)口腔鱗狀癌細(xì)胞的Warburg效應(yīng)[52]。也有研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3通過STAT3通路上調(diào)有氧糖酵解中的糖酵解酶己糖激酶-2來促進(jìn)Warburg效應(yīng)的產(chǎn)生[53]。

在細(xì)胞周期中存在G1/S限制點(diǎn)，在這個(gè)限制點(diǎn)決定細(xì)胞隨后進(jìn)入下一相進(jìn)行DNA合成和細(xì)胞分裂，或在G0期停止，發(fā)育成熟并進(jìn)行分化。癌細(xì)胞由于細(xì)胞周期出現(xiàn)混亂，往往能逃出這個(gè)限制點(diǎn)的限制，進(jìn)行異常增殖。B7-H3可幫助癌細(xì)胞越過G1/S限制點(diǎn)，使用siRNA沉默B7-H3的人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞U937表現(xiàn)出了G0/G1阻滯現(xiàn)象及對去甲氧柔紅霉素和阿糖胞苷的敏感性增強(qiáng)[54]。

7 B7-H3與其他細(xì)胞表面受體共表達(dá)情況

研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3與一些其他細(xì)胞表面受體存在共表達(dá)現(xiàn)象。在一項(xiàng)對胰腺癌（pancreatic carcinoma，PCa）細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn)，可溶性B7-H3（soluble B7-H3，sB7-H3）可刺激PCa細(xì)胞上調(diào)TLR4的表達(dá)，從而激活NF-κB通路并上調(diào)其下游IL-8和VEGF的表達(dá)[34]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）的刺激下，表達(dá)B7-H3的PCa細(xì)胞則表達(dá)更多的TLR4，B7-H3敲除的PCa細(xì)胞TLR4表達(dá)量則顯著較少，B7-H3對于TLR4的這種調(diào)節(jié)作用可能是通過溴結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白4（bromodomain-containing protein 4，BRD4）實(shí)現(xiàn)的[55]。在一項(xiàng)對包括634個(gè)非小細(xì)胞肺癌臨床樣本的研究中發(fā)現(xiàn)，其中80.4%的樣本中檢測到B7-H3表達(dá)，17.6%臨床患者樣本檢測到PD-L1與B7-H3的共表達(dá)，10%樣本檢測到B7-H4與B7-H3共表達(dá)[56]。一項(xiàng)對接受切除手術(shù)后宮頸癌患者的組織樣本研究發(fā)現(xiàn)，在552個(gè)樣本中，21.0%存在B7-H3與PD-L1共表達(dá)，41.7%有PD-L1或B7-H3單表達(dá)，37.3%樣本既無PD-L1表達(dá)也無B7-H3表達(dá)[3]。有研究對31例間皮瘤患者的組織切片PD-L1和B7-H3表達(dá)水平進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，其中28例B7-H3陽性，13例PD-L1陽性，在13例PD-L1陽性中有12例存在B7-H3共表達(dá)[57]。另有一項(xiàng)對臨床患者樣本的小樣本量研究發(fā)現(xiàn)，在黑色素瘤、肺癌、腎癌、肝癌、乳腺癌、咽喉癌、結(jié)腸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤的樣本中均檢測到B7-H3與CD70的共表達(dá)，對TCGA數(shù)據(jù)庫中轉(zhuǎn)錄組測序（RNA sequencing，RNA-seq）分析發(fā)現(xiàn)，在其他幾種癌癥中B7-H3與CD70也有共表達(dá)現(xiàn)象[58]。

8 基于B7-H3的治療方法

目前20余個(gè)針對B7-H3靶點(diǎn)的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行，以檢驗(yàn)其安全性和有效性（見表1）。MacroGenics公司開發(fā)的enoblituzumab（MGA271）是靶向B7-H3的單抗藥物，目前已完成對B7-H3表達(dá)實(shí)體瘤的Ⅱ期臨床試驗(yàn)，enoblituzumab和ipilimumab（靶向CTLA-4單抗藥物）聯(lián)合治療黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌等實(shí)體瘤的Ⅰ期臨床試驗(yàn)也已完成[59]。MacroGenics公司構(gòu)建了靶向CD3×B7-H3的雙特異性抗體MGD009，與對照組激活T細(xì)胞（activated T cell，ATC）相比，配備了MGD009的ATC對多種黑色素瘤細(xì)胞系表現(xiàn)出更強(qiáng)的殺傷力，可以分泌更多的IFN-γ，并且ATC表面表達(dá)更多的CD69和CD25，在動物模型中也可以更有效殺傷癌細(xì)胞，目前MGD009與抗PD-1單抗MGA012聯(lián)合治療的Ⅰ期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行[60]。MacroGenics公司還通過將B7-H3抗體與化學(xué)基團(tuán)vc-seco-DUBA連接，構(gòu)建了靶向B7-H3的抗體偶聯(lián)藥物（antibody conjugated drug，ADC）MGC018，MGC018不僅對表達(dá)B7-H3的癌細(xì)胞有殺傷作用，由于其具有易被蛋白酶降解的連接肽，其對癌癥病灶處B7-H3陰性的癌細(xì)胞也有殺傷作用，在多種異種移植和人源腫瘤異種移植（patient-derived tumor xenograft，PDX）體外模型中均表現(xiàn)出很好的抑癌效果，并且在食蟹猴中進(jìn)行的毒理實(shí)驗(yàn)顯示其并無明顯毒副作用，MGC018與MGA012聯(lián)合治療實(shí)體瘤的Ⅱ期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行志愿者招募[61]。靶向B7-H3的放射性免疫療法也被開發(fā)，Y-mAbs Therapeutics（YMAB）公司使用放射性同位素131I或124I連接抗B7-H3抗體，構(gòu)建124I-omburtamab和131I-omburtamab從而使放射性物質(zhì)可在癌癥病灶處聚集，增強(qiáng)放射性療法的特異性，針對轉(zhuǎn)移性中樞神經(jīng)細(xì)胞瘤、促結(jié)締組織增生型小圓細(xì)胞瘤的臨床試驗(yàn)已經(jīng)開展[62-63]。有研究人員構(gòu)建出了靶向B7-H3的嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T cells，CAR-T），通過生物熒光技術(shù)檢測到B7-H3 CAR-T在動物的實(shí)體瘤和血液瘤模型中均可有效減少腫瘤負(fù)荷，SCRI-CARB7H3、4-1BBζ B7H3-EGFRt-DHFR這2款靶向B7-H3的CAR-T藥物正在進(jìn)行Ⅰ期臨床，4SCAR-276已進(jìn)入Ⅱ期臨床[64]。除了CAR-T療法，也有研究構(gòu)建了靶向B7-H3的CAR-NK-92Mi細(xì)胞，并且其在非小細(xì)胞肺癌異種移植的體外模型中展現(xiàn)了很好的抗癌效果，其抗癌效果顯著強(qiáng)于普通的NK-92Mi細(xì)胞，可以釋放更多的CD107a、顆粒酶B和穿孔素，從而發(fā)揮更強(qiáng)的殺傷效果[65]。另有研究發(fā)現(xiàn)，使用索拉非尼可抑制人卵巢癌細(xì)胞生長但會導(dǎo)致B7-H3顯著上調(diào)，再使用B7-H3×CD3雙特異性抗體聯(lián)合索拉非尼進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在SKOV3移植模型中具有很好的協(xié)同抑癌效果[66]。

表1 靶向B7-H3的藥物臨床研究情況Table 1 Clinical research on drugs targeting B7-H3

9 結(jié)語與展望

針對PD-1/PD-L1的靶向藥物（CAR-T、單克隆抗體藥物、ADC藥物等）在臨床上取得了一定成功，為針對免疫檢查點(diǎn)的生物藥物發(fā)展帶來希望，但普遍存在的問題是靶向PD-1/PD-L1的療法響應(yīng)率較低，且易產(chǎn)生耐受性，所以目前臨床對于靶向新檢查點(diǎn)的藥物需求很大。B7-H3作為B7家族的一員，雖然與PD-L1作用機(jī)制不同，但同樣發(fā)揮了免疫抑制作用，介導(dǎo)癌細(xì)胞的免疫逃逸。由于B7-H3只在癌細(xì)胞和一些免疫細(xì)胞上有表達(dá)，在人體正常組織中均無表達(dá)，使得靶向B7-H3藥物可以選擇性殺傷癌細(xì)胞而對正常組織造成較少傷害。針對B7-H3的單抗藥物目前已進(jìn)入臨床階段且無嚴(yán)重毒副作用，另外一些B7-H3相關(guān)雙特異性抗體藥物、CAR-T、CAR-NK、ADC藥物等在臨床前階段也表現(xiàn)出很好的抗癌療效。靶向B7-H3的藥物展現(xiàn)出很好的臨床前景。B7-H3的配體目前尚未發(fā)現(xiàn)，并且其在免疫調(diào)節(jié)中的作用仍存在一些爭論，有待進(jìn)一步研究。