李娟，王曉霞

摘 要：高效液相色譜已成為化學、醫(yī)學、工業(yè)和法學等學科領域中一項十分重要的分離分析技術。近年來，我國對食品安全有了更高的關注度，越來越多的研究人員將高效液相色譜應用于食品安全檢測中獲得了良好的效果。本文分析了高效液相色譜應用于食品添加劑檢驗領域中的具體方法，并針對不同的常見食品添加劑作出了相應的分析，旨在為我國現代化的食品添加劑高效液相色譜檢驗工作的優(yōu)化提供幫助與參考。

關鍵詞：高效液相色譜；食品添加劑；檢測分析；食品安全

Application of High Performance Liquid Chromatography in the Detection of Food Additives

LI Juan， WANG Xiaoxia

（Xinjiang Institute of Ecology and Geography， Chinese Academy of Sciences， Urumqi 830011， China）

Abstract： High performance liquid chromatography has become a very important separation and analysis technology in the fields of chemistry， medicine， industry and law. In recent years， China has paid more attention to food safety， and more and more researchers have applied high performance liquid chromatography to food safety detection and achieved good results. This paper analyzes the specific methods of high performance liquid chromatography applied in the field of food additive inspection， and makes corresponding analysis for different common food additives， aiming at providing help and reference for the optimization of the modern high performance liquid chromatography inspection of food additives in China.

Keywords： high performance liquid chromatography; food additives; detection and analysis; food safety

食品添加劑是一種應用于食品生產中的添加物質，能使食品的質量和營養(yǎng)價值得到提升，部分食品添加劑還能改善食品的感官性質，避免食品在食用前出現腐敗變質的情況，延長食品的保藏期。目前，我國已有20余大類食品添加劑，有近1 000種食品添加劑，可將其細分為抗氧化劑、甜味劑、天然或人工合成色素等。食品添加劑是食品工業(yè)中不可忽視的一個重要物質，在現代化食品生產中，相關工作人員需了解食品添加劑的具體應用方式，并做好有效的食品添加劑檢測。在目前的食品生產環(huán)境中，食品添加劑違法超標、超范圍使用的問題依舊較為突出，所以相關工作人員需針對食品添加劑進行定量和定性檢測并了解其中存在的問題，選擇合理的方式對食品添加劑進行檢測與管理，盡可能保障現代化的食品生產安全，使我國未來的食品監(jiān)測工作能夠更為順利地開展。相關工作人員發(fā)現利用高效液相色譜法檢測食品添加劑有助于了解食品添加劑的使用是否合理。

1 高效液相色譜與食品添加劑的概述

高效液相色譜是色譜法中十分重要的一個分支，這項技術采用高壓輸液系統(tǒng)將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑作為流動相，由流動相攜帶需測定的混合物液體泵入有固定相的色譜柱中，而在色譜柱中各成分能夠得到有效的分離，分離完成后將其輸送到檢測器中進行檢測，能幫助工作人員對樣本進行有效的分析，了解其中存在的不同物質。

高效液相色譜在應用過程中可通過選擇固定相和流動相以及調節(jié)流動相比例達到最優(yōu)的分離效果，不僅速度較快且重復性較高，檢測時間能控制在十幾分鐘至幾十分鐘。同時高效液相色譜柱能反復使用，在進樣分離測定時為儀器自動化處理，具有較高的分析精度，可減少人為干擾及誤差。在目前的市場環(huán)境中，大部分有機化合物都可采用高效液相色譜進行分析，是檢測食品添加劑最常用的方法之一[1]。

食品添加劑是指應用于食品生產中能使食品的質量和營養(yǎng)價值得到提升的物質，部分食品添加劑還能改善食品的感官性質，避免食品在食用前出現腐敗變質。目前，我國將可允許使用的食品添加劑分成23大類，共計有2 400多種食品添加劑，將其細分可分為防腐劑、甜味劑、天然或人工合成色素等[2]。進行食品生產時合理使用一定的添加劑，在我國的食品生產范圍內是被允許的。合理地應用食品添加劑不會對人體造成損傷，但目前使用的大多數食品添加劑是化學合成添加劑，如果不對其使用加以限制，會導致人體健康遭到危害。

在進行食品添加劑檢測時，需了解我國的食品添加劑在生產應用及檢驗檢測中的常見問題及特點，從而選擇合理的方式進行測定，使我國的食品安全服務與社會建設需求同步發(fā)展。對于食品安全檢測工作來說，食品添加劑的檢測是一項重要的內容，目前常用的檢測技術為液相色譜技術，該技術具有較高的檢測靈敏度、自動化程度高、分析速度快和結果準確等優(yōu)勢。

2 高效液相色譜法在食品添加劑檢測中的應用

2.1 甜味劑的檢測

甜味劑是食品生產過程中較為常用的一種食品添加劑。甜味劑在進行分類時，根據其來源不同可分為天然甜味劑和人工合成甜味劑；根據其營養(yǎng)價值，又可分為營養(yǎng)型甜味劑和非營養(yǎng)型甜味劑[3]。一般情況下所指的甜味劑是指人工合成的非營養(yǎng)型甜味劑，包括糖精鈉、環(huán)己基氨基磺酸鈉、乙?；前匪徕浐吞扉T冬酰苯丙氨酸甲酯等。

糖精鈉在食品生產中價格低廉、使用方便，所以在食品生產中應用較為廣泛。由于該物質是一種人工合成的化學物質，使用時需嚴格控制添加量，如果過量添加會對人體造成一定程度的危害，針對糖精鈉的檢測是極為嚴格的。在進行實際檢驗時，可將高效液相色譜熒光法應用于食品添加劑糖精鈉的檢測中，相較于高效液相色譜紫外檢測法，高效液相色譜熒光法具有更高的重現性和精準度。高效液相色譜熒光法在檢驗時選擇性響應的特征較低，可有效避免食品檢測過程中組分較多導致的前期分離和處理難度較大產生目標物干擾的問題，對于輔助測定的性能要求十分適合用于復雜樣品的快速檢驗與分析。

液相色譜測定甜味劑時多采用同時測定多種甜味劑的方法，且定量準確、靈敏度高。季磊等[4]測定葡萄酒中阿斯巴甜、阿力甜和紐甜時以乙腈和水溶液作為流動相，在溫度30 ℃，檢測波長205 nm，C18色譜柱條件下，前處理采用MAX固相萃取柱凈化，化合物在0.02～3.00 mg·L-1線性關系良好，相關系數大于0.999 5，回收率可達82.7%～96.4%，相對標準偏差小于6%。伍昌明等[5]在測定碳酸飲料中安賽蜜、阿斯巴甜、甘草甜素和新橙皮苷二氫查爾酮這4種甜味劑時，前處理采用超聲定容過膜的方法，流動相為甲醇和0.1 mol·L-1磷酸二氫銨梯度洗脫，柱溫為35 ℃，波長210 nm處測定安賽蜜、阿斯巴甜、甘草甜素含量，在波長282 nm處測定新橙皮苷二氫查爾酮含量，其線性范圍為1～50 mg·L-1，相關系數大于0.999 2，檢出限為0.02 mg·L-1，回收率在84.0%～103.0%，相對標準偏差小于3.1%。選擇高效液相色譜對食品中的甜味劑進行檢測，可提高甜味劑的檢測效率，并且能夠提高樣品的回收率及準確度，具有更高的可重復性。

2.2 食用色素的檢測

食用色素是在目前的食品生產過程中較常用的一種食品添加劑，這種添加劑能在一定程度上改變食品自身的顏色，可被人們適量食用。食用色素可分為天然色素以及合成色素。天然色素的來源包括動物色素和植物色素，在使用過程中具有較高的安全性；人工合成食用色素是用化學合成方法制得的有機色素，通常是以煤焦油中分離獲得的苯胺染料作為原料制備而成的一種色素，從健康的角度來看，人工合成色素大多數具有慢性毒性和致癌性，在食品生產過程中，人工合成色素的使用以及用量得到了極為嚴格的管理和控制。

孫悅等[6]在研究測定玉米面制品中檸檬黃色素時采用超純去離子水為提取液，以碳酸氫鈉為輔助提取試劑，按照樣品與碳酸氫鈉5∶1的比例稱取，振蕩離心提取上清液，過膜測定檸檬黃色素。檢測波長選取429 nm，柱溫35 ℃，以甲醇和乙酸銨體積比13∶87等度洗脫，流速為1.0 mL·min-1條件進行測定。檸檬黃在0.625～15.000 μg·mL-1線性關系良好，相關系數為0.999 9，加標回收率為89.55%～93.76%，RSD為0.08%～0.36%。除常見的人工合成色素外，可采用液相色譜技術對天然色素進行成分分析，目前對葉黃素類的測定技術已比較成熟。

2.3 防腐劑的檢測

防腐劑的合理使用能抑制食品中微生物的繁殖并殺滅微生物，避免微生物引發(fā)食品腐敗，使食品能夠在一段時間內保持良好的鮮度和品質。目前，在食品生產過程中，常用的防腐劑都是人工合成的，常見的防腐劑包括苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鈉鹽等。在食品生產過程中防腐劑的合理使用必不可少，但值得注意的是，防腐劑使用不當或過度使用會對人體造成一定程度的危害，引發(fā)一系列的副作用。

防腐劑長期過量攝入會對人體健康造成一定程度的影響，做好食品中防腐劑含量的測定是一項極為重要的內容。趙艷霞等[7]對阿膠糕采用沉淀蛋白，超聲提取的前處理，過膜后進入高效液相色譜系統(tǒng)中，能夠完成苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、水楊酸、苯氧異丙醇、2，6-二氯苯甲醇、苯甲酸甲酯、碘丙炔醇丁基氨甲酸酯、對氯間甲酚、2，4-二氯苯甲醇、σ-傘花烴-5-醇、氯二甲酚、氯咪巴唑、芐氯酚、三氯卡班和硫柳汞鈉16種防腐劑含量的測定。以C18柱為分析柱，將pH為3.8含0.02 mmol·L-1乙二胺四乙酸二鈉的0.025 mol·L-1磷酸二氫鈉溶液作為無機相，將甲醇作為有機相，梯度洗脫，在洗脫速度1 mL·min-1，波長230 nm下進行檢測。該方法在20～500 ng·mL-1線性關系良好，相關系數均不小于0.999 5。16種防腐劑加標回收率為98.8%～102.5%，測定結果的相對標準偏差為0.78%～2.36%。此方法操作簡單、目標物分離度好，無論是檢測準確度還是樣品回收率都較好。將高效液相色譜應用于食品防腐劑的測定不僅前處理簡單且通量大、準確度高、分析速度快，是防腐劑測定中最常用、最有效的技術之一。

2.4 抗氧化劑的檢驗

食物的腐爛很大程度上是由氧化作用導致，而抗氧化劑的應用能阻止或延緩食品氧化變質、提高食品的穩(wěn)定性和延長貯存期。食品抗氧化劑可分為人工合成與天然抗氧化劑。常用的天然抗氧化劑有植酸、茶多酚、花青素，常用的人工合成抗氧化劑有丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯、沒食子酸丙酯。但天然抗氧化劑的穩(wěn)定性相對來說較差，因此在實際使用時，人工合成抗氧化劑的應用較為廣泛?？寡趸瘎┑臋z測常使用高效液相色譜-二極管陣列檢測法，在實際檢測中獲得了良好的效果，加標后的樣品回收率可達到80%～102%，該方法具有較高的靈敏度和較高的檢測效率，能有效檢測食品添加劑中抗氧化劑的含量，具有良好的應用價值。

3 結語

高效液相色譜技術具有較高的分離度和靈敏度，已廣泛應用于食品添加劑的檢測。隨著近年來相關研究技術的不斷更新，高效液相色譜技術也得到了蓬勃的發(fā)展，將其與各種監(jiān)測技術聯合應用也變得更普遍，能夠更快速地檢測出食品中的添加劑含量。隨著技術和研究的不斷發(fā)展，高效液相色譜技術將在食品檢測和分析領域提供更多的支持，促進我國食品安全發(fā)展。

參考文獻

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[3]譚丹丹.高效液相色譜法在食品分析中的應用研究[J].現代食品，2021（2）：149-151.

[4]季磊，陳博，馬曉健.高效液相色譜法測定葡萄酒中阿斯巴甜、阿力甜和紐甜的含量[J].宜春學院學報，2022，44（3）：99-101.

[5]伍昌明，陳治宏，張琳，等.高效液相色譜法同時測定碳酸飲料中４種甜味劑[J].理化檢驗（化學分冊），2020，56（3）：115-117.

[6]孫悅，廖若宇，劉新保，等.高效液相色譜法檢測玉米面制品中檸檬黃色素的研究[J].糧食加工，2021，46（6）：92-96.

[7]趙艷霞，張棟，姜巖，等.高效液相色譜法同時測定阿膠糕中16種防腐劑[J].化學分析計量，2022，31（6）：63-67.