黃櫻初 鐘昌艷 阮良鵬 陸成光 羅幸 張曉霞

摘要：為了及時(shí)預(yù)防南美白對蝦疫病發(fā)生，提高疫病風(fēng)險(xiǎn)防控能力，降低疫病發(fā)生機(jī)率，科學(xué)處置潛在風(fēng)險(xiǎn)，提高南美白對蝦的產(chǎn)量和產(chǎn)值，開展南美白對蝦疫病監(jiān)測及分析。文章旨在從南美白對蝦苗種疫病管理的角度出發(fā)，系統(tǒng)探討專項(xiàng)疫病監(jiān)測結(jié)果分析與病害防控措施，逐步構(gòu)建起完備、高效的南美白對蝦本土化養(yǎng)殖體系。

關(guān)鍵詞：南美白對蝦苗種 ；疫病監(jiān)測 ；白斑綜合癥；防控措施

中圖分類號：S94? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

南美白對蝦又被稱為凡納濱對蝦，是現(xiàn)階段我國南方主要的對蝦養(yǎng)殖種類。近些年來，海南、廣東、廣西相關(guān)沿海省份，進(jìn)行了苗種繁育、養(yǎng)殖等系列嘗試，獲得了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大以及不同來源苗種的引進(jìn)，使得南美白對蝦病害頻發(fā)，對養(yǎng)殖戶帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失[1]。為了引進(jìn)健康、優(yōu)質(zhì)的蝦苗進(jìn)行養(yǎng)殖，欽南區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣部門應(yīng)當(dāng)率先做好南美白對蝦苗種疫病監(jiān)測。根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)，在細(xì)菌、病毒、病原生物等多種因素影響，南美白對蝦出現(xiàn)早期死亡綜合癥、白斑綜合癥等疫病的機(jī)率較大，蝦苗在發(fā)病后會出現(xiàn)厭料、白便、空腸空胃、甲殼潰瘍、肝胰臟萎縮、紅體、白斑等癥狀，滯緩生長速度，影響均勻度與成活率，嚴(yán)重的短時(shí)間內(nèi)導(dǎo)致全部死亡，給養(yǎng)殖戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。現(xiàn)階段，蝦苗場的苗種質(zhì)量參差不齊，大部分養(yǎng)殖戶在苗種選購中存在盲目性，單憑經(jīng)驗(yàn)方法目測選購，沒有經(jīng)過專業(yè)的苗種病毒檢測；在藥物品種的選擇與用量控制過程中，沒能根據(jù)疫病致病機(jī)理，進(jìn)行科學(xué)用藥。

廣西欽州市欽南區(qū)是農(nóng)業(yè)部對蝦優(yōu)勢養(yǎng)殖區(qū)、“廣西對蝦之鄉(xiāng)”，2021年欽南區(qū)對蝦養(yǎng)殖面積達(dá)8.3萬畝，年產(chǎn)量5.6萬噸，對蝦養(yǎng)殖基地主要分布沿海8個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，轄區(qū)內(nèi)有38家蝦苗場，年培育蝦苗60億尾以上。近年來，該地區(qū)注重加大科技力量投入，通過池塘標(biāo)準(zhǔn)化改造、養(yǎng)殖尾水處理工程建設(shè)、引進(jìn)新型高效養(yǎng)殖技術(shù)以及推廣引進(jìn)優(yōu)質(zhì)苗種、做好苗種疫病監(jiān)測等技術(shù)措施，進(jìn)一步提高了對蝦的養(yǎng)殖產(chǎn)量。為保持良好發(fā)展勢頭，減少疫病對養(yǎng)殖的影響，實(shí)現(xiàn)養(yǎng)殖條件科學(xué)化調(diào)控，依托現(xiàn)有技術(shù)條件，定向做好蝦苗專項(xiàng)疫病監(jiān)測，更好地指導(dǎo)對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)。

1? ?材料與方法

1.1? 樣品與來源

跟據(jù)廣西壯族自治區(qū)的有關(guān)文件精神，為強(qiáng)化養(yǎng)殖疫病防控，完善水生動物疫病防控體系，加強(qiáng)水生動物疫病監(jiān)測預(yù)警和風(fēng)險(xiǎn)評估，提高重大疫病防控和應(yīng)急處置能力。從2017年至今，在欽州市欽南區(qū)設(shè)立15-20個(gè)苗種場的監(jiān)測點(diǎn)，每年對20-30個(gè)蝦苗樣品進(jìn)行檢測，檢測項(xiàng)目有白斑綜合癥病毒（WSSV）、對蝦桃拉綜合癥病毒（TSV）、傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）、對蝦肝胰腺細(xì)小病毒（HPV）、對蝦黃頭病毒（YHV）、對蝦桿狀病毒（BP）、對蝦傳染性肌肉壞死病毒（IMNV）、急性肝胰腺壞死病毒（AHPND/EMS）、對蝦偷死野田村病毒（CMNV）、蝦血細(xì)胞虹彩病毒（SHIV）。

1.2? 樣品檢測方法

1.2.1? 樣品的采集：

嚴(yán)格按照《水生動物產(chǎn)地檢疫采樣技術(shù)規(guī)范》要求，開展南美白對蝦苗種樣品采集，所選蝦苗樣品長度在0.5厘米到1厘米，每批蝦苗采集兩份樣品，每一份樣品保證有600尾以上的蝦苗活體，將采集的樣品采用充氧運(yùn)輸或干水低溫保存，回到實(shí)驗(yàn)室馬上開展實(shí)驗(yàn)室檢測[3]。

1.2.2? 水生動物病毒基因組DNA/RNA的提?。?/p>

取適量待檢新鮮樣品組織加入1-5倍的生理鹽水進(jìn)行勻漿搗碎，取至少500微升勻漿至1.5毫升離心管中。離心5分鐘去除宿主細(xì)胞組織核酸。取100微升上清液質(zhì)新的離心管中，加入300微升Buffer GXP至上清液中，顛倒混勻，靜置5-10分鐘裂解病毒。加入200微升無水乙醇至裂解液中，渦旋混勻20秒。把核酸吸附柱裝在2毫升收集管中。把裂解液全部轉(zhuǎn)移至核酸吸附柱核酸中，離心1分鐘。倒棄濾液，把核酸吸附柱裝回收集管中，加入400Buffer RW2至核酸吸附柱中，離心1分鐘，重復(fù)一遍這個(gè)步驟。倒棄收集管中的濾液，把核酸吸附柱裝回收集管中，離心3分鐘。把核酸吸附柱裝在新的1.5毫升離心管中。加入30-50微升DEPC水至核酸吸附柱中，靜置1-2分鐘，離心1分鐘，所得的溶液就是病毒基因組核酸溶液，若暫時(shí)不用，于-80℃儲存。

1.2.3? 各種對蝦病毒核酸檢測方法

采用的是恒溫?cái)U(kuò)增熒光法，所用的儀器是DEAOU-308C檢測儀。嚴(yán)格按照每一種病毒檢測的操作規(guī)程配制試劑，在設(shè)定的溫度時(shí)間內(nèi)發(fā)生程序反應(yīng)，做好陰性對照和陽性對照。為了保護(hù)蝦苗場的隱私，用“A蝦苗場、B蝦苗場、C蝦苗場、......來表示”。

2? 檢測結(jié)果的讀取與分析

2.1? 檢測結(jié)果的讀取

檢測結(jié)果有兩種讀取方式，第一種顯示檢測結(jié)果如圖1，在對蝦桿狀病毒檢測中，顯示“A蝦苗場、E蝦苗場、H蝦苗場及陽性對照”的檢測結(jié)果為陽性。再根據(jù)實(shí)驗(yàn)圖2的擴(kuò)增曲線，“A蝦苗場、E大蝦苗場、H蝦苗場及陽性對照”的擴(kuò)增曲線呈“S”型曲線，且出峰時(shí)間≤60分鐘，則初步判斷為檢測陽性，含有對蝦桿狀病毒基因；如果曲線呈直線或輕微斜線無“S”型擴(kuò)增曲線則為陰性。

本著對樣品的認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度，當(dāng)樣品出現(xiàn)陽性曲線時(shí)要重檢一次，必要時(shí)送到廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢。

2.2? 2020年－2022年的南美白對蝦苗種專項(xiàng)疫病監(jiān)測結(jié)果分析

在2020-2022年期間檢測中，欽南區(qū)水產(chǎn)檢測人員共抽樣檢測59個(gè)蝦苗樣品，每個(gè)蝦苗樣品同時(shí)開展10種病毒（WSSV、TSV、IHHNV、HPV、YHV、BP、IMNV、AHPND/EMS、CMNV、SHIV）的檢測，累計(jì)檢出病毒陽性樣本10批次（如表3）。其中2020年分別檢出WSSV陽性2批次、IHHNV陽性3批次和AHPND/EMS陽性1批次，病毒陽性檢出率分別是6.4%、9.7%和3.2%。2021年無檢出病毒陽性。2022年分別檢出IHHNV陽性1批次，BP陽性3批次，病毒陽性檢出率分別為5%和15%。由此得出，對蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）檢出陽性4批次，次數(shù)最多，其次是對蝦桿狀病毒（BP）檢出陽性3批次。其余6種病毒如對蝦桃拉綜合癥病毒（TSV）、對蝦肝胰腺細(xì)小病毒（HPV）、對蝦黃頭病毒（YHV）、對蝦傳染性肌肉壞死病毒（IMNV）、對蝦偷死野田村病毒（CMNV）及蝦血細(xì)胞虹彩病毒（SHIV）近三年無檢出陽性。

2.3? 處置方式

經(jīng)過復(fù)檢后確認(rèn)是陽性，要將檢測結(jié)果及時(shí)向主管領(lǐng)導(dǎo)反映，同時(shí)反饋給苗種企業(yè)，監(jiān)督指導(dǎo)企業(yè)將檢出病毒陽性的同批次的苗種進(jìn)行銷毀和無害化處理，禁止銷售，并對相關(guān)的生產(chǎn)車間和運(yùn)輸車輛進(jìn)行全面徹底的消毒，防止病毒外溢和交叉感染。

3? 常見病害發(fā)病原因分析及綜合防控措施

3.1? 發(fā)病原因分析

通過多年的病害監(jiān)測結(jié)果分析，南美白對蝦影響比較大的最主要的病害有白斑綜合癥、紅體病、急性肝胰腺壞死病、弧菌病、肝腸胞蟲病等[4]?？偨Y(jié)發(fā)病的原因有：

3.1.1? 苗種退化、質(zhì)量不高

由于欽南區(qū)內(nèi)的蝦苗場都是從外地購進(jìn)的蝦苗幼體，苗種退化、質(zhì)量參差不齊，有個(gè)別蝦苗場在引進(jìn)幼體前，沒有經(jīng)過正規(guī)的檢測機(jī)構(gòu)的檢測，存在蝦苗攜帶病毒的隱患。

3.1.2? 養(yǎng)殖管理不善造成的

部分養(yǎng)殖戶片面追求產(chǎn)量而加大放養(yǎng)密度、存在盲目濫用藥、在養(yǎng)殖過程中沒能及時(shí)有效處理養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)的各種問題。

3.1.3? 飼料質(zhì)量良莠不齊[5]

受玉米、大豆、魚粉等飼料原料價(jià)格的持續(xù)上漲，導(dǎo)致水產(chǎn)飼料價(jià)格連年上漲。加上水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，飼料的需求量大，涌現(xiàn)出很多的飼料廠，飼料的質(zhì)量良莠不齊。養(yǎng)殖戶為了貪圖便宜選擇一些低檔、便宜的飼料，導(dǎo)致對蝦營養(yǎng)跟不上，長不大，易致病。

3.1.4? 外界環(huán)境的影響

目前欽南區(qū)的池塘養(yǎng)殖主要以土池養(yǎng)殖為主，近兩年掀起了陸基圓池養(yǎng)殖、棚式養(yǎng)殖、工廠化養(yǎng)殖模式。土池養(yǎng)殖受外界影響較大，特別是在臺風(fēng)、暴雨或天氣變化較大的情況下，對蝦易出現(xiàn)應(yīng)激，抵抗力下降，導(dǎo)致病害發(fā)生。

3.2? 南美白對蝦病害的綜合防控措施

對蝦病害防控措施堅(jiān)持“預(yù)防為主、綜合防治”的原則，根據(jù)多年的工作經(jīng)驗(yàn)，提出一些綜合的防控措施，以供參考：

3.2.1? 加強(qiáng)苗種質(zhì)量管理，推動苗種產(chǎn)地檢疫

推廣引進(jìn)SPF優(yōu)質(zhì)苗種，引導(dǎo)養(yǎng)殖戶選擇正規(guī)苗場生產(chǎn)的，并經(jīng)過檢測合格的苗種。加快推進(jìn)水產(chǎn)苗種產(chǎn)地檢疫和苗種疫病監(jiān)測，健全漁業(yè)官方獸醫(yī)隊(duì)伍，全面推廣水產(chǎn)苗種產(chǎn)地檢疫出證工作，規(guī)范苗種流通，實(shí)行檢疫合格證制度，加強(qiáng)苗種檢疫執(zhí)法監(jiān)督。鼓勵苗種企業(yè)與各大科研機(jī)構(gòu)和大學(xué)合作，通過先進(jìn)的分子育種等技術(shù)，培育出抗病高產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)品種。從源頭上保證苗種質(zhì)量，保障水產(chǎn)養(yǎng)殖健康持續(xù)發(fā)展。

3.2.2? 強(qiáng)化養(yǎng)殖科學(xué)管理，構(gòu)建健康生態(tài)系統(tǒng)

指導(dǎo)養(yǎng)殖戶從養(yǎng)殖源頭開始抓起，做好消毒及防控措施，引進(jìn)優(yōu)質(zhì)苗種，投喂優(yōu)質(zhì)的配合飼料，合理調(diào)整放養(yǎng)密度，科學(xué)配套魚蝦混養(yǎng)技術(shù)，定期水質(zhì)檢測，合理增氧，做好養(yǎng)殖生產(chǎn)、投入用品及產(chǎn)品銷售記錄，推廣微生物制劑的使用，構(gòu)建生態(tài)養(yǎng)殖系統(tǒng)。

3.2.3? 開展疫病監(jiān)測，推進(jìn)疫病風(fēng)險(xiǎn)評估

欽南區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣站利用實(shí)驗(yàn)室的優(yōu)勢，在轄區(qū)內(nèi)合理設(shè)置病害監(jiān)測點(diǎn)，科學(xué)準(zhǔn)確地進(jìn)行病害測報(bào)，做好疫病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警和防控。加強(qiáng)病害防疫隊(duì)伍的建設(shè)，提高病害檢疫技術(shù)水平，更好地為廣大養(yǎng)殖戶服務(wù)。

3.2.4? 推廣高效健康養(yǎng)殖模式，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥減量

近幾年，欽南區(qū)加大資金和科技力量的投入，逐步推進(jìn)池塘標(biāo)準(zhǔn)化改造、向陸基圓池養(yǎng)殖、棚式對蝦養(yǎng)殖、工廠化設(shè)施養(yǎng)殖方向發(fā)展。推廣養(yǎng)殖尾水處理技術(shù)，加大安全用藥、科學(xué)用藥、減量用藥的宣傳力度，推廣使用微生物制劑，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)、綠色、健康發(fā)展。

4? 結(jié)語

通過建立疫病監(jiān)測點(diǎn)，科學(xué)準(zhǔn)確地開展檢測，完善水生動物疫病防控體系，加強(qiáng)水生動物疫病監(jiān)測預(yù)警和風(fēng)險(xiǎn)評估，提高重大疫病防控和應(yīng)急處置能力。文章借助實(shí)踐案例，在全面掌握南美白對蝦苗種疫病類型，設(shè)置專項(xiàng)疫病監(jiān)測模型，完善常規(guī)監(jiān)測流程，健全結(jié)果分析與病害防控措施，穩(wěn)步提高南美白對蝦養(yǎng)殖向健康、生態(tài)養(yǎng)殖的方向發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

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[5]王華生.淺談南美白對蝦養(yǎng)殖存在的問題及其應(yīng)對措施[J].農(nóng)民致富之友，2019（10）：172.