陳芳良,古惠文,衛(wèi)勁沂,毛 帥,2

膿毒癥是一種臨床常見疾病,具有發(fā)病急、病情進展快等特點,嚴重影響病人的健康及生命安全。膿毒癥發(fā)病機制復(fù)雜,多和機體感染、免疫、炎癥等病理生理過程相關(guān),其中炎癥反應(yīng)過度、免疫系統(tǒng)失衡是病情發(fā)展的重要環(huán)節(jié)[1]。膿毒癥所導(dǎo)致的免疫功能紊亂貫穿于整個疾病的發(fā)生發(fā)展過程,并可誘發(fā)多器官功能障礙,包括呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)等。膿毒癥心功能障礙的發(fā)生率為50%～70%[2-4]。心臟功能的損傷對膿毒癥預(yù)后影響較大,心功能障礙會顯著減少心排血量,導(dǎo)致有效循環(huán)容量減少,從而加劇組織缺氧、線粒體功能和代謝障礙,前期研究表明,合并心功能障礙使膿毒癥病人死亡率增高3～5倍[5]。因此,探索防治膿毒癥心功能障礙的新方法、新策略是目前重癥醫(yī)學(xué)領(lǐng)域亟待解決的問題。研究表明,膿毒癥心功能障礙的發(fā)病可能與炎性因子對心肌的抑制、心肌線粒體酶的抑制以及凋亡蛋白酶的激活等過程相關(guān)[6]。因此,清除心肌炎性因子、調(diào)節(jié)免疫功能、改善心肌能量代謝和抑制心肌細胞凋亡可能是治療膿毒癥心功能障礙的關(guān)鍵[7]。研究表明,中醫(yī)藥能夠抑制膿毒癥病人炎癥反應(yīng)、降低炎性因子水平、改善微循環(huán)和減輕心肌缺血缺氧等從而發(fā)揮治療膿毒癥心功能障礙的作用[8]。

三黃瀉心湯又名“三黃湯”“伊尹三黃湯”,由大黃、黃連、黃芩組成。該方首載于東漢張仲景所撰《金匱要略·驚悸吐衄下血胸滿瘀血病脈證治第十六》:“心氣不足、吐血、衄血,瀉心湯主之。大黃二兩,黃連、黃芩各一兩,右三味以水三升,煮取一升,頓服之[9]”?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn),三黃瀉心湯具有抗菌、抗炎、胃黏膜保護、改善高脂血癥、改善血液黏稠度等作用,臨床應(yīng)用較為廣泛[10]。三黃瀉心湯具有抑制細胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng)和抗氧化等作用[11]。三黃瀉心湯中的大黃酸、小檗堿和黃芩苷被證實具有抑制氧化應(yīng)激、清除炎性介質(zhì)的作用[12]。但既往研究多是對某一作用機制進行研究。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)通過“目標藥物-疾病-基因”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和數(shù)據(jù)的可視化處理,用于預(yù)測藥物活性成分靶點和相對應(yīng)的靶向疾病途徑,有助于從多維度探討藥物治療疾病的作用機制[13-14]。本研究運用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接的方法,利用多種相關(guān)的網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫,構(gòu)建“三黃瀉心湯-靶點-信號通路-膿毒癥心功能障礙”網(wǎng)絡(luò),多維度探討三黃瀉心湯對膿毒癥心功能障礙的潛在機制,為臨床和基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù)和新的思路。

1 資料與方法

1.1 三黃瀉心湯活性成分的獲取及靶點篩選 以“三黃瀉心湯”和“高效液相色譜/HPLC”為關(guān)鍵詞,在中國知網(wǎng)進行文獻檢索,共獲得3篇相關(guān)文獻:2020年傅丹青等[15]運用高效液相法研究三黃瀉心湯中主要成分大黃素、黃芩苷、鹽酸小檗堿的溶出規(guī)律,但其研究成分較少;2018年李智勇等[16]采用高效液相色譜法研究發(fā)現(xiàn),三黃瀉心湯配方顆粒與標準煎劑的化學(xué)成分存在一定差異,但缺乏生物等效研究;而2018年水棟等[17]運用高效液相色譜技術(shù)(包括專屬性試驗、線性范圍檢查、精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、重復(fù)性、加樣回收試驗、供試驗品含量測定)對三黃瀉心湯13個有效成分(巴馬汀、表小檗堿、大黃酚、大黃素、大黃酸、漢黃芩苷、漢黃芩素、黃連堿、黃芩苷、黃芩素、蘆薈大黃素、藥根堿、小檗堿)的含量進行了測定,各成分的含量測定結(jié)果見圖1,其中,蒽醌類和黃酮類共8種成分的含量在同一色譜條件下進行測定,所用方法快捷、準確、專屬性強,具有良好的精密度和重復(fù)性,故選為本次研究的主要有效成分。使用有機小分子生物活性數(shù)據(jù)庫(PubChem,http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)查詢成分相應(yīng)分子結(jié)構(gòu)(Canonical SMILES格式),上傳至Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫獲取三黃瀉心湯潛在作用靶點,由于Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫中未收錄蘆薈大黃素的作用靶點,因此,借助中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(TCMSP)補充預(yù)測蘆薈大黃素的潛在作用靶點,最后在Uniprot(https://www.uniprot.org)數(shù)據(jù)庫將蛋白質(zhì)靶點名稱規(guī)范化。

圖1 三黃瀉心湯中主要成分含量柱狀圖

1.2 膿毒癥心功能障礙疾病靶點篩選 以“sepsis-induced myocardial dysfunction”為關(guān)鍵詞在人類基因數(shù)據(jù)庫(GeneCards,https://www.genecards.org/)和人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫(OMIM,https://omim.org/)中獲取膿毒癥心功能障礙相關(guān)潛在靶點,匯總并刪除重復(fù)靶點后獲得膿毒癥心功能障礙對應(yīng)的疾病靶點。

1.3 藥物-疾病共同靶點的篩選 將三黃瀉心湯活性成分的靶點與膿毒癥心功能障礙的靶點同時導(dǎo)入Venn 2.1.0在線軟件作圖工具平臺進行Venn分析,獲得藥物與疾病靶點的交集靶點,即為三黃瀉心湯治療膿毒癥心功能障礙的潛在作用靶點。

1.4 構(gòu)建核心靶蛋白相互作用(PPI)關(guān)系網(wǎng)絡(luò) 將上述獲得的交集靶點上傳至蛋白質(zhì)相互作用分析數(shù)據(jù)庫(STRING,http://string-db.org/),并將物種設(shè)置為人(Homo sapiens),將最低作用閾值設(shè)置為0.400,其他參數(shù)則保留默認設(shè)置,隱藏未關(guān)聯(lián)的節(jié)點,并運用Cytoscape 3.8.2軟件構(gòu)建藥物與疾病之間的交集蛋白相互作用關(guān)系網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 構(gòu)建藥物-成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖 將三黃瀉心湯13種有效成分及交集靶點導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件中,構(gòu)建“藥物-成分-靶點”網(wǎng)絡(luò)圖。利用軟件中的“Network Analyzer”功能進行分析,并根據(jù)Degree值篩選出關(guān)鍵活性成分及靶點。其中藥物活性成分和作用靶點以“節(jié)點”表示,節(jié)點之間的相互作用以“邊”表示。

1.6 基因本體(geneon tology,GO)功能富集和京都基因及基因組百科全書(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析 運用注釋、可視化和綜合發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)庫(DAVID,https://david.ncifcrf.gov/home.jsp),設(shè)置“Homo sapiens”,對交集靶點進行GO功能及KEGG通路富集分析。使用微生信在線繪圖網(wǎng)站(http://www.bioinformatics.com.cn/)將結(jié)果進行可視化。

1.7 分子對接 在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(PDB,https://www.rcsb.org/)檢索并下載PPI網(wǎng)絡(luò)柱狀圖排名前3位的核心靶點的3D結(jié)構(gòu)PDB格式文件,并用PyMOL 2.5.0軟件進行去除水分子和配體的操作及運用Autodock Tools1.5.6軟件進行加氫處理。在PubChem數(shù)據(jù)庫檢索三黃瀉心湯的13種有效成分并下載其化學(xué)成分的3D結(jié)構(gòu)SDF文件,通過PyMOL軟件轉(zhuǎn)換成PDB文件。利用Autodock Tools 1.5.6軟件將化合物及靶點結(jié)構(gòu)文件轉(zhuǎn)換為pdbqt格式,確定對接受體的活性口袋。利用Autodock Vina進行虛擬對接,輸出20個預(yù)測結(jié)果。最后使用PyMOL軟件進行可視化處理。

2 結(jié) 果

2.1 三黃瀉心湯活性成分的獲取及潛在靶點篩選 刪除重復(fù)值后獲得三黃瀉心湯13種主要有效成分、511個相關(guān)潛在作用靶點,由此可以推測三黃瀉心湯具有多成分、多靶點的藥理特點。

2.2 膿毒癥心功能障礙疾病靶點篩選 從GeneCards數(shù)據(jù)庫和OMIM數(shù)據(jù)庫中檢索并刪除重復(fù)值,共獲得膿毒癥心功能障礙相關(guān)靶點基因352個;將三黃瀉心湯活性成分靶點與膿毒癥心功能障礙靶點同時在線導(dǎo)入Venn 2.1.0在線軟件作圖工具平臺進行Venn分析,獲得三黃瀉心湯與膿毒癥心功能障礙交集靶點51個(見圖2)。由此可知,三黃瀉心湯可以通過多種成分作用于膿毒癥心功能障礙的多個相關(guān)靶點來發(fā)揮作用。

圖2 三黃瀉心湯與膿毒癥心功能障礙相關(guān)交集基因韋恩圖

2.3 藥物-成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 將三黃瀉心湯13種有效成分及三黃瀉心湯與膿毒癥心功能障礙的交集靶點導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件中,構(gòu)建“藥物-成分-疾病靶點”網(wǎng)絡(luò)圖(見圖3)。利用軟件中的“Network Analyzer”功能進行分析,并根據(jù)Degree值篩選出關(guān)鍵有效成分,有效成分的Degree值越大,表明其在網(wǎng)絡(luò)中的作用越大,其中Degree值排名前3位的有效成分是大黃酸、大黃素、表小檗堿。所構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)共包括65個節(jié)點、143條邊線,藍色橢圓形代表三黃瀉心湯有效成分,青色八邊形代表交集靶點,每個潛在的藥物活性成分都與疾病靶點基因存在相互作用,體現(xiàn)了三黃瀉心湯通過多成分、多靶點干預(yù)治療膿毒癥心功能障礙。

圖3 藥物-成分-疾病靶點網(wǎng)絡(luò)圖

2.4 交集靶點相互作用關(guān)系網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建 將獲得的交集靶點導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫獲得交集蛋白相互作用的tsv文件,運用Cytoscape 3.8.2軟件構(gòu)建藥物與疾病之間的交集PPI關(guān)系網(wǎng)絡(luò)圖(見圖4),并利用軟件中的“Network Analyzer”功能進行網(wǎng)絡(luò)拓撲分析,網(wǎng)絡(luò)拓撲分析結(jié)果顯示49個節(jié)點、489條邊。節(jié)點表示靶點,連接線代表功能相關(guān)性,節(jié)點大小、線條多少與節(jié)點的Degree值呈正相關(guān)。

圖4 交集靶點相互作用關(guān)系PPI網(wǎng)絡(luò)圖

將STRING數(shù)據(jù)庫中獲得的交集靶點相互作用的tsv文件使用R語言進行處理得到PPI核心基因柱狀圖(見圖5)。其中大于Degree值中位數(shù)2倍的核心靶點為絲裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、腫瘤壞死因子(TNF)、血清清蛋白(ALB)。Degree值排名前10位的核心靶點包括MAPK3、TNF、ALB、絲裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、絲裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、白細胞介素-1β(IL-1β)、基質(zhì)金屬蛋白9(MMP9)、MYC基因(MYC)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)、細胞間黏附分子1(ICAM1)。PPI網(wǎng)絡(luò)也體現(xiàn)了三黃瀉心湯是通過多途徑、多靶點治療膿毒癥心功能障礙。

圖5 PPI核心基因柱狀圖

2.5 GO功能和KEGG通路富集分析 運用DAVID數(shù)據(jù)庫對51個潛在作用交集靶點進行GO功能富集分析,且設(shè)置顯著富集(P<0.01)后共獲得165個條目,其中生物過程125個、細胞組分21個、分子功能19個,依據(jù)基因計數(shù)值(Count值)升序排列,生物過程、細胞組分、分子功能各選取排名前10位制作氣泡圖(見圖6)。結(jié)果顯示,生物過程主要涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控、凋亡過程、蛋白磷酸化、炎癥反應(yīng)、凋亡過程的負調(diào)控等,由此可見,三黃瀉心湯有效成分主要通過調(diào)控細胞凋亡、炎癥反應(yīng)等對膿毒癥心功能障礙起潛在治療作用。

圖6 GO富集分析氣泡圖

KEGG通路富集分析共獲得顯著富集(P<0.01)80條通路,選取富集排名前20條的通路繪制氣泡圖(見圖7),結(jié)果顯示,三黃瀉心湯治療膿毒癥心功能障礙的主要信號通路涉及磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信號通路、腫瘤壞死因子(TNF)信號通路、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號通路、缺氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1)信號通路及自然殺傷細胞介導(dǎo)的細胞毒性信號通路等,表明三黃瀉心湯主要通過PI3K/Akt信號通路、TNF信號通路、MAPK信號通路、HIF-1信號通路等來發(fā)揮對膿毒癥心功能障礙的潛在治療作用。

圖7 KEGG通路富集分析圖

2.6 分子對接驗證 將三黃瀉心湯的13種有效成分與PPI網(wǎng)絡(luò)中排名前3位的核心靶點MAPK3、TNF、ALB分別進行分子對接,結(jié)合能<-20.920 kJ/mol表明活性成分與靶點有較好的結(jié)合活性,結(jié)合能<-29.288 kJ/mol表明分子與靶點的結(jié)合構(gòu)型具有強烈的結(jié)合活性[18]。結(jié)果顯示,三黃瀉心湯13種有效成分與MAPK3、TNF、ALB關(guān)鍵靶點具有較好的結(jié)合力,詳見表1。其中,與核心靶點MAPK3結(jié)合最強的是大黃酸(-38.074 kJ/mol)。詳見圖8。

表1 分子對接結(jié)果

3 討 論

王今達等[19]遵循六經(jīng)辨證、衛(wèi)氣營血辨證理論提出了“三證三法”辨證治療膿毒癥,將膿毒癥分為熱證、瘀證和虛證,與之相對應(yīng)的治療方法是清熱解毒法、活血化瘀法和益氣固脫法。大量基礎(chǔ)及臨床研究證實了“三證三法”對膿毒癥具有治療作用,其在一定程度上降低了膿毒癥的病死率[20]。三黃瀉心湯為張仲景經(jīng)方,具有清熱解毒的功效,用于治療膿毒癥心功能障礙具有充足的理論基礎(chǔ)。三黃瀉心湯的關(guān)鍵活性成分包括漢黃芩素、黃芩素、大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃酚、漢黃芩苷、黃連堿、黃芩苷、小檗堿等?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn),漢黃芩素通過抑制一氧化氮、細胞因子、趨化因子和生長因子在巨噬細胞中發(fā)揮抗炎作用[21]。漢黃芩素通過減少胞內(nèi)活性氧,達到降低細胞內(nèi)的核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)活性、弱化NF-κB介導(dǎo)的炎癥基因轉(zhuǎn)錄作用來減弱巨噬細胞的炎癥反應(yīng)[22]。黃芩素快速抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的釋放,導(dǎo)致白細胞介素-6(IL-6)和一氧化氮的減少發(fā)揮抗炎作用[23]。黃芩素通過PI3K/Akt信號通路,保護糖尿病心肌病大鼠免受氧化應(yīng)激和心肌組織炎癥的損害[24]。黃芩素具有解熱和廣泛的抗病毒作用,對RNA、DNA病毒均有良好的抗病毒作用,可通過抑制p38MAPK信號通路,對急性胰腺炎引發(fā)的肺組織損傷具有保護作用,亦能抑制心肌細胞氧化應(yīng)激和凋亡及心肌壞死對心臟發(fā)揮保護作用[25]。Yu等[26]研究發(fā)現(xiàn),蘆薈大黃素能夠減輕心肌梗死及心肌凋亡;徐瑞明等[27]實驗研究發(fā)現(xiàn),大黃素能夠減輕膿毒癥大鼠心肌損傷,減少膿毒癥大鼠心肌組織炎癥、氧化損傷和細胞凋亡。研究證實,大黃素減輕膿毒癥大鼠心肌損傷的作用可能是通過抑制炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生以及激活心肌細胞線粒體膜ATP敏感性K+通道來對抗細胞凋亡而實現(xiàn)的[28]。Wei等[29]研究顯示,大黃素能夠通過抑制Akt、NF-κB活性,減少半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9),抑制線粒體依賴凋亡途徑。研究表明,大黃酸可減少IL-6、白細胞介素-1β(IL-1β)和TNF-α等促炎細胞因子的生成,同時抑制NF-κB和核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體家族含pyrin結(jié)構(gòu)域蛋白3(NLRP3)炎性因子途徑,顯著減少免疫細胞遷移而發(fā)揮強大的抗炎作用[30-31]。大黃酸已被證明可抑制活性氧的產(chǎn)生,在過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞中,大黃酸以劑量依賴性的方式顯著減少細胞中BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(BID)、Caspase-3、半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)和Caspase-9的mRNA表達,減少細胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生,從而逆轉(zhuǎn)H2O2引起的細胞損傷[32-33]。由此可以推測,三黃瀉心湯在治療膿毒癥心功能障礙方面,可能主要通過這些有效成分發(fā)揮調(diào)控炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細胞凋亡等的重要治療作用。

本研究發(fā)現(xiàn),三黃瀉心湯治療膿毒癥心功能障礙的潛在作用靶點集中在MAPK3、TNF、IL-1β、MMP9等。蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)其核心靶點為MAPK3、TNF、ALB。TNF-α、IL-1β是膿毒癥發(fā)生時重要的促炎因子,其主要是由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生,具有抑制心肌功能的作用[34-36]。TNF-α作為凋亡的啟動介質(zhì),通過激活線粒體膜上促凋亡因子(Bax)促凋亡蛋白家族,導(dǎo)致心肌細胞凋亡[37]。IL-1β可濃度依賴性抑制心肌收縮,與TNF-α協(xié)同在低濃度即可抑制心肌收縮,同時可誘導(dǎo)一氧化氮等因子產(chǎn)生[38-39]。誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶編碼誘導(dǎo)型一氧化氮抑制線粒體功能,引起氧化應(yīng)激、心肌組織代謝性缺氧,收縮功能障礙[40]。一氧化氮合成酶參與心肌梗死、心力衰竭等心肌損傷[41]。MAPK家族蛋白可被上游激酶磷酸化,從而活化下游因子,發(fā)揮調(diào)節(jié)細胞增殖、分化及死亡的作用[42]。其中MAPK3已被證明在心肌細胞凋亡中起保護作用[43]。Tomita等[44]研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)毒素顯著增加心臟成纖維細胞中TNF-α和MMP9的表達,廣譜MMP抑制劑治療可減輕膿毒癥期間的心臟纖維化和心功能不全等,可見心肌細胞纖維化所致的心臟重構(gòu)也是膿毒癥心功能障礙發(fā)病環(huán)節(jié)之一。綜上所述,三黃瀉心湯通過調(diào)控相關(guān)靶點來治療膿毒癥心功能障礙,這些靶點主要涉及炎癥反應(yīng)、心肌凋亡、纖維化等調(diào)控。

從GO功能富集分析和KEGG通路富集分析結(jié)果可見,三黃瀉心湯治療膿毒癥心功能障礙涉及的生物過程主要有信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控、凋亡過程、蛋白磷酸化、炎癥反應(yīng)、凋亡過程的負調(diào)控等,其中靶點主要富集在PI3K/Akt信號通路、TNF信號通路、MAPK信號通路及HIF-1信號通路等。PI3K/Akt信號通路是機體重要信號通路,磷酸化過程中產(chǎn)生轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白,可調(diào)節(jié)心肌細胞生物活性[45]。以往研究表明,PI3K/Akt能夠抑制線粒體凋亡,降低Bax活性,從而減少細胞凋亡,改善病情[46]。PI3K是其信號通路的起始因子,可被多種生長因子激活,在質(zhì)膜上產(chǎn)生第二信使分子肌醇三磷酸,并與細胞內(nèi)含有PH結(jié)構(gòu)域的信號蛋白Akt和3-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1結(jié)合,促進Akt的磷酸化激活[47]。Akt是PI3K下游信號通路中的重要蛋白,被PI3K激活后,能磷酸化激活其下游雷帕霉素靶蛋白(mTOR),參與細胞生長、存活的調(diào)節(jié)[48]。其可直接作用于自噬相關(guān)基因(Atg)調(diào)節(jié)自噬體的形成[49]。MAPK信號通路是細胞增殖、應(yīng)激、炎癥、分化、轉(zhuǎn)化、凋亡等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的共同交會通路之一[50]。研究發(fā)現(xiàn),TNF信號通路與炎癥、細胞凋亡密切相關(guān)[51]。綜上所述,三黃瀉心湯通過調(diào)控這些信號通路對膿毒癥心功能障礙發(fā)揮抗炎、調(diào)控細胞凋亡和自噬及減輕氧化應(yīng)激損傷等潛在治療作用。

綜上所述,基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果顯示,三黃瀉心湯中大黃酸、大黃素、黃芩素、大黃酚、蘆薈大黃素等有效成分可能通過TNF、MAPK1、MAPK8、IL-1β、MMP9、MYC、STAT3、ICAM1等關(guān)鍵靶點,調(diào)控PI3K/Akt通路、TNF通路、MAPK通路及HIF-1通路等,發(fā)揮抗炎、抑制心肌細胞凋亡、調(diào)控自噬、減輕氧化應(yīng)激損傷等作用,為三黃瀉心湯治療膿毒癥心功能障礙的進一步臨床和基礎(chǔ)研究提供了依據(jù)和新的思路。