溫天文，巫 軍，袁學(xué)軍，肖大偉，刁 勇，張旭雯

（1.江蘇科興諾生物技術(shù)有限公司，江蘇 泰州 225300；2.南京為綠生物科技有限公司，江蘇 南京 210032；3.南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)高新醫(yī)院醫(yī)學(xué)臨床中心，江蘇 南京 210032；4.華僑大學(xué)醫(yī)學(xué)院，福建 泉州 362021）

自2019 年新型冠狀病毒肺炎［COVID-19，簡稱新冠肺炎（現(xiàn)已統(tǒng)稱新冠病毒感染，下文同）］疫情發(fā)生以來，全球累計確診病例超6 億例，累計死亡病例超650 萬例。隨著各國多種新冠疫苗用于臨床，該病的重癥率和死亡率大幅降低［1］。然而，一方面，全球新冠病毒感染人群基數(shù)依然很大，尤其是境外感染人員的輸入及癥狀感染者的大量存在，給境內(nèi)新冠疫情防控帶來了極大隱患和挑戰(zhàn)；另一方面，在目前對新冠病毒變異情況、感染者病程潛在發(fā)展情況等不確定及無特效藥的情況下，新冠疫情防控工作仍不可松懈。同時，新冠病毒不斷變異［2-3］，尤其是Omicron 變種的傳播極快，傳染性極強，而各國防疫限制的不斷放開，加緊了我國新冠防控形勢，也大幅加重了新冠肺炎感染檢測任務(wù)。目前，核酸檢測仍是COVID-19 確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”［4］，但檢測時間較長，對儀器設(shè)備條件及人員要求較高，常不能滿足基數(shù)較大人群的檢測需求，也大量占據(jù)了醫(yī)務(wù)人員、醫(yī)療物資、醫(yī)療職能等資源。基于上述情況，結(jié)合對新冠病毒、COVID-19、新冠病毒傳染流行病學(xué)的不斷深入研究及專家共識［5］，逐步推行抗原/抗體檢測方法是對目前檢測方法必要的輔助與補充。截至本文撰寫時，我國批準(zhǔn)的新冠病毒抗原/抗體檢測試劑產(chǎn)品廠家已有20 多家，但有關(guān)該檢測管控的防疫相關(guān)文獻(xiàn)報道較少。在此，嘗試構(gòu)建該領(lǐng)域全過程閉環(huán)管控體系，以確保新冠病毒抗原/ 抗體檢測工作高效、有序地開展。

1 核酸檢測與抗原/抗體檢測對比分析

1.1 檢測原理

核酸檢測：最常采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法檢測新冠病毒特異序列［6-7］，可將新冠病毒核糖核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為脫氧核糖核酸（DNA）。在PCR 反應(yīng)體系中，包含1 對特異性引物及1 個Taqman探針（其為1 段特異性寡核苷酸序列，兩端分別標(biāo)記報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)）。探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；當(dāng)存在靶序列時，探針與模板結(jié)合，DNA 聚合酶利用其外切酶活性沿模板將探針酶切降解，使報告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離，發(fā)出熒光。每擴增一條DNA 鏈，就有一個熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR 儀能監(jiān)測出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)（4～6 h出結(jié)果），病毒核酸濃度越高，該值越小。

抗原/抗體檢測原理：通常采用膠體金法/熒光免疫層析法。將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標(biāo)記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待檢樣本滴加到試紙條一端的樣本墊上后，通過毛細(xì)作用向前移動，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑并相互反應(yīng)，再移動至固定的抗原或抗體區(qū)域時，待檢物與膠體金標(biāo)記試劑的結(jié)合物又與之特異性結(jié)合而被截留，聚集在檢測帶上，一般約等待15 min 即可通過肉眼觀察到定性顯色結(jié)果或通過配套熒光免疫分析儀進(jìn)行定量檢測的結(jié)果。

可見，前者能將極微量的病毒經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行倍量擴增，且為直接檢測病毒RNA，檢測結(jié)果特異性（陽性檢出準(zhǔn)確率接近100%）、靈敏度、可靠性更高，為確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”；后者需抗原/ 抗體達(dá)一定濃度方可檢出，且為間接檢測病毒RNA 表面的抗原蛋白或相應(yīng)抗體，檢測結(jié)果受病毒濃度、試劑組成成分差異性、取樣、加樣、時間、環(huán)境等因素影響，存在一定的假陽性/假陰性（發(fā)生率1%～5%），靈敏度較低，可作為病毒感染的輔助篩查措施。

1.2 流通與應(yīng)用

試劑流通與管控：核酸檢測產(chǎn)品的采購與使用均在特定機構(gòu)或單位部門由專人完成處理，其采購數(shù)量、使用數(shù)量、剩余量能得到有效監(jiān)控；新冠病毒抗原/抗體檢測產(chǎn)品本身涉及生物源性物質(zhì)，雖具有一定管控要求，但其流通涉及單位、團(tuán)隊、個人，其采購數(shù)量、使用數(shù)量、剩余數(shù)量均不可控，不確定性較大。

檢測條件與環(huán)境：核酸檢測在PCR 實驗室標(biāo)準(zhǔn)條件與環(huán)境內(nèi)完成；新冠病毒抗原/抗體檢測可在一般室溫環(huán)境（居家、交通卡口等）下完成，檢測產(chǎn)品本身對溫濕度有要求，而一般開放性環(huán)境下，不僅溫濕度差異較大，且開袋后時長也對結(jié)果有一定影響。此外，兩者采樣操作是否規(guī)范也會影響檢測結(jié)果。

適用人群：核酸檢測適用于所有人群；新冠病毒抗原/ 抗體產(chǎn)品應(yīng)先區(qū)分非檢測與檢測產(chǎn)品，并根據(jù)不同適用人群（密接者、次密接者）先用不同樣本類型進(jìn)行適配。

檢測及采樣：核酸檢測全過程由專業(yè)人員完成，較規(guī)范、統(tǒng)一；抗原/抗體檢測更多由非專業(yè)人員自行檢測完成，在檢測操作、采樣操作方面存在較大的個體差異及不確定因素［8-9］。

1.3 結(jié)果報告與管控

報告與判定：核酸檢測報告由檢測部門統(tǒng)一、規(guī)范、定時上報對接系統(tǒng)，且對報告的真實性有職業(yè)規(guī)范和責(zé)任感約束，并對檢測結(jié)果報告與判定進(jìn)行簽字負(fù)責(zé)；抗原/抗體檢測結(jié)果的報告與判定，則具有不確定性、隨意性、不及時性、分散性。

廢品處理：核酸檢測后廢棄物統(tǒng)一回收處理，抗原/抗體檢測廢棄物因分為陽性結(jié)果、陰性結(jié)果、無效結(jié)果，以及失效產(chǎn)品的廢棄物，且分散到各場所及個人，為陽性廢棄物的管控增加了不確定性和難度，同時，大量使用抗原/抗體檢測產(chǎn)品必然導(dǎo)致醫(yī)療廢棄垃圾大量產(chǎn)生。

數(shù)據(jù)結(jié)果管理：核酸檢測可實現(xiàn)各份檢測結(jié)果數(shù)據(jù)統(tǒng)一、及時、定期匯總對接相關(guān)部門系統(tǒng)管理［10］；抗原/ 抗體檢測結(jié)果分散到個人，結(jié)果管控存在不確定性，上傳存在不定時性。

2 抗原/抗體檢測閉環(huán)管控體系構(gòu)建

2.1 閉環(huán)管控體系構(gòu)建流程

針對以上兩種檢測方法的特點與區(qū)別，從產(chǎn)品、場所、人員、檢測、監(jiān)管等方面分析抗原/抗體檢測閉環(huán)管控的科學(xué)、合理、可行性措施，以此構(gòu)建抗原/抗體檢測產(chǎn)品閉環(huán)管控體系［11-14］，詳見圖1（UDI 為賦予的唯一識別碼）。

圖1 抗原/抗體檢測全過程閉環(huán)管控（PSURRDT）體系Fig.1 Schematic diagram of closed-loop overall process management and control（PSURRDT）system for antigen / antibody detection

2.2 具體措施

2.2.1 UDI 賦碼管理

試劑來源與管控，除生產(chǎn)廠家對原料來源按生物源性物質(zhì)相關(guān)規(guī)定管控外，生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的抗原/抗體檢測試劑產(chǎn)品應(yīng)按《醫(yī)療器械唯一標(biāo)識系統(tǒng)試點工作方案》管理規(guī)定實施生產(chǎn)［15］，對每一個最小單元抗原/抗體檢測試劑產(chǎn)品賦UDI后才可出廠銷售。使每個檢測試劑產(chǎn)品可追溯流通全過程，直至銷售到個人。同時，多個最小單元整體包裝均賦該包裝內(nèi)所有最小單元唯一識別碼，整箱包裝單元，以此類推。如為未賦碼銷售，可能導(dǎo)致檢測試劑流通及使用過程的不可控。

2.2.2 分情況逐步實施

可按不同風(fēng)險等級區(qū)、交通檢驗口、出入境檢查口、人群密集或聚集場所實施開展。既可建立檢測數(shù)據(jù)，又可在先行實施區(qū)域積累經(jīng)驗，不斷完善檢測過程（包括檢測方法、相關(guān)制度規(guī)定等），建立科學(xué)、可行的實踐基礎(chǔ)與提供依據(jù)，便于進(jìn)一步推廣。對于治療期間確診患者、定點隔離人員、居家隔離人員、特定崗位及區(qū)域人員、防疫人員、檢測人員等，新冠病毒感染、發(fā)病、治療、治愈過程中體內(nèi)病毒抗原/抗體不斷發(fā)生變化，不同時期不同階段人員檢測時增加抗原/抗體檢測作為補充，可及時便捷了解病程基本情況，尤其是定量檢測診斷試劑，更可較準(zhǔn)確了解情況，基本滿足在特定區(qū)域、特定時間范圍內(nèi)對檢測人員的監(jiān)測要求，也大幅減小了醫(yī)務(wù)人員工作量。同時，也為進(jìn)一步開放性推廣建立基礎(chǔ)和提供依據(jù)。

2.2.3 詳細(xì)簡明編寫說明書

說明書文字需簡明、通俗，步驟清晰，并配以操作流程與步驟示意圖，可增加二維碼安裝下載操作視頻。檢測產(chǎn)品說明書的內(nèi)容、格式、語言文字等需區(qū)別于非檢測產(chǎn)品，適用于大眾閱讀與理解。注意事項部分，增加提示掃描與關(guān)聯(lián)及檢測注意細(xì)節(jié)（盡量保持室溫、確保開袋后多長時間內(nèi)使用等），警示結(jié)果一旦陽性，主動聯(lián)系社區(qū)報備，并將檢測廢棄物專門包裝、于指定點回收。明確適用樣本類型、明確適用不同人群對象和場所所應(yīng)注意事項和特定要求。提供專門的咨詢電話等聯(lián)系方式。

2.2.4 相關(guān)管控

規(guī)格設(shè)計：建議當(dāng)以家庭為單位時，單盒少則配2～3 人份，多則配10～12 人份；用于員工數(shù)超過10 人的企事業(yè)單位、集體，單盒配備數(shù)量不宜少于20 人份。以此避免過度浪費，也便于產(chǎn)品使用跟蹤管理，以及增加購買依從性。同時便于第1次檢測出現(xiàn)陽性結(jié)果時再進(jìn)行1～2次檢測復(fù)核。

組分與材質(zhì)選擇：建議采用復(fù)合鋁膜包裝，保證產(chǎn)品儲存密封性，每個最小單元檢測試劑條和采樣棒（拭子）均單獨包裝；應(yīng)配套較齊全的輔助工具或器材，必要時對其賦予與檢測試劑產(chǎn)品一一對應(yīng)的UDI。

檢測與報告：基于檢測試劑UDI與個人身份證相關(guān)聯(lián)，檢測結(jié)果與衛(wèi)健委等相關(guān)部門對接，與相關(guān)防疫措施工具對接，跟蹤銷售流通的檢測試劑。建立檢測數(shù)據(jù)庫，對數(shù)據(jù)庫設(shè)立檢測結(jié)果上報自動警報功能，定期統(tǒng)計檢測結(jié)果并分析，為疫情應(yīng)急防控監(jiān)測系統(tǒng)收集必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)［9-12］。

跟蹤回訪：基于報告數(shù)據(jù)，有關(guān)部門不定期對購買及使用數(shù)量、檢測情況、報告情況、廢品處理情況進(jìn)行跟蹤流調(diào)。并收集存在的問題或困難，以便不斷完善相關(guān)管控，以及設(shè)立對檢測過程中遇到問題的答疑或咨詢相關(guān)平臺。

報廢回收：分區(qū)定點回收處可以小區(qū)、生產(chǎn)隊、街道、片區(qū)等為單位，由專人負(fù)責(zé)，根據(jù)報告數(shù)據(jù)庫進(jìn)行精準(zhǔn)跟蹤。對于在效期內(nèi)未使用檢測試劑建庫跟蹤［16］及過期檢測試劑自行失效，以日常垃圾處理，或定點回收?；虿捎?4消毒液等有效消毒劑集中處理，并上報處理結(jié)果。

流程宣講：根據(jù)產(chǎn)品應(yīng)用情況，分區(qū)域、街道、社區(qū)、單位，集中組織有關(guān)專業(yè)人員指導(dǎo)講解檢測程序、注意事項，并貫徹抗原/抗體檢測相關(guān)政策法規(guī)。

3 討論

根據(jù)國際疫情形勢與我國國情，目前完全放開管控為時尚早，有必要在產(chǎn)品生產(chǎn)、流通、使用、報告、回收處理、數(shù)據(jù)庫管理、跟蹤溯源等環(huán)節(jié)，構(gòu)建科學(xué)、有效、可行的抗原/抗體檢測長效全過程閉環(huán)管控體系，分區(qū)、分類逐步推廣且實行［17］。進(jìn)一步促進(jìn)防疫抗疫長效機制的建立與完善，以及產(chǎn)品創(chuàng)新研發(fā)與應(yīng)用。

國內(nèi)外新冠病毒檢測產(chǎn)品與技術(shù)存在一定差異［18］，就檢測方法而言，其過程控制對檢測十分關(guān)鍵［19-21］，抗原檢測與抗體檢測仍存在產(chǎn)品組成成分、樣本類型、檢測方法（乳膠法、膠體金法、熒光免疫層析法等）等方面的差異，比核酸檢測影響因素干擾更大。因此，應(yīng)用場景及適用人群也存在一定差異，在抗原/抗體檢測全過程閉環(huán)管控體系下，可研發(fā)更安全、有效、便捷的檢測產(chǎn)品。不同檢測方法、不同檢測樣本的檢測產(chǎn)品，應(yīng)有序、分區(qū)、分步推廣，尤其對于面向大眾的檢測產(chǎn)品，不宜在同一時間窗內(nèi)推行多種方法、多種檢測樣本的產(chǎn)品，抗體檢測相對抗原檢測受限因素更多。目前，抗原檢測比抗體檢測更適合先推行，并且檢測產(chǎn)品應(yīng)開展更廣泛、深入、全面的干擾因素試驗，不斷提高檢測產(chǎn)品的質(zhì)量和可應(yīng)用性。

國外許多國家與地區(qū)抗原檢測完全放開，但未建立檢測閉環(huán)管控體系，而是自行、自由、自主檢測，存在數(shù)據(jù)結(jié)果混亂、感染與交叉感染風(fēng)險增加等問題。由于文化和體制差異，建立抗原/抗體檢測全過程閉環(huán)管控體系未必在這些國家和地區(qū)具有可行性。也有些通過唾液居家采樣，然后送樣到指定實驗室進(jìn)行檢測［22］。

抗原/ 抗體檢測結(jié)果上報需基于構(gòu)建的抗原/ 抗體檢測閉環(huán)管控體系，尤其適用于抗原/ 抗體居家自測、特定場所檢測，可起到可追溯、預(yù)警、可控效果。與此同時，也需更多部門的協(xié)作，未來將會有更人性化、智能化配套的數(shù)據(jù)工具、計算機工具用于抗原/抗體檢測全過程閉環(huán)管控中，進(jìn)一步提升管控質(zhì)量及效果。