白耀國,劉吉山
(1.山東省濱州市沾化區(qū)畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心,山東 濱州 256600;2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東 濱州)
牛傳染性鼻氣管炎病是由牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)引發(fā)的一種接觸性傳染病。IBRV可導(dǎo)致潛伏性感染,被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為 B類疫病,在我國是進(jìn)出口檢疫中的必須檢疫疾病之一[1-2]。牛傳染性鼻氣管炎沒有嚴(yán)格的季節(jié)性發(fā)病規(guī)律,一年四季均可發(fā)病,在秋冬季節(jié),牛群聚集,疾病發(fā)生率較高。本文從牛傳染性鼻氣管炎病的流行概況、綜合防治等方面進(jìn)行綜合闡述,以期對基層從業(yè)者診斷和防治該病提供理論支持。
IBRV屬于皰疹病毒科 α皰疹病毒亞科,病毒粒子呈多形性,直徑約為 150~200 nm[3-4],由囊膜、衣殼和核心三部分組成。該病毒對堿性有較強(qiáng)適應(yīng)力[5],在 pH6~9區(qū)間范圍穩(wěn)定存在;不耐酸,在 pH4.5~5區(qū)間范圍不穩(wěn)定,很難存活。在高溫條件下很難存活,在寒冷潮濕環(huán)境下,則有較高適應(yīng)力。IBRV主要感染牛,肉牛是易感動物,奶牛也易得。
該病主要通過接觸性傳播,病牛和隱形感染帶毒牛是主要傳染源。呼吸道是病毒首先感染的區(qū)域,病毒粒子首先與附著在細(xì)胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖融合[6],后病毒衣殼在附著和穿透宿主細(xì)胞膜后進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)[7-8]。核衣殼通過微管導(dǎo)入核膜,然后病毒 DNA釋放到細(xì)胞核中[9]。牛傳染性鼻氣管炎可引起免疫抑制,令機(jī)體抵抗力降低,從而繼發(fā)感染細(xì)菌性疾病,最終導(dǎo)致機(jī)體死亡。研究顯示,IBRV在感染細(xì)胞后的主要生存機(jī)制是在體內(nèi)潛伏感染,IBRV病毒首先會侵襲到神經(jīng)組織上它隨著神經(jīng)細(xì)胞的 DNA復(fù)制而復(fù)制,從而造成病毒在體內(nèi)長期潛伏感染的狀態(tài)[4]。牛感染 IBRV后,臨床主要表現(xiàn)結(jié)膜炎型、呼吸道型、流產(chǎn)型、生殖道型以及腦膜炎型[10-11]。其中,對于腦膜炎型 IBRV通過三叉神經(jīng)通路到達(dá)神經(jīng)系統(tǒng),感染犢牛的典型神經(jīng)癥狀包括肢體不協(xié)調(diào)、盤旋、眼球震顫、磨牙、重復(fù)感染和最終死亡。
診斷該病最經(jīng)典的方法是中和試驗(yàn),在國際貿(mào)易和在我國動物檢疫中適用該法作為檢測該病的方法之一[12]。該法是用已知病毒與待檢血清中的中和抗體結(jié)合,基礎(chǔ)是測定病毒感染力,依據(jù)是免疫血清中和后的殘存感染力。中和試驗(yàn)由于操作過程較復(fù)雜,實(shí)際需要時間較長,并且在檢測過程中容易受到如細(xì)胞污染等因素的影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,所以目前該方法正逐漸被酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)所替代。
該法需要根據(jù)患病牛的臨床癥狀和解剖情況,采集相應(yīng)被感染的器官病料,然后用牛源細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行病毒分離,實(shí)驗(yàn)室常選用牛腎傳代細(xì)胞進(jìn)行接種,一般經(jīng)過 3~5 d的培養(yǎng)后,根據(jù)病毒的致細(xì)胞病變作用(CPE)作為直接觀察指標(biāo)。比較典型的細(xì)胞病變是細(xì)胞呈現(xiàn)圓縮、葡萄狀聚集并有空洞出現(xiàn)等。
該法利用酶原抗體特異性吸附于固相載體上的抗體,添加底物后,在酶原抗體酶活性的作用下形成有色產(chǎn)物,然后根據(jù)相應(yīng)顏色變化進(jìn)行判定。與中和試驗(yàn)相比,ELISA操作簡潔、快速,并且特異性和敏感性更高,非常適合對牛傳染性鼻氣管炎病毒進(jìn)行檢測。
該法主要包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和熒光定量PCR檢測技術(shù),通過設(shè)計(jì)溫度梯度和各種酶的參與,對目標(biāo)基因片段在體外進(jìn)行快速擴(kuò)增,然后根據(jù)擴(kuò)增結(jié)果與已知病毒基因進(jìn)行比對,從而得出檢測結(jié)果。核酸檢測技術(shù)相比較于其他病原學(xué)檢測方法和血清學(xué)檢測方法。具有高特異性、高敏感性以及結(jié)果快速的特點(diǎn),因此,在實(shí)驗(yàn)室診斷牛傳染性鼻氣管炎病毒上已經(jīng)被廣泛應(yīng)用。
本病屬于病毒性疾病,目前沒有特效藥物對患病牛進(jìn)行治療。臨床上主要采取增強(qiáng)牛自身抵抗力,防治繼發(fā)感染和控制死亡率的方法促進(jìn)牛只自身恢復(fù)健康。臨床多采用中西醫(yī)結(jié)合的方法對患病牛進(jìn)行救治,西醫(yī)主要采用抗生素防治繼發(fā)感染,中醫(yī)則通過調(diào)節(jié)機(jī)體代謝,排泄熱毒的方式幫助牛只恢復(fù),如升麻、桔梗、升載等中草藥能夠調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,提高牛只抗病能力,達(dá)到抑制邪氣、扶正陽氣的目的[13-14]。
為了更好的預(yù)防本病的發(fā)生,牛場嚴(yán)格采取的“自繁自育、全進(jìn)全出”的飼養(yǎng)方式是很好的選擇。在引種或者引入凍精過程中,必須對引入地進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)恼{(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測,確保引入地?zé)o該病發(fā)生,且引入牛場后必須再次經(jīng)過嚴(yán)格的病原學(xué)診斷,確保健康無病后才能進(jìn)行混群或使用。牛舍、飼養(yǎng)環(huán)境以及舍內(nèi)工具務(wù)必做到定期消毒,避免發(fā)生應(yīng)激現(xiàn)象引起的牛群抵抗力降低,提供優(yōu)質(zhì)飼料,提高牛群抗病力。