魏述亮,聶 婧,宋 揚(yáng)
(山東裕城生物技術(shù)有限公司,山東 濟(jì)南 250218)
奶牛乳房炎也稱奶牛乳腺炎,主要由病原微生物感染引起奶牛乳房或全身的炎癥反應(yīng),是奶牛生產(chǎn)中常見病的一種,嚴(yán)重制約著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展[1]。該病主要導(dǎo)致奶牛產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)量的下降,損害養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益,對(duì)我國(guó)奶牛養(yǎng)殖和奶牛生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的影響。
臨床型乳房炎癥狀明顯,一般情況下,其癥狀可作為臨床診斷的主要依據(jù)?;疾∧膛6嗑癫徽瘢秤麥p退或廢絕,乳區(qū)紅、腫、熱、痛,產(chǎn)奶量下降,乳汁分泌不暢,混有凝塊或絮狀物等。據(jù)其臨床癥狀的不同,可將臨床型奶牛乳房炎分為3 個(gè)等級(jí)[2]:(1)急性乳房炎。發(fā)病迅速,病情嚴(yán)重可危及生命,多數(shù)病牛愈后產(chǎn)奶量下降,乳區(qū)可見明顯的器質(zhì)遺留和機(jī)能障礙。患病奶牛呼吸急促,心跳加快,精神沉郁不愿行動(dòng),食欲減少或廢絕,體溫常升高至40℃以上。臨床可見病牛乳區(qū)急性腫脹,皮膚發(fā)紺甚至裂口,觸診疼痛有熱感,整個(gè)乳區(qū)質(zhì)地堅(jiān)實(shí),擠不出奶或僅有少量黃色水樣液體流出。(2)亞急性乳房炎。無(wú)明顯全身癥狀,病牛及時(shí)治療預(yù)后良好,基本不影響產(chǎn)奶量。臨床可見乳區(qū)紅腫,觸摸發(fā)熱有硬塊,產(chǎn)灰白色混有凝乳塊的乳汁。(3)慢性乳房炎。多由急性或亞急性乳房炎轉(zhuǎn)化而來(lái)。病牛生產(chǎn)性能下降,臨床呈持續(xù)感染的狀態(tài),常反復(fù)發(fā)作,是危險(xiǎn)的潛在傳染源。
隱性乳房炎臨床癥狀不明顯,可致患病奶牛產(chǎn)奶量下降,乳質(zhì)降低。該病的發(fā)病率約為臨床型乳房炎的15~40 倍,發(fā)病率較高,可導(dǎo)致我國(guó)每年的產(chǎn)奶量下降10 % ~ 40 %,對(duì)牛奶的生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的影響。隱性乳房炎只能通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)法進(jìn)行診斷,主要方法有:體細(xì)胞計(jì)數(shù)法(CMT 法、PL 法、LMT 法、HMT 法和BMT法)、乳汁電導(dǎo)率檢測(cè)法、乳汁pH 值檢驗(yàn)法和乳汁微生物檢測(cè)法等,可對(duì)隱性乳房炎進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷[3]。
1.2.1 體細(xì)胞計(jì)數(shù)法 體細(xì)胞計(jì)數(shù)(Somatic Cell Count,SCC)是診斷奶牛乳房炎的一種重要參考指標(biāo),目前廣泛用于評(píng)價(jià)奶牛的乳區(qū)狀態(tài)和基本健康狀況。正常情況下,牛奶中體細(xì)胞數(shù)小于50萬(wàn)個(gè)/ ml,其中白細(xì)胞占98 % ~ 99 %[4]。奶牛患乳房炎時(shí),機(jī)體分泌大量白細(xì)胞進(jìn)入乳房以清除感染,乳汁中體細(xì)胞數(shù)將超過(guò)50 萬(wàn)個(gè)/ml,同時(shí)產(chǎn)奶量下降。臨床上常用的SCC 主要分為直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法兩種:直接計(jì)數(shù)法通過(guò)顯微鏡對(duì)鮮乳涂片進(jìn)行直接計(jì)數(shù),操作簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確度較高,常用于校正其他方法的準(zhǔn)確性,是檢測(cè)牛奶中SCC 的標(biāo)準(zhǔn)方法;間接計(jì)數(shù)法是利用CMT 試液使乳汁中體細(xì)胞的脂類物質(zhì)乳化,進(jìn)而使細(xì)胞破裂釋放DNA,通過(guò)乳汁產(chǎn)生沉淀或凝塊的程度,間接判定乳汁中的體細(xì)胞數(shù)。
1.2.2 乳汁電導(dǎo)率檢測(cè) 檢測(cè)乳汁導(dǎo)電率即根據(jù)乳汁成分變化致使導(dǎo)電性能改變的原理對(duì)乳房炎進(jìn)行診斷,是目前國(guó)內(nèi)外較好的診斷方法之一。奶牛乳房發(fā)炎時(shí),乳汁中Na+、Cl-的水平顯著升高,導(dǎo)電率變化明顯,可作為乳房炎癥的診斷依據(jù)。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,最早由新西蘭科學(xué)家發(fā)明了FGH 導(dǎo)電診斷儀,該儀器檢出率較低,判定標(biāo)準(zhǔn)僅有一個(gè)溫度條件,在實(shí)際應(yīng)用中易受環(huán)境溫度的影響。由我國(guó)山西農(nóng)業(yè)大學(xué)郝慶銘教授研發(fā)的SX-1 型奶牛乳房炎診斷儀,能夠初步檢測(cè)乳汁中的營(yíng)養(yǎng)成分,區(qū)分健康、可疑、輕度感染、中度感染和重度感染的乳汁[5]。此外,西北農(nóng)林科技大學(xué)也研制出一款小型XND-A 便攜檢測(cè)儀,能夠快速有效地對(duì)乳房炎乳、酸敗乳和摻假乳進(jìn)行綜合檢測(cè)。
1.2.3 乳汁pH 檢驗(yàn)法 研究表明,健康奶牛產(chǎn)鮮牛乳的pH 為6.2~6.6,乳房炎乳汁pH 呈堿性,其堿性高低與炎癥的輕重程度正向相關(guān)[6]。因此,可通過(guò)檢測(cè)乳汁pH 間接診斷乳房炎癥的情況,該方法主要包括:溴麝香草酚藍(lán)(BTB)法、試紙法和酸度計(jì)檢驗(yàn)法。
1.2.4 PCR 檢測(cè)方法 某些地區(qū)需定期對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)所有奶牛乳汁中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),檢測(cè)乳汁中微生物的種類與數(shù)量。但該方法具有操作繁瑣、誤差較大和技術(shù)要求高等缺點(diǎn),難以大范圍推廣。Phuektes 等[7]建立了一種以16S-23S rDNA 為擴(kuò)增靶序列的多重PCR 檢測(cè)方法,該方法特異性較高,操作簡(jiǎn)便迅速,能夠有效鑒別奶牛乳房炎的病原菌類型。
1.2.5 其它診斷方法 宋宣明和艾曉杰等[8]于1990 年建立了牛乳清電泳診斷隱性乳房炎的方法:將乳清蛋白作為一個(gè)較為穩(wěn)定的檢測(cè)指標(biāo),根據(jù)乳清電泳圖譜的變化,準(zhǔn)確直觀地反應(yīng)乳房炎癥的情況。此外,賀婷[9]采用新型的環(huán)介導(dǎo)等溫體外核酸擴(kuò)增技術(shù)(LAMP),建立了鏈球菌性奶牛乳房炎的可視化LAMP 檢測(cè)方法,該方法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便和成本低等優(yōu)點(diǎn),在奶牛乳房炎鏈球菌的檢測(cè)和診斷方面具有較好的應(yīng)用價(jià)值。王娟[10]以刃天青鈉作為指示劑,在MQQ大腸桿菌選擇培養(yǎng)基上建立了大腸桿菌性奶牛乳房炎的診斷方法,該方法能夠?qū)Υ竽c桿菌單獨(dú)感染與混合感染進(jìn)行鑒別診斷,檢測(cè)周期短,具有較好的實(shí)用性。
2.1.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 據(jù)奶牛泌乳期、產(chǎn)奶量及生產(chǎn)階段的不同,合理搭配營(yíng)養(yǎng)飼料:補(bǔ)充充足的β-胡蘿卜素、維生素及各種微量元素,特別注意保證硒、鋅和鈣的供應(yīng),預(yù)防代謝病的發(fā)生。避免過(guò)量飼喂和飼料變質(zhì),特別是非蛋白氮和濃縮料的飼喂。此外,應(yīng)定期對(duì)牛舍環(huán)境進(jìn)行消毒,及時(shí)更換墊料,保證墊料干燥清潔,運(yùn)動(dòng)場(chǎng)干凈衛(wèi)生。加強(qiáng)養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)管理,確保場(chǎng)內(nèi)通風(fēng)良好,飼養(yǎng)密度合理,可通過(guò)使用VC制劑減緩牛群應(yīng)激。場(chǎng)內(nèi)奶牛引進(jìn)時(shí),應(yīng)首先查閱相關(guān)檔案資料,及時(shí)剔除感染及疑似感染的牛只,從源頭上消滅傳染源。此外,還需對(duì)不滿足飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的牛只進(jìn)行淘汰:患重度乳房炎或反復(fù)患病的牛只應(yīng)及時(shí)淘汰;乳頭損傷無(wú)法治愈的牛只應(yīng)淘汰;整個(gè)泌乳期中,體細(xì)胞水平一直較高的牛只也應(yīng)淘汰。
2.1.2 注意擠奶衛(wèi)生 奶牛乳房炎產(chǎn)生的原因是乳頭接觸了具有傳染性的病原微生物,在進(jìn)行擠奶作業(yè)時(shí),應(yīng)養(yǎng)成清潔的擠奶習(xí)慣以預(yù)防不同乳頭和牛只間的傳染,有效避免病原微生物在場(chǎng)內(nèi)的傳播。工作人員應(yīng)按操作規(guī)程進(jìn)行嚴(yán)格的擠奶操作,擠奶前應(yīng)用干凈的熱水對(duì)乳房進(jìn)行徹底的清洗,定期消毒擠奶設(shè)備和擦拭毛巾等,有效預(yù)防環(huán)境性乳房炎的發(fā)生。擠奶人員還應(yīng)保護(hù)好奶牛乳頭,防止奶牛乳頭受到任何的機(jī)械損傷等。此外,堅(jiān)持定期的乳頭藥浴可使接觸性感染的可能性大大降低。
2.2.1 抗生素類藥物治療 迄今為止,抗生素治療作為奶牛乳房炎的一種有效治療手段,特別是在急性、隱性和多發(fā)性乳房炎治療和乳制品質(zhì)量控制等方面,仍具有重要的價(jià)值。目前,治療奶牛乳房炎的抗生素藥物主要包括磺胺類藥物、四環(huán)素、紅霉素、氯霉素、青霉素、卡那霉素和鏈霉素等[11]。但由于抗生素藥物的不合理使用,耐藥菌株逐漸增多,細(xì)菌對(duì)抗生素的耐藥性越來(lái)越強(qiáng),給奶牛乳房炎的治療帶來(lái)很大困難。此外,抗生素殘留問題也同樣非常嚴(yán)重。殘留在環(huán)境中的抗生素除引起細(xì)菌耐藥性外,還會(huì)使飲用者產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng),甚至死亡;有些抗生素及其代謝產(chǎn)物尚有較強(qiáng)的毒性,嚴(yán)重影響消費(fèi)者的健康[12]。所以,應(yīng)積極開發(fā)藥源廣泛、抗菌作用強(qiáng)、毒副作用小、無(wú)藥物殘留的制劑來(lái)替代傳統(tǒng)抗生素療法,保障奶牛養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展和消費(fèi)者安全。
2.2.2 中藥治療 中藥自古以來(lái)是我國(guó)的重要資源和瑰寶,具有抗菌、抗炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化和抗應(yīng)激等多種藥理活性,還具有來(lái)源廣、價(jià)格低、不產(chǎn)生耐藥性、無(wú)藥殘等多種優(yōu)點(diǎn),如在奶牛日糧中添加蒲公英、連翹、黃芩和黃芪等中藥,或向日糧中添加蒲公英散等中藥復(fù)方制劑均可對(duì)奶牛乳房炎具有明顯的治療作用。
2.2.3 中西醫(yī)結(jié)合治療 目前,獸醫(yī)人員普遍使用中西結(jié)合的方法對(duì)奶牛乳房炎進(jìn)行治療。雖然抗生素存在誘導(dǎo)細(xì)菌耐藥性和藥物殘留等問題,但由于中草藥的抗感染能力與其相差甚遠(yuǎn),所以一些急癥病例和重度感染的情況仍需要使用抗生素來(lái)進(jìn)行治療。因此,可以通過(guò)中西結(jié)合、交替用藥的方法來(lái)有效減少抗生素的使用。一般情況下,先使用抗生素控制感染情況,在抗生素基本控制全身的重度感染后,采用中藥維持療效,局部使用抗生素,后內(nèi)服中藥直至痊愈,在整個(gè)治療過(guò)程中,聯(lián)合使用抗生素和中藥可取得較理想的治療效果。
2.2.4 生物療法 生物療法是當(dāng)前治療奶牛乳房炎的一個(gè)新思路。白文順等[13]選用某種lgY 抗體治療奶牛乳房炎,研究表明,該lgY 抗體在提高輕度臨床型乳房炎治愈率方面有著顯著的治療效果,但該抗體對(duì)重度臨床型乳房炎的治療效果較差。王方正等[14]對(duì)噬菌體溶素溶解奶牛乳房炎致病菌的研究進(jìn)展進(jìn)行了闡述,指出噬菌體及其內(nèi)溶素在奶牛乳房炎治療方面具有良好的應(yīng)用前景,但其在臨床應(yīng)用中的有效性和安全性仍有待進(jìn)一步的研究。此外,病原菌感染宿主后,機(jī)體產(chǎn)生并釋放大量的細(xì)胞因子,參與機(jī)體免疫并對(duì)局部的炎癥反應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié),如白細(xì)胞介素(IL)、集落刺激因子(CSF)、腫瘤壞死因子(TNF)和干擾素(IFN)等。有國(guó)外學(xué)者用細(xì)胞因子在治療乳房炎方面進(jìn)行了探索性研究,也取得了較好的效果[15]。