祝曉云，張開艷，余家奇，劉玉倩*，楊鳳飛，楊秀偉，劉培洪，楊忠蘭

(1.遵義職業(yè)技術(shù)學(xué)院 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)系，貴州 遵義 563000；2.遵義華邦農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司，貴州 遵義 563323；3.遵義市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 中藥研究所，貴州 遵義 563000；4.遵義醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院 藥劑科，貴州 遵義 563000)

花椒(ZanthoxylumbungeanumMaxim.)為蕓香科(Rutaceae)花椒屬(ZanthoxylumL.)植物青椒ZanthoxylumschinifoliumSieb.et Zucc.或花椒ZanthoxylumbungeaniumMaxim.干燥成熟果皮，是常用的香辛料和重要的中藥，具有藥食兩用的價(jià)值，其具有溫中止痛、殺蟲止癢作用，臨床上常用于治療脘腹冷痛，嘔吐泄瀉，蟲積腹痛，外治濕疹，陰癢[1-2]。其化學(xué)成分主要包括生物堿、脂肪酸、香豆素、木脂素、酰胺和揮發(fā)油等，其中揮發(fā)油含量較高[3-4]。花椒揮發(fā)油又稱花椒精油，是花椒香氣的主要有效成分，其化學(xué)成分主要為萜類化合物和芳香族化合物[5-6]?；ń窊]發(fā)油提取方法主要有水蒸氣蒸餾法、溶劑萃取法、超臨界CO2萃取法、同時(shí)蒸餾萃取法等[7-10]，近年來(lái)市售花椒品種多樣，主要是青花椒與紅花椒，本研究明確這兩種揮發(fā)油成分的異同，為花椒的開發(fā)利用和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。本文采用水蒸氣蒸餾法提取花椒揮發(fā)油，通過(guò)氣相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)比較兩種花椒揮發(fā)油含量及成分的異同。

1 儀器與材料

藥材：本實(shí)驗(yàn)所用花椒為青花椒、紅花椒，均由遵義華邦農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司提供(產(chǎn)自貴州省遵義市綏陽(yáng)縣大路槽鄉(xiāng)文星村新合組公司花椒基地)，經(jīng)遵義醫(yī)科大學(xué)張玉金副教授鑒定為蕓香科植物花椒(青椒ZanthoxylumschinifoliumSieb.et Zucc.或花椒ZanthoxylumbungeaniumMaxim.)的干燥成熟果皮，標(biāo)本存放于遵義醫(yī)科大學(xué)生藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

儀器：HP6890/5975C GC/MS聯(lián)用儀(美國(guó)安捷倫公司)；Agilent HP-5MS(60 m×0.25 mm，0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱。試劑：氦氣(純度：99.999 6%)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 揮發(fā)油的提取

取兩種花椒(青花椒、紅花椒)粉碎過(guò)篩，分別取花椒粉末100 g置于圓底燒瓶中，按照1∶20的料液比進(jìn)行水蒸汽蒸餾4 h，讀取揮發(fā)油體積并收集樣品，其中青花椒揮發(fā)油出油率為1.83%，紅花椒揮發(fā)油出油率為2.52%。

2.2 分析方法

2.2.1 氣相色譜條件 Agilent HP-5MS(60 m×0.25 mm，0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱，初始溫度42 ℃(保留2 min)，以3 ℃/min升溫至180 ℃，再以8 ℃/min升溫至310 ℃，運(yùn)行時(shí)間：72.25 min；汽化室溫度250 ℃；載氣為高純He(99.999%)；柱前壓16.19 psi，載氣流量1.0 mL/min，分流50∶1，溶劑延遲時(shí)間：6 min。

2.2.2 質(zhì)譜條件EI源 離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；電子能量70 eV；發(fā)射電流34.6 μA；倍增器電壓1 670 V；接口溫度280 ℃；質(zhì)量范圍29～500 amu。經(jīng) NIST 2.0 標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索鑒定成分并按峰面積歸一化計(jì)算各成分百分含量。

3 結(jié)果與分析

揮發(fā)油進(jìn)樣后得到兩種揮發(fā)油的總離子流圖，見(jiàn)圖1，采用面積歸一化法計(jì)算出揮發(fā)油成分的相對(duì)含量，利用質(zhì)譜圖經(jīng)計(jì)算機(jī)NIST 2.0標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索，分析鑒定結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

注：(A) 青花椒揮發(fā)油，(B) 紅花椒揮發(fā)油。

從表1、表2中可知，共檢出青花椒59個(gè)有效成分，主要化學(xué)成分是花椒油素(59.98%)，4-萜烯醇(6.43%)，芳樟醇(5.04%)，胡椒酮(4.04%)，γ-松油烯(2.52%)和萜品醇乙酸酯(2.16%)等；共檢出紅花椒65個(gè)有效成分，主要化學(xué)成分是芳樟醇(48.45%)，檜烯(12.92%)，檸檬烯(16.14%)，月桂烯(3.24%)和4-萜烯醇(2.71%)等。綜上，兩類花椒共有的有效成分為：芳樟醇和4-萜烯醇；花椒油素，胡椒酮，γ-松油烯和萜品醇乙酸酯為青花椒特有有效成分。檜烯，檸檬烯和月桂烯為紅花椒特有的有效成分。

表1 青花椒揮發(fā)油化學(xué)成分及相對(duì)含量

表2 紅花椒揮發(fā)油化學(xué)成分及相對(duì)含量

續(xù)表2

由圖2可知，對(duì)鑒定出來(lái)的化學(xué)成分進(jìn)行分析，青花椒中單萜31種(86.7%)，倍半萜13種(4.43%)，酯類8種(4.05%)，脂肪族4種(0.32%)，酮類2種(0.46%)，醛類1種(0.04%)；紅花椒中單萜31種(92.1%)，倍半萜13種(3.56%)，酯類7種(2.11%)，脂肪族6種(0.38%)，酮類2種(0.11%)，醛類5種(0.21%)，烯烴1種(0.04%)。

圖2 兩種花椒化學(xué)成分

4 結(jié)論

分析結(jié)果顯示，兩種花椒以紅花椒揮發(fā)油含量較高，且均達(dá)到《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)(1.5 mL/g)[2]；揮發(fā)油的共有成分較多，達(dá)到44種，但含量存在一定差異，其中含量差異較大的主要有芳樟醇、4-萜烯醇、α-松油烯、反式羅勒烯和γ-松油烯等，芳樟醇具有鎮(zhèn)痛、抗焦慮、鎮(zhèn)靜催眠、抗炎、抗腫瘤、抗菌等藥理活性[11-16]，藥用前景十分廣闊。其中芳樟醇、4-萜烯醇在香水及家用清潔護(hù)理產(chǎn)品中的使用頻率很高，亦可用作食用香精以及工業(yè)生產(chǎn)中的重要中間體。通過(guò)對(duì)花椒揮發(fā)油化學(xué)成分的分析研究，紅花椒揮發(fā)油的提取率、萜類成分含量均高于青花椒，可為當(dāng)?shù)鼗ń焚Y源的有效開發(fā)利用提供一定科學(xué)依據(jù)。