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不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝養(yǎng)分表觀(guān)消化率和血清生化指標(biāo)的影響

2022-12-08 12:42:08王家豪余學(xué)亮李志偉馬英俊楊開(kāi)倫李鳳鳴
關(guān)鍵詞:雙峰駝準(zhǔn)噶爾消化率

袁 鵬 王家豪* 余學(xué)亮 許 明 李志偉 馬英俊 楊開(kāi)倫 李鳳鳴**

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,新疆肉乳用草食動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,烏魯木齊 830052;2.新疆吉木乃縣畜牧工作站,吉木乃 836899;3.新疆旺源萬(wàn)駝園有限公司,吉木乃 836899)

駱駝是我國(guó)西北荒漠、半荒漠地區(qū)的重要畜種資源之一,也是草原畜牧業(yè)的重要組成部分[1]。新疆是我國(guó)駱駝主產(chǎn)區(qū)[2],具有發(fā)展駱駝產(chǎn)業(yè)得天獨(dú)厚的自然條件和優(yōu)勢(shì)。近年來(lái),駝乳、駝脂特殊功效[3]不斷地被發(fā)掘,使得駱駝產(chǎn)業(yè)得到了長(zhǎng)足發(fā)展。駱駝養(yǎng)殖也逐步從傳統(tǒng)放牧向舍飼圈養(yǎng)轉(zhuǎn)變,使得駱駝營(yíng)養(yǎng)需要的問(wèn)題日益凸顯。

國(guó)內(nèi)外關(guān)于駱駝營(yíng)養(yǎng)方面的研究相對(duì)較少。由于地域性原因及飼喂技術(shù)普及程度的不同,飼養(yǎng)水平嚴(yán)重制約了駱駝生產(chǎn)潛能的發(fā)揮[4]。飼糧營(yíng)養(yǎng)平衡是動(dòng)物生產(chǎn)的基礎(chǔ),飼糧精粗比對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育及生產(chǎn)具有重要影響。精料比例過(guò)高或過(guò)低均會(huì)引起營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率降低及生產(chǎn)性能的降低,適宜的精料比例可以提高動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率。王文奇等[5]研究表明,提高飼糧精粗比可以顯著提高母羊?qū)Ω晌镔|(zhì)(DM)、有機(jī)物(OM)、中性洗滌纖維(NDF)的表觀(guān)消化率。李巖等[6]研究表明,飼糧精粗比的提高可降低牦牛育肥后期總增重和平均日增重,對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化、蛋白質(zhì)合成有一定的抑制作用。因此,適宜的精粗比是科學(xué)飼養(yǎng)駱駝的基礎(chǔ),合理的精料投入對(duì)于提高駱駝生產(chǎn)性能具有重要意義。本試驗(yàn)通過(guò)研究不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)準(zhǔn)噶爾雙峰駝?dòng)神勷B(yǎng)分?jǐn)z入量與表觀(guān)消化率及血清生化指標(biāo)的影響,初步探索準(zhǔn)噶爾雙峰駝對(duì)養(yǎng)分的采食及消化情況,為準(zhǔn)噶爾雙峰駝營(yíng)養(yǎng)需要研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn)

本試驗(yàn)于2021年6月至2021年7月在新疆維吾爾自治區(qū)阿勒泰地區(qū)吉木乃縣新疆旺源萬(wàn)駝園有限公司進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料

飼料原料由新疆旺源萬(wàn)駝園有限公司提供,于吉木乃縣新牧康秸稈顆粒飼料公司進(jìn)行加工制粒。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)選取3歲左右健康、體況良好的育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝(母駝)24峰,隨機(jī)分為3組,每組8峰。3組育成駝分別飼喂精粗比為10∶90、30∶70、50∶50的全混合顆粒飼糧,分別記為C10組、C30組、C50組。試驗(yàn)預(yù)試期14 d,正試期7 d。

1.4 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)動(dòng)物采用單頭栓系飼喂,每日于08:00和18:00各飼喂1次,自由采食、自由飲水。試驗(yàn)開(kāi)始前1個(gè)月進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng),試驗(yàn)前對(duì)圈舍進(jìn)行消毒。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.5 樣品采集與處理

1.5.1 消化試驗(yàn)

于正試期第1~6天進(jìn)行消化試驗(yàn)。記錄每天每峰駱駝的給料量和剩料量,計(jì)算每天每峰駱駝的采食量。每日采集每組飼糧樣品,混合均勻后采用四分法取樣500 g,65 ℃烘干后粉碎過(guò)40目篩,備測(cè)。

正試期第1~6天,每天分3次,每次間隔8 h,通過(guò)直腸采糞法收集新鮮糞樣,按照每100 g添加10 mL 10%鹽酸固氮,于-20 ℃冷凍保存。試驗(yàn)結(jié)束后將糞便混合均勻,按照每天每峰取鮮糞100 g(共計(jì)600 g),于65 ℃烘干后粉碎過(guò)40目篩,備測(cè)。

1.5.2 血清樣品

正試期第7天晨飼前于準(zhǔn)噶爾雙峰駝?lì)i靜脈采血10 mL,靜置30 min,3 000 r/min離心15 min,分離血清于凍存管內(nèi),于-20 ℃保存待測(cè)。

1.6 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.6.1 養(yǎng)分表觀(guān)消化率的測(cè)定

飼糧及糞樣中干物質(zhì)、有機(jī)物含量的測(cè)定分別參照GB/T 6435—2014和GB/T 6438—2007進(jìn)行;粗蛋白質(zhì)(CP)含量的測(cè)定參照GB/T 6432—2018(凱氏定氮法)進(jìn)行,粗脂肪(EE)含量的測(cè)定參照GB/T 6433—2006進(jìn)行,中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)含量的測(cè)定分別參照GB/T 20806—2006和NY/T 1459—2007進(jìn)行,鈣(Ca)和磷(P)含量的測(cè)定分別參照GB/T 6436—2002和GB/T 6437—2002進(jìn)行,總能(DE)采用氧彈測(cè)熱法進(jìn)行測(cè)定,酸不溶灰分(AIA)含量的測(cè)定參照GB/T 23742—2009進(jìn)行。

采用AIA作為內(nèi)源指示劑測(cè)定準(zhǔn)噶爾雙峰駝養(yǎng)分表觀(guān)消化率[7],計(jì)算公式如下:

某養(yǎng)分?jǐn)z入量(g/d)=飼糧中該養(yǎng)分含量(%)×日均采食量(g/d);
某養(yǎng)分糞排出量(g/d)=[糞中指示劑含量(%)/
飼糧中指示劑含量(%)]×日均采食量(g/d)×
糞中該養(yǎng)分含量(%);
某養(yǎng)分消化量(g/d)=該養(yǎng)分?jǐn)z入量(g/d)-
該養(yǎng)分糞排出量(g/d);
某養(yǎng)分表觀(guān)消化率(%)=100-100×[飼糧中指示劑含量(%)/糞中指示劑含量(%)]×
[糞中該養(yǎng)分含量(%)/飼糧中該養(yǎng)分含量(%)]。

1.6.2 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

采用試劑盒法進(jìn)行血清生化指標(biāo)的測(cè)定,測(cè)定指標(biāo)包括總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、總膽固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、尿素氮(UN)、尿酸(UA)含量與丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性。所用試劑盒均采購(gòu)自南京建成生物工程研究所。此外,利用TP和ALB含量計(jì)算球蛋白(GLB)含量。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

利用Excel 2021對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理,采用SPSS 25.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝養(yǎng)分表觀(guān)消化率的影響

由表2可知,C30組、C50組的干物質(zhì)消化量、表觀(guān)消化率均極顯著高于C10組(P<0.01),其中消化量分別提高37.54%、44.69%,表觀(guān)消化率分別提高23.46%、25.47%,但C30組與C50組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

C30組和C50組的有機(jī)物消化量、表觀(guān)消化率均極顯著高于C10組(P<0.01),其中消化量分別提高36.91%和48.06%,表觀(guān)消化率分別提高20.51%和22.52%,但C30組與C50組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

與C10組相比較,C30組和C50組的粗蛋白質(zhì)攝入量分別提高39.88%(P<0.01)、74.86%(P<0.01),粗蛋白質(zhì)消化量分別提高139.78%(P<0.01)、233.27%(P<0.01),粗蛋白質(zhì)表觀(guān)消化率分別提高70.42%(P<0.01)、89.61%(P<0.01)。

C50組的粗脂肪攝入量極顯著高于C30組和C10組(P<0.01),分別提高41.77%和147.52%;C50組的粗脂肪消化量極顯著高于C30組和C10組,分別提高38.41%和323.21%;C50組和C30組的粗脂肪表觀(guān)消化率均極顯著高于C10組(P<0.01),分別提高70.62%和71.37%。

隨著飼糧精料比例的升高,中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維消化量、表觀(guān)消化率呈現(xiàn)波動(dòng)性變化,均以C30組為最高。C10組和C30組的酸性洗滌纖維攝入量均顯著高于C50組(P<0.05),分別提高27.54%和19.67%;C10組和C30組的酸性洗滌纖維的消化量均極顯著高于C50組(P<0.01),分別提高55.53%和57.94%。

C50組的總能攝入量顯著高于C10組(P<0.05),提高24.97%;C30組與C50組的總能消化量、表觀(guān)消化率均極顯著高于C10組(P<0.01),其中消化量分別提高39.48%和50.01%,表觀(guān)消化率分別提高21.80%和20.36%,但C30組與C50組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

隨著飼糧精料比例的升高,鈣、磷的攝入量均無(wú)顯著變化(P>0.05)。值得注意的是,C30組與C50組的鈣消化量、表觀(guān)消化率均極顯著高于C10組(P<0.01),其中消化量分別提高237.37%、176.58%,表觀(guān)消化率分別提高221.39%、204.10%。

表2 不同精粗比顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝養(yǎng)分表觀(guān)消化率的影響

續(xù)表2項(xiàng)目ItemsC10組Group C10C30組Group C30C50組Group C50P值P-value磷P攝入量 Intake/(g/d)23.02±2.6125.73±3.4925.64±5.490.334 糞排出量 Fecal output/(g/d)7.37±1.088.64±1.539.97±3.000.059 消化量 Digestion/(g/d)15.66±2.8017.09±2.4315.67±3.780.567 表觀(guān)消化率 Apparent digestibility/%67.62±6.3466.45±3.4661.14±7.520.095

2.2 不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知,準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清中GLB、HDL-C、UA含量與ALP活性隨著飼糧精料比例的提高而逐漸增加,其中C50組的GLB含量顯著高于C30組和C10組(P<0.05),分別提高6.61%、7.74%;C50與C30組的ALP活性均極顯著高于C10組(P<0.01),分別提高65.74%、59.38%(P<0.01);C50與C30組的HDL-C含量均高于C10組,分別提高50.00%(P>0.05)、37.50%(P>0.05);與C10組和C30組相比,C50組的UA含量分別提高90.06%(P>0.05)、46.54%(P>0.05)。準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清中ALT活性隨著飼糧精料比例的提高先降低后升高,其中C50組與C10組均高于C30組,分別提高71.95%(P<0.05)、32.66%(P>0.05)。準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清中UN含量隨著飼糧精料比例的提高而逐漸下降,其中C10組較C30組和C50組分別提高47.87%(P<0.01)、56.64%(P<0.01)。

表3 不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝采食量、養(yǎng)分表觀(guān)消化率的影響

采食量是衡量動(dòng)物攝入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)數(shù)量的尺度,決定維持動(dòng)物健康和生產(chǎn)的養(yǎng)分需要量,是影響動(dòng)物生產(chǎn)力水平的重要參數(shù)。采食量受動(dòng)物品種、飼料種類(lèi)及品質(zhì)、飼養(yǎng)管理和環(huán)境等多種變量的影響[8]。陳木蘭[9]研究表明,體重為140 kg左右、年齡約為1.5歲的內(nèi)蒙雙峰駝對(duì)冰草、發(fā)酵檸條和玉米秸稈的采食量分別為2.54、2.80和1.64 kg/d。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在精粗比10∶90、30∶70、50∶50的全混合顆粒飼糧條件下,準(zhǔn)噶爾雙峰駝?dòng)神劯晌镔|(zhì)攝入量分別為3.78、4.23、4.39 kg/d,全混合顆粒飼糧極大地提高了駱駝的采食量,提示制粒能夠提高駱駝的采食量,這與制粒在牛[10]和羊[11-12]上增加采食量的結(jié)果一致。

飼糧是影響采食量的主要因素。適宜的飼糧精粗比例可以提高反芻動(dòng)物的養(yǎng)分?jǐn)z入量和表觀(guān)消化率[13]。飼喂以粗飼料為主的飼糧時(shí),中性洗滌纖維在瘤胃中充盈程度和流通速度能夠限制采食量。飼糧的精料比例較高時(shí),能量的反饋性調(diào)節(jié)則成為采食量的調(diào)節(jié)因素。門(mén)小明等[14]研究表明,隨著精料比例的提高,小尾寒羊母羊的干物質(zhì)采食量逐漸增加,提高飼糧精料比例可以使飼糧中氮含量增加,從而提高動(dòng)物粗蛋白質(zhì)采食量并降低粗纖維采食量。本試驗(yàn)結(jié)果表明,提高飼糧精料比例可以提高準(zhǔn)噶爾雙峰駝的采食量,并且隨著精料比例的提高,干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總能的攝入量逐漸提高,但中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的攝入量隨精料比例的提高而降低,與門(mén)小明等[14]、王文奇等[5]及Llamas-lamas等[15]的研究結(jié)果一致。

在營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)中,飼糧精粗比變化最直接的結(jié)果就是中性洗滌纖維含量的變化,已有研究表明飼糧中性洗滌纖維含量與干物質(zhì)采食量之間呈顯著的負(fù)相關(guān),提高飼糧中中性洗滌纖維的含量會(huì)降低食糜在瘤胃中的流通速率,進(jìn)而造成干物質(zhì)采食量的降低[16]。適宜的精粗比能夠提高反芻動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用。門(mén)小明等[14]研究表明,小尾寒羊?qū)Ω晌镔|(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和總能的表觀(guān)消化率隨精料比例的提高而增加;王文奇等[5]與Cantalapiedra-Hijar等[17]在羊上的研究顯示,隨著精料比例的提高,干物質(zhì)、有機(jī)物的表觀(guān)消化率均顯著提高。Putnam等[18]在奶牛上和Turcott-White等[19]在馬上的研究顯示,隨著精料比例的提高,干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)的消化率明顯提高。聶彪彪等[20]在伊犁馬上的研究表明,隨著精料比例的提高,干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)的表觀(guān)消化率不斷升高。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼喂精粗比為10∶90、30∶70、50∶50的全混合顆粒飼糧,準(zhǔn)噶爾雙峰駝對(duì)干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)的表觀(guān)消化率隨精料比例的提高而增加,且C30組與C50組極顯著高于C10組,與上述研究結(jié)果一致。

隨著精料比例提高,中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的攝入量逐漸降低,但中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的表觀(guān)消化率的研究結(jié)果并不完全一致。聶彪彪等[20]在伊犁馬上的研究表明,隨著精料比例的提高,中性洗滌纖維表觀(guān)消化率不斷升高,酸性洗滌纖維的表觀(guān)消化率表現(xiàn)為先升高后下降的趨勢(shì)。李斌昌等[21]在后備奶牛上的研究顯示,中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的表觀(guān)消化率隨飼糧精粗比的提高呈現(xiàn)顯著下降。郭盼盼等[22]的試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著飼糧精粗比的提高,中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的表觀(guān)消化率無(wú)顯著變化。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著飼糧精料比例的提高,準(zhǔn)噶爾雙峰駝對(duì)中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的表觀(guān)消化率先升高后降低,這與聶彪彪等[20]、李斌昌等[21]的研究結(jié)果并不一致。精粗比、粗飼料類(lèi)型、前胃的充盈程度以及微生物組成可能與中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的表觀(guān)消化率有關(guān)。

與C10組相比,C30組與C50組準(zhǔn)噶爾雙峰駝的干物質(zhì)、有機(jī)物和總能的消化量和表觀(guān)消化率均極顯著提高,但C30組與C50組之間無(wú)顯著差異;此外,中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的消化量和表觀(guān)消化率均以C30組為最高。高精料比例會(huì)增加飼料成本,因此,從經(jīng)濟(jì)效益角度考慮,用精粗比為30∶70的全混合顆粒飼糧飼喂育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝?shì)^為適宜。

3.2 不同精粗比全混合顆粒飼糧對(duì)育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收、代謝以及動(dòng)物機(jī)體健康狀態(tài)的重要指標(biāo)[23]。血清中TP、ALB含量變化可以反映動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)吸收和代謝水平[24],TP為ALB與GLB的總和,GLB主要反映機(jī)體的免疫情況,在動(dòng)物健康的狀態(tài)下,GLB含量提高可以使機(jī)體的免疫水平提高。UN是機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝的產(chǎn)物,反映機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝和氨基酸平衡的情況,血清UN含量降低則表示機(jī)體蛋白質(zhì)利用提高,反之,則表明蛋白質(zhì)分解加強(qiáng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著飼糧精料比例的提高,血清TP和GLB含量逐漸上升,血清UN含量逐漸下降,表明提高飼糧的精料比例使機(jī)體蛋白質(zhì)利用率提高,并可能提高了機(jī)體的免疫水平。

血清中的ALP主要來(lái)源于肝臟和骨骼。成骨細(xì)胞含有豐富的ALP,任何能夠引起成骨細(xì)胞增生和活動(dòng)旺盛的因素都可以使血清ALP活性增高[25]。ALP表達(dá)活性是成骨細(xì)胞分化的一個(gè)明顯特征,兒童在生理性骨骼發(fā)育期,ALP活性可以高于正常成人的1~2倍[26]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著飼糧精料比例的提高,育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清中ALP活性增高,可能是由于精料比例提高增強(qiáng)了育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝的成骨細(xì)胞分化。

GLU、TG、TCH含量是反映機(jī)體能量代謝的重要指標(biāo)[27]。GLU含量反映機(jī)體對(duì)糖吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝的動(dòng)態(tài)平衡,TG和TCH含量反映了機(jī)體對(duì)脂類(lèi)的吸收代謝情況。本試驗(yàn)結(jié)果表明,各組間血清GLU、TG含量無(wú)顯著變化,但GLU含量隨精料比例的提高先升高后降低,這與中性洗滌纖維消化量的波動(dòng)具有一致性。中性洗滌纖維是反芻家畜丙酸的主要來(lái)源,丙酸是反芻動(dòng)物肝臟糖異生的主要前體物質(zhì),中性洗滌纖維消化量的增加會(huì)使反芻動(dòng)物GLU含量增加[28]。血清中的TG主要有內(nèi)源性合成和外源性吸收2種來(lái)源,TG含量隨精料比例的提高而不同程度的升高,可能是由于隨著精料比例的增加,外源性供給和內(nèi)源性合成TG增加而導(dǎo)致的。

UA是機(jī)體嘌呤核苷酸代謝的唯一終產(chǎn)物,在合理的范圍內(nèi)血清UA含量升高代表機(jī)體新陳代謝加快。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨精料比例提高,血清中UA含量增加,說(shuō)明機(jī)體新陳代謝水平加快。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下可以得出以下結(jié)論:

① 育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝的干物質(zhì)攝入量為3.78~4.39 kg/d。

② 提高飼糧精料比例能夠提高育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝對(duì)干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總能的攝入量和表觀(guān)消化率,但對(duì)纖維素類(lèi)物質(zhì)的消化有一定的影響。

③ 育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝血清中GLB、HDL-C、UA含量與ALP活性隨精料比例的提高而增加。

④ 建議育成期準(zhǔn)噶爾雙峰駝使用精粗比為30∶70的全混合顆粒飼糧。

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極危物種
——野雙峰駝
更正
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湖南飼料(2019年5期)2019-10-15 08:59:10
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