宋洪麗，馮永利，王耀焓，馮 利

（1.北京中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院腫瘤科，北京 100038；2.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院中醫(yī)科，北京 100021）

接受抗腫瘤治療的癌癥患者中癌性疼痛的發(fā)生率高達(dá)60%，在晚期癌癥患者的癌痛發(fā)生率甚至高達(dá)90%［1］，骨癌痛是其最常見的形式，而骨轉(zhuǎn)移被認(rèn)為是引起骨癌痛最常見的原因［2，3］。骨癌痛貫穿癌癥患者診斷及治療過程，不僅與疾病本身相關(guān)，而且癌癥相關(guān)治療也可引起骨癌痛。阿片類藥物治療骨癌痛臨床效果欠佳，不僅易出現(xiàn)惡心、便秘等副作用，而且阿片類藥物可以減緩甚至停止骨重塑，增加骨脆性，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量［4，5］。不同于其他類型癌痛，骨癌痛具有急性、炎癥性和神經(jīng)性疼痛的特點(diǎn)，表現(xiàn)為痛覺過敏及痛覺超敏，其分子機(jī)制十分復(fù)雜，涉及腫瘤細(xì)胞、骨細(xì)胞、炎癥微環(huán)境及神經(jīng)元［6］，良好的骨癌痛動物模型對骨癌痛的機(jī)制及藥物研究具有重要意義［7，8］。

到20 世紀(jì)后期，所有的骨癌痛動物模型都依賴于腫瘤細(xì)胞的全身注射，由于腫瘤在肝、肺、大腦等重要器官以及骨中的多個部位發(fā)生轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致動物健康狀況較差，且轉(zhuǎn)移的數(shù)量及部位不確定，對疼痛測量造成很大影響［8，9］。局部種植骨癌痛模型目前 應(yīng) 用 廣 泛，2006 年Mao-Ying 等［10］將 大 鼠Walker256 乳腺癌細(xì)胞種植到大鼠脛骨骨髓腔內(nèi)，是目前國內(nèi)發(fā)展較為成熟的骨癌痛模型。本研究參照Mao-Ying 等［10-12］建立大鼠骨癌痛模型，觀察以扶正解毒化瘀為組方原則的益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠的痛覺敏化及骨破壞的影響。

1 材料與方法

1.1 動物及細(xì)胞

選擇SPF 級體重（200±20）g 成年雌性Wistar大鼠及體重（70～100）g 幼年雌性Wistar 大鼠，購自于SiPeiFu 公司，合格證號SYXK（京）2016-003。大鼠飼養(yǎng)溫度為（24±0.5）℃，自由飲食、飲水，大鼠適應(yīng)環(huán)境1 周后開始實(shí)驗(yàn)。Walker256 乳腺癌細(xì)胞株于北京BNCC 公司購買。

1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試藥

鹽酸曲馬多注射液（Grunenthal GmbH）；BME-404 電子式機(jī)械測痛儀；YLS-21A 冷熱板儀；2Biological 公司后肢失能測量儀（YLS-21A 冷熱板儀及后肢失能測量儀由中日友好醫(yī)院中西醫(yī)腫瘤科賈立群教授實(shí)驗(yàn)室提供）。益腎祛痛顆粒（益腎骨康方）為 馮 利 教 授 專 利 處 方（ 專 利 號 ：ZL201310582907.9）組方成分：僵蠶10 g、牡丹皮10 g、山茱萸15 g、山藥15 g、茯苓10 g、骨碎補(bǔ)10 g、熟地黃20 g、半枝蓮10 g、澤瀉10 g、白花蛇舌草10 g，該實(shí)驗(yàn)所用益腎祛痛顆粒由北京市衛(wèi)生局臨床藥學(xué)研究所采用水提工藝，經(jīng)一步質(zhì)粒法加工而成，（批號：181029），成人1 日劑量為30 g。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 動物造模

1.3.1.1 腹水瘤細(xì)胞準(zhǔn)備 將Walker256 細(xì)胞于液氮中取出，37 ℃水浴快速復(fù)蘇，取適量細(xì)胞置于離心機(jī)，離心5 min，轉(zhuǎn)速設(shè)置為1 500 r/min，丟棄上清液，加0.5 mL 無菌生理鹽水，細(xì)胞與鹽水比例為1∶1，充分吹打混勻。取1 只幼年雌性Wistar 大鼠，腹部消毒，抽取0.3 mL 細(xì)胞懸液，注射入幼鼠腹腔，放回籠中飼養(yǎng)大約3～5 d 后，可見幼鼠腹部膨隆，抽取約少量黃白色渾濁腹水，離心5 min，轉(zhuǎn)速設(shè)置為1 500 r/min，丟棄上清液，加入無菌生理鹽水清洗。取少量生理鹽水與分離好的腹水瘤細(xì)胞充分混勻，用細(xì)胞計(jì)數(shù)板于顯微鏡下計(jì)數(shù)，并將腹水瘤細(xì)胞濃度反復(fù)調(diào)整為2×107/mL，再將合適濃度細(xì)胞混懸液置冰上。

1.3.1.2 造模 取成年雌性Wistar 大鼠，0.3%戊巴比妥鈉（1 mL/100 g）采用腹腔注射方式麻醉，固定大鼠四肢，左后肢剃毛、消毒，將脛骨上段內(nèi)側(cè)切開長1 cm 切口，鈍性分離暴露脛骨骨面。在膝關(guān)節(jié)脛骨內(nèi)側(cè)面下方約0.5 cm 處用22G 醫(yī)用注射器針頭鉆孔，待突破脛骨骨面后，用微量注射器抽取4 μL腹水瘤細(xì)胞懸液注入脛骨骨髓腔內(nèi)，迅速用無菌骨蠟封注射孔。用酒精濕棉球拭去外溢的腹水瘤細(xì)胞，縫合切口，皮膚局部消毒，外用適量紅霉素軟膏防止切面?zhèn)诟腥尽４笫竺劰撬枨粌?nèi)注射等量無菌生理鹽水做為假手術(shù)組，余操作同造模組。

1.3.2 分組及給藥 待模型成功后隨機(jī)分為假手術(shù)組（A 組）、模型組（B 組）、陽性藥組（C 組）、低劑量組（D 組）、中劑量組（E 組）、高劑量組（F 組），每組各10 只，造模后第14 天開始藥物干預(yù)。中藥組：益腎祛痛顆粒灌胃，大鼠灌胃體積為1 mL/100 g。每日1 次，連續(xù)14 d；將顆粒藥物用清潔飲用水充分溶解，根據(jù)人與大鼠體表面積比例換算成所需藥物濃度：D 組：藥物濃度為0.175 g/mL；E 組：藥物濃度為0.35 g/mL；F 劑量組：藥物濃度為0.7 g/mL；C組：鹽酸曲馬多注射液，用無菌注射用水稀釋成濃度10 mg/kg，腹腔注射，每日1 次，連續(xù)14 d。A 組、B 組：給予等體積清潔飲用水灌胃，每日1 次，連續(xù)14 d。

1.3.3 大鼠骨癌痛模型行為學(xué)觀察 造模日視為0 d，于造模前、造模后第4、7、14、21、28 天測量機(jī)械性痛閾值、熱痛閾值、后肢負(fù)重差，測量時段為9 時～16 時。

1.3.3.1 機(jī)械性痛閾值測量方法 將大鼠放置于有

機(jī)玻璃籠內(nèi)，體積為9 cm×12 cm×18 cm 的、底部為孔徑0.6 cm 的金屬孔板，待其適應(yīng)20～30 min 后，用電子測痛儀測量探針避開足墊刺激大鼠左后肢足底，待其抬足測量結(jié)束，連續(xù)刺激5 次（需在1 min內(nèi)測量完成），每次間隔10 s 以上，取痛閾值算數(shù)平均值。

1.3.3.2 熱痛閾值測量方法 電子冷熱板儀溫度設(shè)定為（55±0.2）℃，將大鼠置于熱板儀內(nèi)開始計(jì)時，當(dāng)大鼠出現(xiàn)舔后足時，其測量時間視為大鼠的熱痛閾值。實(shí)驗(yàn)開始前剔除4 s＜熱痛閾＜30 s 的大鼠，每只大鼠連續(xù)測量3 次，每次測量至少間隔5 min，取3 次算數(shù)平均值。

1.3.3.3 后肢負(fù)重差測量方法 將各組大鼠置于2Biological 后肢失能測量儀盒內(nèi)，前肢放于盒內(nèi)斜面，后肢分別踩踏于底部2 個獨(dú)立重力傳感器，大鼠軀干盡量保持中軸，待其適應(yīng)2～3 min 后開始測量，將儀器測量時間設(shè)置為5 s，儀器顯示大鼠左右后肢負(fù)重值，連續(xù)測量3 次，取3 次測量算數(shù)均值，后肢負(fù)重差=（右側(cè)后肢-左側(cè)后肢）負(fù)重值，計(jì)算差值。

1.3.3.4 影像學(xué)評價 將模型組大鼠麻醉，于中國中醫(yī)研究院骨傷科醫(yī)院放射科對大鼠左后肢行X光檢查，觀察模型組大鼠造模后7、14、21、28 d 骨質(zhì)情況。

1.3.3.5 病理學(xué)評價 造模后28 d，各組大鼠隨機(jī)抽取3 只，麻醉后迅速剪下大鼠左后肢，剝離皮膚、肌肉組織，脛骨于4% 多聚甲醛固定液固定。10%EDTA 脫鈣4 周，經(jīng)石蠟包埋、切片，采用HE染色，鏡下觀察各組骨組織腫瘤破壞情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 25.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（±s）進(jìn)行表示，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)應(yīng)用非參數(shù)檢驗(yàn)方法，正態(tài)分布數(shù)據(jù)應(yīng)用t檢驗(yàn)方法，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 模型評價

本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ筒捎糜^察骨癌痛大鼠痛覺敏化所致行為異常與影像學(xué)改變結(jié)合來評估造模成功。造模后大鼠熱痛閾值、機(jī)械性痛閾值持續(xù)降低，造模后14 d 可見閾值趨于相對穩(wěn)定，表明大鼠痛覺敏化形成，符合骨癌痛的特點(diǎn)。

影像學(xué)改變：X 線檢查示造模各組大鼠7 d 脛骨未見明顯骨質(zhì)異常，14 d 脛骨骨皮質(zhì)可見少量缺損灶，透光度增加，說明造模成功。而模型組21、28 d繼續(xù)觀察，發(fā)現(xiàn)大鼠骨組織進(jìn)一步破壞，造模后28 d脛骨骨皮質(zhì)嚴(yán)重?fù)p壞，骨小梁殘缺不全，脛骨周圍組織嚴(yán)重腫脹，可見溶骨性骨破壞。見圖1。

圖1 骨癌痛模型大鼠脛骨X 線Fig 1 X-ray of tibia of rats with bone cancer pain in each group

2.2 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠機(jī)械性痛閾值的影響

機(jī)械性痛覺敏化可以通過測量機(jī)械痛閾值來衡量。由表1 可見，模型組大鼠造模14 d，痛閾值降低至9 以下趨于平穩(wěn)。造模后7～28 d，模型組及益腎祛痛顆粒各組大鼠痛閾值均低于假手術(shù)組（P＜0.05）；造模21、28 d：益腎祛痛顆粒各組及陽性對照組大鼠痛閾值高于模型組（P＜0.05），而中劑量組相較于陽性對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠機(jī)械性痛閾值的影響（g，n=10，±s）Tab 1 Effect of Yishen Qutong granula on mechanical pain threshold in rats with bone cancer（g，n=10，±s）

表1 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠機(jī)械性痛閾值的影響（g，n=10，±s）Tab 1 Effect of Yishen Qutong granula on mechanical pain threshold in rats with bone cancer（g，n=10，±s）

注：與A 組比較，*P＜0.05；與B 組比較，#P＜0.05；與C 組比較：△P＜0.05。

28 d 26.44±3.20 7.86±1.58*21.87±4.45*#12.98±3.02*#△18.29±3.69*#13.98±6.85*#△組別A 組B 組C 組D 組E 組F 組0 d 26.43±3.66 25.49±2.74 24.75±2.56 25.64±4.10 25.99±3.07 25.24±3.41 4 d 22.87±2.65 21.33±3.31 21.03±4.23 20.94±5.43 22.47±3.90 21.63±4.29 7 d 23.77±2.43 18.04±3.26*17.51±2.38*18.55±3.49*18.51±4.13*18.26±3.40*14 d 26.43±2.80 8.91±2.64*10.15±3.79*9.49±2.72*10.19±3.15*10.61±2.15*21 d 26.20±3.34 8.24±3.27*20.83±3.85*#16.13±3.55*#△17.64±3.09*#13.83±4.80*#△

2.3 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠熱痛閾值的影響

熱痛覺過敏可以通過測量大鼠對熱刺激的反應(yīng)時間來衡量。由表2 可知，造模后4 d 造模各組熱痛閾值繼續(xù)降低而假手術(shù)組回升至術(shù)前，造模14 d，模型組及益腎祛痛顆粒各組大鼠熱痛閾值顯著低于假手術(shù)組（P＜0.05）；造模后21、28 d，益腎祛痛顆粒中劑量組、陽性對照組熱痛閾值顯著高于模型組（P＜0.05），且中劑量組相較于陽性對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠熱痛閾值的影響（s，n=10，±s）Tab 2 Effect of Yishen Qutong granula on thermal pain threshold in rats with bone cancer（s，n=10，±s）

表2 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠熱痛閾值的影響（s，n=10，±s）Tab 2 Effect of Yishen Qutong granula on thermal pain threshold in rats with bone cancer（s，n=10，±s）

注：與A 組比較，*P＜0.05；與B 組比較，#P＜0.05；與C 組比較：△P＜0.05。

組別A 組B 組C 組D 組E 組F 組28 d 7.52 ±1.18 4.10±0.53*6.20±1.41*#4.57±0.98*△5.74±0.89*#4.61±0.68*△0 d 8.23±2.43 7.58±1.21 8.27±1.04 7.91±1.30 7.43±1.25 7.34±1.52 4 d 7.14±2.13 7.00±1.42 6.97±1.76 7.85±2.22 7.50±1.63 6.51±1.17 7 d 7.18±1.52 5.96±0.87 6.58±1.55 6.33±1.17 7.13±1.83 6.37±1.01 14 d 6.94±1.46 4.67±0.64*5.02±0.96*4.81±1.18*5.07±1.09*5.01±0.86*21 d 7.21±1.43 4.54±0.63*5.35±1.04*#5.09±0.75*5.42±0.69*#4.56±0.90*

2.4 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠雙后肢負(fù)重差的影響

痛覺超敏可以通過測量大鼠雙后肢負(fù)重差來衡量。由表3 可見，各組大鼠在造模4 d 后肢負(fù)重差值略增大，隨后假手術(shù)組負(fù)重差值逐漸減小并與造模前差值相當(dāng)，模型組與益腎祛痛顆粒各組負(fù)重差值繼續(xù)增大。造模7～28 d，益腎祛痛顆粒各組及模型組大鼠后肢負(fù)重差明顯高于假手術(shù)組（P＜0.05）；造模21、28 d，益腎祛痛顆粒各組及陽性對照組負(fù)重差均較模型組負(fù)重差?。≒＜0.05）；造模21 d，益腎祛痛顆粒中、高劑量組后肢負(fù)重差值顯著小于陽性對照組（P＜0.05），而造模后第28 天，益腎祛痛顆粒各組后肢負(fù)重差值均較陽性對照組負(fù)重差?。≒＜0.05）。

表3 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠雙后肢負(fù)重差的影響（g，n=10，±s）Tab 3 Effect of Yishen Qutong granula on weight-bearing difference of both hind limbs in rats with bone cancer（g，n=10，±s）

表3 益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠雙后肢負(fù)重差的影響（g，n=10，±s）Tab 3 Effect of Yishen Qutong granula on weight-bearing difference of both hind limbs in rats with bone cancer（g，n=10，±s）

注：與A 組比較，*P＜0.05；與B 比較，#P＜0.05；與C 組比較：△P＜0.05。

28 d-0.39±2.00 36.21±10.79*26.58±8.74*#19.38±3.58*#△8.54±4.96*#△15.68±3.77*#△組別A 組B 組C 組D 組E 組F 組0 d 0.10±1.03 0.35±1.64 0.81±3.18-0.31±1.83-0.36±1.75 1.01±4.36 4 d 5.58±2.77 5.92±2.53 6.42±2.41 6.59±2.83 6.29±2.17 6.74±2.43 7 d 2.28±1.35 9.11±2.40*8.08±1.77*8.30±1.78*8.62±1.79*7.59±2.42*14 d 1.09±1.79 15.48±5.00*14.08±3.78*14.93±3.71*13.39±4.22*14.30±3.44*21 d 0.63±1.61 23.02±4.72*16.66±2.79*#13.11±4.83*#9.03±3.06*#△10.81±3.49*#△

2.5 病理學(xué)評價

造模28 d，通過HE 染色來觀察益腎祛痛顆粒對骨癌痛大鼠骨破壞的影響。觀察圖2 大鼠脛骨HE 染色圖片可見，假手術(shù)組骨組織未見異常，骨皮質(zhì)、骨小梁完整，排列緊密。而造模各組骨小梁均有不同程度破壞、缺失，大鼠脛骨髓腔內(nèi)可見致密腫瘤細(xì)胞。模型組及陽性對照組脛骨皮質(zhì)破壞不完整，破壞嚴(yán)重，模型組大鼠髓腔內(nèi)充斥大量腫瘤細(xì)胞，骨小梁僅少量殘留，骨皮質(zhì)外可見腫瘤細(xì)胞。益腎祛痛顆粒各組骨破壞較陽性對照組輕，其中益腎祛痛顆粒中劑量組骨破壞最輕。

圖2 各組大鼠脛骨HE 染色病理圖片（×50）Fig 2 Pathological pictures of tibia of rats in each group with HE staining

3 討論

骨癌痛同時具有炎性疼痛及神經(jīng)病理性疼痛的病理機(jī)制，臨床表現(xiàn)為持續(xù)性背景痛、爆發(fā)痛及痛覺敏化［13］，這種疼痛往往無法緩解，可能發(fā)展為慢性疼痛，臨床控制不佳，嚴(yán)重?fù)p害患者功能狀態(tài)，縮短生存期［14］。目前晚期骨癌痛的治療仍以阿片類藥物治療為主，但骨癌痛患者阿片類藥物使用劑量普遍較大，惡心、嗜睡、譫妄、便秘甚至腸梗阻等不良反應(yīng)嚴(yán)重降低患者生存質(zhì)量，且阿片類藥物并不能阻止腫瘤骨破壞，臨床中可持續(xù)替代的新藥及治療方法迫切需要。中醫(yī)藥治療骨癌痛方式靈活多樣，有中藥內(nèi)服、針刺、藥物貼敷、穴位注射、耳穴等方式，安全有效，無明顯副作用，中西醫(yī)結(jié)合可具有減毒增效的作用，患者認(rèn)可度高，臨床中有明顯優(yōu)勢［15］。

骨癌痛可歸為中醫(yī)學(xué)“石疽”“痹癥”“骨疽”等范疇。目前多數(shù)醫(yī)家認(rèn)為氣滯、血瘀、寒凝、痰結(jié)、熱毒等為主要病因，“不通則痛”和“不榮則痛”為主要發(fā)病機(jī)制［16，17］。因此，課題組根據(jù)病因、病機(jī)，以“扶正、解毒、化瘀”為治法組成的“益腎祛痛顆粒”在前期多項(xiàng)臨床試驗(yàn)中已證實(shí)治療晚期腫瘤患者中重度癌痛、骨轉(zhuǎn)移疼痛中，益腎祛痛顆粒不僅可以有效緩解癌痛患者的持續(xù)疼痛癥狀及爆發(fā)疼痛，改善患者的生活質(zhì)量，還可以有效減少阿片類藥物的用量并明顯降低其不良反應(yīng)［18-20］。本實(shí)驗(yàn)所用益腎祛痛顆粒由北京市衛(wèi)生局臨床藥學(xué)研究所采用水提工藝，經(jīng)一步質(zhì)粒法加工而成，顆粒制劑不僅保留藥物有效成分，而且方便患者攜帶、服用。

本研究采用Walk256 乳腺癌細(xì)胞經(jīng)幼年雌鼠腹水傳遞得到腹水瘤細(xì)胞，種植到成年雌鼠脛骨內(nèi)的局部種植造模方式，此方式成模率高達(dá)85%，通過影像及行為學(xué)綜合評價造模是否成功，避免了造模失敗產(chǎn)生的誤差。本實(shí)驗(yàn)腹水采用黃白色渾濁腹水，腫瘤細(xì)胞濃度高，實(shí)驗(yàn)后期造模大鼠一般狀態(tài)較好，較血性腹水提取腹水瘤細(xì)胞造模的大鼠死亡率明顯降低。通過對機(jī)械性痛閾值、熱痛閾值、后肢負(fù)重差進(jìn)行測量來評價骨癌痛大鼠痛覺敏化。我們觀察到造模后4 d，所有大鼠機(jī)械性痛閾值、熱痛閾值均有降低，后肢負(fù)重差值變大，考慮為手術(shù)創(chuàng)傷所致的神經(jīng)性疼痛。但4 d 之后隨骨創(chuàng)面愈合，假手術(shù)組在痛閾值、負(fù)重差等指標(biāo)慢慢恢復(fù)正常，而造模組大鼠隨時間推移，腫瘤細(xì)胞逐漸生長，并侵蝕骨組織，腫瘤微環(huán)境炎癥細(xì)胞激活，釋放大量炎癥因子，造成痛覺敏化［21］，因此可見癌痛大鼠機(jī)械性痛閾值、熱痛閾值逐漸降低，負(fù)重差逐漸增大。本研究選用鹽酸曲馬多為陽性對照藥，曲馬多為臨床中常用的第二階梯鎮(zhèn)痛藥物。有研究表明，鹽酸曲馬多可顯著緩解神經(jīng)病理性疼痛大鼠痛覺過敏［22］。

通過實(shí)驗(yàn)觀察到，造模后7 d 開始，骨癌痛大鼠機(jī)械性痛閾值顯著降低，雙后肢負(fù)重差顯著增大，而熱痛閾值在14 d 顯著降低，熱痛覺過敏發(fā)生較機(jī)械性痛覺過敏晚，而在多項(xiàng)神經(jīng)病理性及炎性疼痛的動物實(shí)驗(yàn)中，大鼠的機(jī)械性痛覺過敏及熱痛覺過敏可在造模后1～3 d 內(nèi)出現(xiàn)，甚至最早可在4 h 內(nèi)發(fā)生［23］，這一現(xiàn)象也表明癌性疼痛與炎性疼痛、神經(jīng)病理性疼痛有區(qū)別。通過藥物干預(yù)1 周后，益腎祛痛顆粒各組及陽性藥組均可以顯著改善骨癌痛大鼠機(jī)械性痛覺過敏及痛覺超敏。藥物干預(yù)2 周后，益腎祛痛顆粒中劑量組和陽性藥組大鼠機(jī)械性痛閾值、熱痛閾值較前1 周提高，且中劑量組與陽性藥組效果相當(dāng)，低、高劑量組并改善熱痛覺過敏，但益腎祛痛顆粒低、中、高劑量組在改善骨癌痛大鼠痛覺超敏方面效果優(yōu)于鹽酸曲馬多。這可能由于腫瘤進(jìn)展，鹽酸曲馬多不能控制腫瘤對骨組織破壞有關(guān)，并且HE 染色可見鹽酸曲馬多組骨破壞較益腎祛痛顆粒各組嚴(yán)重。

以上表明，雖然鹽酸曲馬多對骨癌痛大鼠有較好的止痛作用，但并不能減緩其腫瘤所致的溶骨性骨破壞，而益腎祛痛顆粒中劑量組不僅有效改善骨癌痛大鼠痛覺敏化，還可以延緩腫瘤進(jìn)展，有效改善骨癌痛大鼠的生存質(zhì)量。

作者貢獻(xiàn)度說明：

宋洪麗：負(fù)責(zé)課題實(shí)驗(yàn)操作文章撰寫及數(shù)據(jù)分析；馮永利、王耀焓：負(fù)責(zé)課題實(shí)驗(yàn)操作；馮利：負(fù)責(zé)課題及文章指導(dǎo)。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。