郭海姣， 劉 云， 劉進(jìn)寶， 農(nóng)桂龍， 劉 雯*

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，廣西 南寧 530001；2.徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 徐州 221002；3.廣西國(guó)際壯醫(yī)醫(yī)院，廣西 南寧 530200)

藤茶Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang為葡萄科蛇葡萄屬木質(zhì)藤本植物，廣泛分布于我國(guó)廣東、廣西、湖南、湖北等長(zhǎng)江以南地區(qū)，我國(guó)瑤族、壯族等少數(shù)民族將其嫩葉經(jīng)加工炮制后泡茶服用，習(xí)稱藤茶，又稱霉茶、甜茶藤、山甜茶、白茶、白毛猴、甘露茶，已有數(shù)百年的飲用歷史，收載于《中草藥匯編》《廣西藥用植物名錄》《廣東藥用植物手冊(cè)》等多部著作[1-2]。藤茶葉甘淡，性涼，具有清熱解毒、平肝降壓、活血通絡(luò)的功效，主要用于治療黃疸型肝炎、風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛等癥[3]?，F(xiàn)代研究表明，藤茶具有抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌、抗氧化、抗腫瘤、保肝、降血脂、降血糖、增強(qiáng)免疫力等作用。本文對(duì)藤茶的化學(xué)成分以及近十年有關(guān)藤茶的藥理作用研究和質(zhì)量控制研究進(jìn)行綜述，以期為壯瑤藥藤茶的產(chǎn)品開發(fā)、質(zhì)量控制、臨床應(yīng)用等提供依據(jù)。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮類 黃酮類是藤茶中含量最高的化合物，高達(dá)43%以上[4]，也是藤茶已分離鑒定出種類最多的化合物。目前，在藤茶中分離鑒定出的黃酮類化合物共有31個(gè)，包括4個(gè)黃酮醇類、5個(gè)二氫黃酮醇類、4個(gè)異黃酮類、2個(gè)二氫黃酮類、2個(gè)異黃烷類、13個(gè)普通黃酮類、1個(gè)類黃酮類，其中二氫黃酮醇類的二氫楊梅素是黃酮類成分中含量最高的化合物，見圖1、表1。

圖1 藤茶中黃酮類化合物結(jié)構(gòu)類型

表1 藤茶中黃酮類化合物

1.2 酚類 酚類是藤茶的藥效相關(guān)成分。目前，在藤茶中分離鑒定的酚類成分有4種，包括沒食子酸(32)[17]、沒食子酸甲酯(33)[10]、沒食子酸乙酯(34)、沒食子酰-β-D-葡萄糖(35)[18]，見表2、圖2。

表2 藤茶中酚類化合物

1.3 甾體和萜類 從藤茶中分離得到3個(gè)甾體類化合物和1個(gè)萜類化合物。甾體類化合物包括豆甾醇(36)、β-谷甾醇(37)[17]、齊墩果酸(38)[6]，萜類化合物是龍涎香醇(39)[15]，見表3、圖3。

表3 藤茶中甾體和萜類化合物

圖2 藤茶中酚類化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)式

圖3 藤茶中分離得到的甾體和萜類化合物結(jié)構(gòu)式

1.4 揮發(fā)性成分 經(jīng)GC-MS分析，葉綠醇(40)、正十六酸(41)、雪松醇(42)為藤茶揮發(fā)油中主要成分[19]。除此之外，含量較高的有β-崖柏酮(43)[20]、β-環(huán)檸檬醛(44)[21]、(反)-2-乙烯醛(45)、乙酸乙烯酯(46)、三甲基吡嗪(47)、苯乙醛(48)、α-萜品醇(49)、水楊酸甲酯(50)、香葉醇(51)、β-紫羅酮(，52)、順-茉莉酮(53)、6,10,14-三甲基-2-十五烷酮(54)、橙花叔醇(55)等[22]，見表4、圖4。

表4 藤茶中揮發(fā)性成分及其他化合物

圖4 藤茶中揮發(fā)性成分及其他化合物結(jié)構(gòu)式

1.5 其他化學(xué)成分 王定勇等[10]在藤茶乙酸乙酯部位提取分離得到棕櫚酸(56)、蒽醌類成分大黃素(57)，見表4、圖4。此外，藤茶中富含多糖，采用水提醇沉法提取率最高可達(dá)11.26%[23]，將藤茶多糖進(jìn)一步分離得到4種蛋白結(jié)合多糖，分別為AGP-3、AGP-4、ALPS和ASPS[24-25]。

2 藥理作用

藤茶的傳統(tǒng)功效是清熱解毒、平肝降壓、活血通絡(luò)。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，藤茶具有抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌、抗氧化、抗腫瘤、保肝、降血脂、降血糖、增強(qiáng)免疫力等作用。藤茶在臨床上用于治療黃疸型肝炎、風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、過敏性皮膚病等[3]。

2.1 抗炎、鎮(zhèn)痛 林建峰等[26]通過小鼠耳廓水腫、大鼠足跎腫脹、腹腔毛細(xì)血管通透性、棉球肉芽腫增生以及切除腎上腺的大鼠足跎腫脹實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)藤茶水提物對(duì)急性、亞急性炎癥的滲出和慢性增殖性炎癥都有抑制作用，且抗炎作用不完全依賴垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)。此外，藤茶具有較好的鎮(zhèn)痛作用，在小鼠扭體反應(yīng)和熱板反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中，藤茶水提物可以提高小鼠痛閥[26]。祁佳等[27]通過大鼠足趾腫脹實(shí)驗(yàn)表明，藤茶的水提取物和醇提取物都具有抗炎活性，其中藤茶水提取物具有更強(qiáng)的抗炎活性，其對(duì)足趾腫脹的抑制率和陽性對(duì)照組相當(dāng)，是潛在的抗炎候選原料。藤茶中分離得到的單體楊梅素(1)、楊梅苷(20)也具有很好的抗炎活性，在LPS誘導(dǎo)的小鼠急性炎癥模型中，這2個(gè)化合物都有抑制作用[28]。從藤茶中分離得到的二氫楊梅素(7)具有抗炎活性，在角叉菜膠致大鼠足跖腫脹、急性炎癥模型實(shí)驗(yàn)中，其抗炎效果接近陽性藥吲哚美辛、地塞米松和甲氨蝶呤[29]；體外實(shí)驗(yàn)也同樣驗(yàn)證二氫楊梅素對(duì)炎癥有抑制作用。藤茶的抗炎鎮(zhèn)痛作用具有濃度依賴性，高、中劑量效果顯著，低劑量抗炎鎮(zhèn)痛效果不明顯[30]。

2.2 抑菌 藤茶中分離得到的二氫楊梅素(7)對(duì)金黃色葡萄球菌、副傷寒鏈球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌和枯草桿菌均具有抗菌活性，最低抑菌濃度和最低殺菌濃度分別為0.312 5～2.5 mg/mL和2.5～10 mg/mL，其中對(duì)革蘭陰性菌的抗菌活性強(qiáng)于陽性藥鹽酸小檗堿，且不易產(chǎn)生耐藥性，推測(cè)二氫楊梅素抗菌機(jī)制可能是誘導(dǎo)細(xì)菌的皺縮、聚集和粘附[31]。藤茶中分離得到的楊梅素(1)、山柰酚(2)和槲皮素(3)在1×10-8mg/L質(zhì)量濃度以上對(duì)大腸桿菌有抑制作用，抑制作用由強(qiáng)到弱依次為楊梅素>槲皮素>山柰酚，對(duì)枯草桿菌的抑菌作用比較微弱，對(duì)黑曲霉基本無抑菌作用[32]。此外，藤茶中單體二氫槲皮素(6)、阿福豆素(26)、楊梅苷(20)對(duì)耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌有抑制作用[33]。藤茶中多酚類成分和甾體類成分也具有抗菌活性[34]。由藤茶和芒果葉等制成的復(fù)方藤茶對(duì)金黃色葡葡球菌、白色葡萄球菌、奈氏菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、綠膿桿菌都有較好的抗菌效果[35]。藤茶與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物聯(lián)合使用，可使抗菌藥物的最低抑菌濃度降低，表現(xiàn)出協(xié)同或相加作用[36]。

2.3 抗氧化 黃酮類化合物和酚類化合物被稱為天然抗氧化劑，可以作為自由基清除劑、氫供體、還原劑和金屬離子螯合劑等[37]。藤茶抗氧化活性極強(qiáng)，推測(cè)與藤茶中二氫楊梅素(7)、楊梅素(1)、槲皮素(3)、蘆丁(21)等黃酮類成分以及沒食子酸(32)、沒食子酰葡萄糖(35)等多酚類有關(guān)[38]。體外抗氧化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，藤茶不同提取物有不同程度的體外抗氧化效果，楊梅素對(duì)DPPH的清除作用最強(qiáng)，二氫楊梅素對(duì)·O2-的清除作用最強(qiáng)，對(duì)·OH的清除效果由強(qiáng)到弱依次為楊梅素>二氫楊梅素>藤茶總黃酮[39]。關(guān)于藤茶抗氧化作用機(jī)制研究主要集中在含量較高的二氫楊梅素(7)上，通過DPPH法和ORAC法發(fā)現(xiàn)，二氫楊梅素具有很強(qiáng)的抗氧化能力，可作為用于人體生物學(xué)的抗氧化劑，推測(cè)其抗氧化作用可能是通過激活細(xì)胞Nrf2/Keap1途徑[40]。藤茶總黃酮在0.5～10 mg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性，對(duì)脂肪氧合酶和H2O2誘導(dǎo)的小鼠紅細(xì)胞溶血具有抑制作用，還可減少小鼠肝線粒體及肝勻漿丙二醛的生成[41]。此外，藤茶多糖也具有抗氧化作用，羅祖友等[42]在體內(nèi)外抗氧化活性實(shí)驗(yàn)中證實(shí)，藤茶多糖在一定范圍內(nèi)具有抗氧化作用。在藤茶莖葉中分離得到的蛋白結(jié)合多糖ALPS和ASPS對(duì)α-葡萄糖苷酶具有抗氧化活性和抑制作用，其中ASPS作用效果更強(qiáng)[25]。藤茶乙酸乙酯部位分離得到的蛋白結(jié)合多糖AGP-3也具有體外抗氧化作用，采用試劑盒方法和分光光度法測(cè)定發(fā)現(xiàn)，AGP-3在化學(xué)模擬體系具有一定的還原能力和清除活性氧能力[43]。

2.4 抗腫瘤 藤茶中楊梅素(1)可抑制肉瘤細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、白血病細(xì)胞增殖，也可抑制肉瘤細(xì)胞、肝癌細(xì)胞誘發(fā)的移植性腫瘤，其抑制率均可達(dá)30%[44]。經(jīng)二氫楊梅素(7)處理后的胎盤絨毛癌細(xì)胞JAR粘附和侵襲轉(zhuǎn)移能力降低，推測(cè)可能是通過PI3K/Akt信號(hào)通路抑制JAR細(xì)胞中MMP-2活性，進(jìn)而抑制絨癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移[45]。在體外實(shí)驗(yàn)中，藤茶總黃酮對(duì)乳腺癌細(xì)胞和前列腺癌細(xì)胞具有抑制作用，推測(cè)可能與異黃酮類植物雌激素有關(guān)[46]。羅祖友等[47]提取藤茶多糖并通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究其抗癌和免疫增強(qiáng)活性，發(fā)現(xiàn)藤茶多糖具有體內(nèi)抑制S180小鼠腫瘤生長(zhǎng)的作用，其機(jī)理可能是通過增強(qiáng)荷瘤小鼠免疫力和抗氧化能力。

2.5 保肝 藤茶總黃酮和二氫楊梅素(7)對(duì)CCl4所致的大鼠肝纖維化有保護(hù)作用，初步推測(cè)其保肝機(jī)制可能是與總黃酮和二氫楊梅素在肝纖維化形成中具有抗脂質(zhì)過氧化和清除氧自由基的作用有關(guān)[48]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，二氫楊梅素對(duì)肝纖維化和肝星狀細(xì)胞活化的抑制作用是通過降低肝膠原沉積和細(xì)胞外基質(zhì)沉積，降低α平滑肌肌動(dòng)蛋白、α-SMA、TIMPs、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1、磷酸化Smad3的表達(dá)，增加MMPs和Sirt1的表達(dá)，阻斷肝星狀細(xì)胞的活化來實(shí)現(xiàn)的[49]。另有研究發(fā)現(xiàn)，二氫楊梅素可阻止高脂誘導(dǎo)的小鼠體質(zhì)量增加，降低肝臟脂質(zhì)沉積、血清甘油三酯和總膽固醇水平和歸一化內(nèi)源性代謝物濃度，推測(cè)二氫楊梅素的保肝活性可能與高脂血癥對(duì)多種代謝途徑的有害作用有關(guān)[50]。在高脂飲食NAFLD小鼠實(shí)驗(yàn)中，灌胃給予藤茶水提物(300 mg/kg)，連續(xù)42 d，結(jié)果顯示，NAFLD小鼠的肝指數(shù)，血清TC、TG、ALT、AST水平，肝臟TC、TG水平均較模型組降低，提示藤茶對(duì)非酒精性脂肪性肝病有治療作用，其機(jī)制可能與藤茶抗炎抗氧化、保護(hù)肝臟、減輕肝臟脂質(zhì)沉積有關(guān)[51]。

2.6 降血脂、降血糖 藤茶中二氫楊梅素(7)可以改善高脂飲食喂養(yǎng)大鼠的葡萄糖相關(guān)代謝，同時(shí)降低脂質(zhì)水平，提示藤茶可能是治療2型糖尿病的有效藥物[52]。一系列的研究顯示，二氫楊梅素對(duì)血糖控制作用的機(jī)制可能是通過改善葡萄糖攝取和胰島素抵抗來實(shí)現(xiàn)的。Liu等[53]發(fā)現(xiàn)，二氫楊梅素通過抑制ERK誘導(dǎo)的PPARc在絲氨酸273處的磷酸化而改善脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝??；在棕櫚酸酯誘導(dǎo)的L6肌管胰島素抵抗實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，二氫楊梅素可以升高磷酸化胰島素受體底物-1和蛋白激酶B，并提高相應(yīng)的葡萄糖攝取能力，通過分子對(duì)接和熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)觀察到，二氫楊梅素可以與PPARγ的催化結(jié)構(gòu)域?qū)?，并呈劑量依賴性地升高PPARγ的活性，推測(cè)二氫楊梅素可能是PPARγ的潛在激動(dòng)劑，通過激活PPARγ進(jìn)而調(diào)節(jié)FGF21-AMPK信號(hào)通路促進(jìn)胰島素增敏[54-55]。

2.7 增強(qiáng)免疫力及其他 藤茶中楊梅素(1)可以促進(jìn)免疫力低下小鼠體內(nèi)溶血素的生成，提高單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力，說明楊梅素對(duì)非特異性免疫和體液免疫均具有增強(qiáng)作用[56]。采用同位素測(cè)定小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)強(qiáng)度的方法，發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素(7)可增強(qiáng)Con A誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖[57]。此外，藤茶還具有抗病毒、抗?jié)儭⒔笛獕?、祛黑色素等多種藥理活性。

2.8 毒性與安全性研究 采用小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)檢測(cè)藤茶提取物的毒性，結(jié)果顯示，藤茶急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)LD50>21.5 g/kg，Ames試驗(yàn)等均為陰性，屬于無毒級(jí)[58]。在大鼠長(zhǎng)期毒性模型中，藤茶總黃酮各劑量組對(duì)動(dòng)物的外觀行為、體質(zhì)量、臟器系數(shù)、血液學(xué)和生化學(xué)指標(biāo)與空白對(duì)照組比較無明顯差異，病理檢查未見與藥物毒性相關(guān)的明顯病變，停藥后也未見藥物延遲性毒性反應(yīng)[59]。

3 質(zhì)量控制

藤茶被湖南等地方標(biāo)準(zhǔn)收錄，僅有性狀以及鑒別(顯微鑒別，薄層鑒別)項(xiàng)，無法有效控制藤茶的質(zhì)量。范莉等[60]建立藤茶HPLC指紋圖譜共有模式，提取了24個(gè)共有峰，并指認(rèn)了3個(gè)色譜峰，分別為二氫楊梅素、楊梅素和楊梅苷。常敬芳等[61]分別對(duì)藤茶中二氫楊梅素、楊梅素、楊梅苷、蘆丁、香橙素進(jìn)行含量測(cè)定。上述研究為藤茶的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)，但是仍有不足。藤茶中化學(xué)成分復(fù)雜，現(xiàn)有的測(cè)定指標(biāo)較少，主要集中在二氫楊梅素、楊梅素、楊梅苷3種組分上，專屬性不強(qiáng)[62]。中藥質(zhì)量標(biāo)志物跟中藥的功效相關(guān)，可以克服現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)多種不足，提高質(zhì)量一致性、可控性和溯源性，有利于中藥產(chǎn)品生產(chǎn)過程控制和質(zhì)量監(jiān)管[63]。目前藤茶質(zhì)量標(biāo)志物相關(guān)研究鮮有報(bào)道，有待加強(qiáng)研究。藤茶的指紋圖譜大部分色譜峰尚未歸屬，有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)語與展望

藤茶主要分布在湖北、湖南、廣西、貴州等地，野生資源豐富，隨著市場(chǎng)需求的增多，栽培產(chǎn)業(yè)也日漸發(fā)展壯大[64]。現(xiàn)代研究表明，藤茶中主要含有黃酮類、酚類、甾體和萜類、揮發(fā)性成分等化合物，并含有氨基酸、礦物質(zhì)元素、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)成分[65]，具有抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌、抗氧化、抗腫瘤、保肝、降血脂、降血糖、增強(qiáng)免疫力等生物活性，且安全無毒副作用。目前，藤茶的主要活性成分二氫楊梅素被研制成用于治療呼吸道感染、酒精中毒的中成藥制劑[66]，劑型包括片劑、膠囊劑、固體分散體、磷脂復(fù)合物納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體、胃漂浮緩釋片等。另外，藤茶因具有減少肝損傷、醒酒等多種保健功效，被廣泛使用并開發(fā)成不同劑型的保健產(chǎn)品[67]；因其具有抗氧化能力被用作食品添加劑[68]。藤茶在藥品、保健品以及食品添加劑領(lǐng)域具有較大的開發(fā)應(yīng)用前景。

從藤茶中已分離鑒定得到57個(gè)化合物，近期關(guān)于藤茶的化學(xué)成分研究較少，近五年僅有2篇文獻(xiàn)報(bào)道，近十年僅有6篇文獻(xiàn)報(bào)道。藤茶的藥理作用近幾年研究較多，但大多圍繞著含量較高的2個(gè)活性成分(二氫楊梅素和楊梅素)，尚缺乏全面系統(tǒng)的藥效組分篩選研究。另外，藤茶的作用機(jī)制研究還不夠全面深入，尚需要進(jìn)一步研究。藤茶尚未有完善的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，文獻(xiàn)報(bào)道的含量測(cè)定方法指標(biāo)單一，指紋圖譜大部分色譜峰尚未歸屬，有待進(jìn)一步研究。

因此，亟待對(duì)藤茶的化學(xué)成分、藥理活性以及質(zhì)量控制方法進(jìn)行系統(tǒng)研究，進(jìn)一步闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制，并建立全面的質(zhì)量控制方法，為藤茶的臨床應(yīng)用、質(zhì)量控制、資源利用、產(chǎn)品開發(fā)等提供重要的科學(xué)依據(jù)。